Глик, Пастернак - Молекулярная биотехнология - 2002 (947307), страница 56
Текст из файла (страница 56)
С. Ярйаег, Я, 1.. Стасе, Я. Р. Вгйа!. 1991. 8!п81е ппс1со|Ыс рпшсг ех|епгйош |о йсгесг 8спсйс йзеаася: схрепшеша1 арр1ка|юп |о ЬешорЬ|йа В (Гас|ог 1Х) апг( суяйс Г|Ьгоа|з 8епсз. Р|ос. А(а!!. Асад. Всб Г(ВА 88| 1143 — 1147. Ма!Ье|гв Л. А., 1, Л. К«1сйа. 1988. Апа!уйса! в|га|е- 8!ев Гог Гбе пве ОГ ОЬ(А ргоЬек Ала1. В!осйет. 169: 1-25. Мсйегаоп О. А., й.
Ка!аег, Я. Ьаррш, Л. Вге|гаг(, 1,. Ноой, Ц. Еапйейгегь 1990. Ашоша|еб глчА йайпоабс пз!п8 ап ЕГЛВА-базе|! о103оппс1со|Ые Ийайоп аззау. Р«ос. А(а(!. Асад 5сб РЕА 87: 8923-8927. Микробиологическое производство лекарственных средств 203 Регяп8 О. Н., Т. Р.
Япт(!Ь, Р. С. Тепо*ег, Т.,1. Ъ»Ы!е (е4.). ! 993. Наялаы(с Мой си(а«М(с«а(т(а(а((ут Рплс(р(еь аттг( АР(т((са((аль. Атпебсап Косте(у !ог М(сгоЫо!ойу, 5УаьЫпбгоп, О.С. Рйкаут!ь В. В., К. Н. Ое1Ьег, Т. М. Яйпп(с(т. 1990. КарЫ апд ьепя6»е т!с(ест(оп оГ Мусабас(слит (ер«ае пяп8 а пеь!ед-рг(апет репе ашр!тТкайоп аььау. Х СВл. (г!(с«аЫа(. 28: 1913 — 1917. Райан(-Кшйбй О., А. С. В(шгпопг(ь, А. Р. Ясйаар, Н. АИ агап, М. А. от. Вгабу.
1990. (Чопгат(1оасбте О('(Л г(с!ссбоп оп Вонббегп Ыогь Ьу епгушабса!(у !п88егчЫ сйспп1нпнпсьсепсе. Атта(. В(осйегл. 185. "353 — 358. КаГа!ьИ Л. А., Я. Ъ'. Т(пйеу. 1993. Оспсбс б(а8поь6сь и р1ап! Ьгесгйпй: КЛРОь, тпктоьате!1йеь апт( тасЬшеь. Х«е«л(ь Стяге(. 9: 275 — 279. БаИ К. К., Р. Я. %а1ят, С. Н. 1етепязп, Н. А. Егйсй. 1989. Оспсбс апа1уяь оГ ашрббед РЬ(А тг(т!з (шшоЫ!(хег( ьсйцспсе-ьресгбс о!18огшс(со!Ые ргоЬеь.
Ргпс. Ага((. Асаг(..зс(. ((5А 86т 6230 — 6234. Вау1ег 6. Я., А. С. !лугов. 1990. Епх(гошпепга1 аррйсабоп оГ ппс!ек асЫ Ьубпг((габоть Алли. Век М(с«о(з(о(. 44: 625 — 648. Туа8! Я., Г. К. Кгашег. 1996. Мо1есн!аг Ьеасопгс ргоЬеь Гбаг Ршогсьсепсе прон ЬуЬпд(хабоп. Хат. В(агес((ло(. 14т 303 — 308. УУа14шапп Т. А. !991. Мопос1опа1 апббюЖеь ш т!(айпоь(ь апд тйсгару. Вс(елее 252: 1657 — ! 662.
5Уе!ьь Л. В. 1995. ПЫЛ ргоЬсь апт1 РСК Гог г((абпояь оГрагаь!6с шГеспопь. Сбл. М(с«а(т(а(. Век 8т 113- 130. '»УЫ!е Т. Л., Х. Апгйе(в, Н. А. Егйсй. !989. ТЬе ро1упзсгаье сЬаш геаспоп. 7«ела(ь Осле(. 5: 185 — 188. ЪЧйе Т. Л., К. Маг!е1, О. Н. Реть(п8. 1992. Т!те ро!утегаье сйаш гсасбоп: сйшса( арр!кабопь. Ат(к С((л. Сйет. 29: 161--196. 1»!п1ег б., С. М1!ь!еш. 1991. Мап-ипат(е ап6Ьот((еь, (Уа(и«е 349: 293 — 299.
Ъ'и К. Р., А. т'ап Оеупке, К. Р. Рав!ь. 1993. Капе(отп ашр!сбег! ро1упютрИс ОЫЛ (КЛР(3! апа1уяь, р. 287 — 301. Гл В.К. О!(с!т апг1 Л.Е. ТЬошрьоп (ег!.), Ме((таить тл Р!ал( Мо(еси(а«В(а(аеу ала' Вю(ес(иа(аду. СКС Ргеьь, Воса Ка!оп, Е!а. КОНП ОЛЬНЫК ВОИРОСЫ 1. Кратко опишите, как с помощью ППР можно выявить изменения в гене р-глобзина человека, приволящис к серповилноклсточной анемии. 2. Изложнице принцип метода ПЦР/Л(03.
3. Что такое метод Е118Л? 4. Опишите трн способа нерадиоактивного мечения ДНК. Каковы г(рсимущества нерадиоакгивных моголов лстекции? 5. Перед вами стоит задача разработать простой, чувствительный и воспроизводимый тест Лля обнаружения солержащего двухцепочсчную ДНК вируса, вызывающего лсттшьную инфскцикз у крупного рогатого скота. Поскольку эффективность лечения зависит от ранней и точной лиагностики заболеванигц необхолимо использовать мстолы, позволяющие вьивлять вирус при сто минимальном содержании в организме инфицированного живот»того, ептс до появления каких-либо симптомов заболевания.
Кратко опишите и обоснуйте цоследовательггость ваших действий. 6. Что означакп чувствительность, спспифичность и простота применительно к диагностическим тестам? 7. Как в настоящее время лиагностируют болезнь Чагаса? Каким образом можно усовершенствовать существующую процслуру? 8. Почему использование флуоресцентных красителей облегчает обнаружение специфических нуклсотидных последовательностей? 9.
Что такое зонд — <люлекулярный маяк» и как он действует? 10. Что такое гсномная дактилоскопия и как ее используют для характеристики слеловых количеств ДН К в судебной медицине? 11. Что представляет собой мстол КАРО и как сто используют для выявления генетических вариантов растительных культур'? ГЛАВА 1 О Микробиологическое производство лекарственных средств Лекарственные препараты До появления технологии рекомбинантных ДНК многие лекарственные препараты на основе белков человека удавалось получать только в небольших количествах,их производство обходилось очень дорого, а механизм биологического действия иногда бьш недостаточно изучен. Предполагалось, что с помощью новой технологии можно будет полу ~ать весь спектр таких препаратов в количествах, достаточных как для нх эффективного тестирования, так и для применения в кли~ ~икс.
И эти ожидания оправдались. На сегодняшний день клонировано более 400 генов (в основном в виде кДНК) различных белков человека, которые в принципе могут стать лекарственными препаратами. Больплинство этих генов уже экспрессированы в клстках-хозяевах, и сейчас их продукты проходят проверку на возможность применения для лечения различных заболеваний человека (табл. 10.1). Впрочем, хотя более 30 таких биотехнологических препаратов и получило одобрение в США (табл. 10.2), пройдет еще несколько лет, прежде чем они будут рекомендованы для широкого использования и поступят в продажу; вначале нх подверп1уг проверке ца животных и проведут тшатсльныс клинические испытания. Однако фармапевтические фирмы уже сейчас проявляет к ним интерес.
По подсчетам специалистов, ежегодный объем мировопз рынка лекарственных препаратов па основе белков человека составляет около 150 млрд. долларов и постоянно растет. Объем мирового рынка лекарственных средств на основе рекомбинантных белков увеличивается на 12 — 14% в год и к 2000 г. составит примерно 20 млрд. долларов. Разработка новых методов профилактики и лечения многих заболеваний человека внесла огромный вклад в рост блапзсостояния лк>дей в ХХ в. Однако этот процесс никогда нельзя считать завершенным. Так называемые «старые» заболевания (например, туберкулез) могут дать о себе знать вновь, как только будут ослаблены профилактические меры или появятся рсзистентпыс штаммы.
Весьма привлекательной выглядит перспектива применения в качестве терапевтических средств специфических антител; их можно будет использовать для нейтрализации токсинов, борьбы с бактериями, вирусами, для лечения раковых заболеваний. Антитело можно уподобить самонаводящейся ракете, которая либо нейтрализует <наруд1ителя» — чужеродный агент, либо, если она оснащена <босголовкой», разрушает специфическую клетку-мишень. К сожалению, несмотря на многообещающие возможности, антитела довольно редко приме~шлись для профилактики и лечения болезней и других патологий. И лишь в последнее время, с развитием технологии рекомбинантных ДНК и разработкой мстадов получе~ ~ил моноклональных антител н с расшифровкой молекулярной сзруктуры и функции иммуноглобулинов, интерес к применению специфических антител для лечения различных заболеваний вновь пробудился.
Выделение кДНК интер4ероиов Для выделения генов или кДНК белков человека использую~ разные подходы. В ряде случаев выделяют нужный белок и определяют аминокислотную последовательность соответствую- Микробиологическое производство лекарственных средств 205 Таблица /О. Д Некоторые белки человека, получсннь!с !снноннженсрными методами Заболеваиие/Физиола~мческвй провеес Бе.юк Ревматизм Эмфизема Раыичные инфекции Анемия Залсржка роста Сахарный лиабет Сахарный диабет, почечная педссгпоч носи, Злокачсспзенное новообразование, иммунные заболевания Вирусные заболевания, злокачественное номюбразояаиие, рассеянный склероз Осчег1мвляция Злокачесыенное новообразование Боковой амигпрофический склероз Роды Астма, ревматоидцый артрит Задержка роста Задержка росы Дефицит белков плазмы Рак !ггиювгвпгой железы Тромбообразовапис Атеросклероз Язвы Трал!бообразование Злокачественное новообразование Злока шсп!с!и!ос новообраювание Повреждение нервной ткани Ожоги Гемофилия Гемофилия Иммуиные заболеязнии Злокачественные новообгизования Женское бес пзолие Боль Анемия,заболевания почек шсго участка молекулы.