Методы общей бактериологии (том 2) (947293), страница 84
Текст из файла (страница 84)
д. [361 Пнкл трнкарбоновых кнслот (цикл Кребса), глнокснлатный цикл [391 Метаболизм СОт 18.6. ЛИТЕРАТУРА 1 Агпдопг Р., Вгпйег Т. Р. )48!иге (1опбоп), 183, 1256 — 1258 (1962) . 2. АГЫ«мон П Е. Сени!аг епегйу гое1аьо1ззгп апг[ Из гейи1аноп, Асабепт[с Ргезз,! пс., астм Ъог[т, 1977. 3. Вепггег В. А„!апззеп К. А., !1езп(сй А. Ег„В1нпзбегй М., Гоог Е., 34ааазппй В, 3. Вас(ег[о!., 129, 1001 — 1009 (!977). 437 Прекрасное общее описание таких методов дано в книге «Ме[Ьог[8 !п М[сгоЬ[о[оКу».
Специальная подробная информация, необходимая для выполнения таких методик, содержится в книге «Ме(Ьог[з нп Епаугпо[оду». Ключевые ферменты основных путей метаболизма с указанием соответствующих источников данных перечислены в табл. 18.3. частыч мпчапоппЗм 4. Вийи б. Л. Мо!. В!о1., 7, 164 — 182 (1963). 5.
С!агуе Р. Н. 1п: Л. й. Хогг!в апд О. 9!. й!ЬЬопв (ед.), Ме1Ьодв 1п т!сгоЬю1оду, чо!. 6А, р, 269 — 326, Асадепис Ргезв, !пс., Хегч УогЬ, 1971. 6. Ссай!еу )Р. Т., Ва!ег А. У., Удоуд О. Адч. М!сгоЬ. РЬувю!., 16, 279 — 341 (1977). 7. Сага-йоЫея Е. Н., 5!ещ 3.
1п: А. !. 1.ав1с!п апд Н. А. 1.есЬечаИег (ед.), НапдЬооЬ о1 т!сгоЫо1оду, чо1. 2, р. 833 — 843, СйС Ргевв, С1ече1апд, 01по. 8. Оау!еу Е., СЬартап Р. 1, 1п; Л. й. ХоггЫ апд Р. %. й!ЬЬопв (ед.), чо1. 6А, р, 269 — 326, Асадепас Ргезв, 1пс., Хечг 'гог)г, 197!. 9. ОесЬег Е. А. (ед.).
%ог!ЫпИ(оп епгуте гпаппа), Тессе(Ып6!оп В!осЬет(са!з Согр., РгееЬо1д, Х. Л.,!977. 1О. ОоЬгодояг )ч. У. Л. Вас!епо1., 91, 2263 — 2269 (!966). 11. ОоЬгодояг )Р. У. Л. Вас1егю)., 95, 578 — 584 (1968]. 12. Ооугоуояг 97. У. Л. Вас!епо1., 95, 585 — 59! (! 968).
! 3. ОоЬгоуозг %'. У. Л. Вас!ег!о1., 97, 1083 — ! 092 (1969). 14. Еагоа Н. й. 1п: Л. й. Хогг!я апд О. 1Ч. й!ЬЬооя (ед.), МеРЬодв 1п т!сгоЬ!о1обу, чо1. 68, р. 231 — 246, Асадеппс Ргевв, 1пс„Хеяч УогЬ, 1972, 15. Е!зепЬегу Тс, С., ОоЬгоуозе Ф'. У. Л. Вас1сг!о1., 93, 94! — 949 (!967). 1б. Регабпапд ИГ. ТЬе епгуте то!еси1е. ЛоЬп яг'Иеу 8 бопв, 1пс., Хечг УогЬ, 1976.
17. басЬейа б. В!осЬет. В!орЬув. йев, Соппппп., 34, 382 †3 (1969). !8. Нафеб( б. %'., ОтЬагуег Н. Е. Ме(Ьодв Епгуто!., 178, 56!— 566 (1971). !9. Неяя В. !п: Н. Н. Вег8теуег (ед.), МеРЬодв о1 епгутабс апа!увйь р. 43 — 55, Асадеппс Ргевв, 1пс., Хеяч УогЬ, 1963. 20. Н!га!а М., ТоуияИ!уе М., ТпацаМ А., НауайМ О. Л. Вю!. СЬет., 240, 17!1 — 17!7 (1965). 21. Но!гег Н., Оип!ге Яг. Аппп. йеч. ВюсЬегп., 40, 345 — 374 (197!). 22. НиуЬея О. Е., УР!треппу )Р.
Т., Е!суд О. 1и: Л. й. ХоггВ апд О. )Г!Г. й)ЬЬопя (ед.), Мейгодз (п т!сгоЬю!оау, чо!, 5В, р. 1 — 54, Асадепйс Ргевв, 1пс., Хегч Уог1с, 1971. 23. Кабасй Н. й. Ме!Ьодз Епгуто1., 22, 99 — 120 (!971). 24. К(аудит Н. Я., В!ад!тап Е. й. Л. Вас!епо1., 94, 949 — 957 (!967).
25. КосЬ А. У.. Л. Мо1. Вю1., 59, 447 — 459 (1971). 26. Ее!ое У. Л. Вю1. СЬет., 243, 2373 — 2380 (1968). 27. У.огее То Н., Еоапя Н. У. В1осЫт. В!орЬув. Ас!а, 85, 377 — 389 (!964). 28 Майегз С. 1. Спгг. Тор. Сей. йе8ц!., 12, 75 — 105 (1977). 29. МсС!иге 57. й В1осЬет!в!гу, 8, 2782 — 2786 (1969). 30. Месуе О., 6гиЩ К., Но!гег Н. В(осЫт. ВюрЬув. Ас!а, 128, 559— 567 (1966). 31. Негдаагдг Р. С., Воуд й, Р. Се1! Ыо)оду; а 1аЬога1огу 1сх1, Впгпезв Рпд!!вЬ!п8 Со, М!ппеаройв, М1пп., 1965.
32, Неи .Ч. С., Нерре! У.. Л. Л. В1о1. СЬет., 239, 3893 — 3900 (!964). 33, Неи Н. С., Нерре! 1.. А. Л. Вю). СЬегп., 240, 3685--3692 (!955). 34, Рагдее Л. В., Уасоб Р., Моиод 1. Л. Мо1, В!о!., 1. !65 — 178 (!959). 35, (~иау!е У. й 1п: Л. й. ХоггВ апд О. 'йг. й!ЬЬопв (ед.), МеРЬодв 1п |в. <аирментлтнинля л8?иинос?ь в(огайо(о8у, чо1, 6В, р. 157 — 183, Асадев1с Ргеяв, 1ос., Ыевг уогК, 1972. 36. Кееаез Н.
С., КаМа К., Юзуепзг )р. 5, А!! 5, А 1и; Э. К. Ыогг!в апд Р. %. К!ЬЬопв (ед.), Ме11юдв !и в!сгоЬ|о1оду, чо1. 6А, р. 425 — 462, Асадеппс Ргевв, 1пс., Ые<ч ЧогК, 19?1. 37. КгразАз К. В1осЬпп. ВюрЬув. Ас1а, 22, 189 — 191 (1956). 38. Кобег!з К. В., Лйейоп Р. В., Сов|я Ь.
В., ВоКоп Е. Т., Вг|пеп К. 5!пд!ев о1 Ыояуп18ев|в !и Езсйег!с!Ва со!!. Сагпеб(е 1пв(. %авЬ!п8- (оп Рпй., 607 (1957). 39. Беги!оп М. С. 1п: Л, К, )(огг(в апд О. ЛЧ. К!ЬЬоив (ед.), Ме(Ьодв |и в!сгоЫо!обу, чо!. 6А, р. 479 — 541, Асадев|с Ргевв, 1пс., Ыечг УогК, 1971. 40. 5)<ар<го В. М„Б!ад!тап Е. К. Ме|Ьодв Епвуво!., 17, 910 — 922 (1970). 41. Бтуггг|ог!з Р. 2. Ме|Ьодя Епхуво1., 5, 344 — 347 (1962). 42.
Бо!з А., Кеесея К. Е., Оапсздо С, 1и: Е. Н. Р(всЬег, Е. Сг. Кгебв, Н. Хепга1Ь, апд Е. К. 5!ад!вап (е<Ц, Ме1аЬоИс |псопчегяоп о1 еивувев, р. 393 — 399, Брпп8ег-Чег!ад, ВегИп, 1973. 43. Бо!з Л., Ба!аз М. !.. Мсббодв Епау|по1., 9, 436 — 442 (1966). 44, 5!адгтаа Е. К., Сбое!< Р. В., Ад!ег 5. Р.
!и: 5. 8ЬаКИе1 (ед.), Ме1аЬоИс |п1егсопчегвюи о( епкугпея, р. 142 — !49, Брпп8ег-Чег1а8, Вегбп, 1976. 45. 5!ад!тап Е. К„Бтуга|оКз Р. 2., Оаа!з А Аг., Ф|!!епбзгуег М. Е. Аиа1, ВюсЬев., 95, 275 — 285 (1979). 46. (|тбпгуег Н. Е, 1и: А. 1. 1.аввп апд Н. А. ! есЬечаИег (ед.), НапдЬооК о1 <п<сгоЬ!о(о8у, чо1. 4, р. 35 — 42, СЙС Ргевв, С!ече1аод, ОЫо, 1974. 47. Ващ С. Н.
1и: д. К. Ыогг!в апд О. ТЧ. К|ЬЬопв (ед.), МеРЬодв |и вкгойо!о8у, чо!. 68, р. 185 — 230, Асадев|с Ргеяв, 1ис., Ыечг Уог!<, 1972. 48, )Т!г!!з К. А ВюсЬев. д., 106, 847 — 858 (1968) . 49. <Уг!!зоп О. М., А!дег!з Т. Р., Ма!оасу Р. С„Ю!зоп Т. Н. 5. Вас1епо1., 126, 327 — 337 (1976). 5|0. В'сод 1Г А.
1и: Л. й. НоггВ апд (1. ТЧ. Е(ЬЬопв (ед.), Ме!Ьодв |и в(сгоЫо)обу, чо!. 6А, р. 411 — 424, Асадеи|к Ргеяв, 1пс., Не<в УогК, 1971. 51, Татаа)га К., (Тгоод 9г, А. Ме|бодя Епвуво(., 9, 596 — 602 (1966). Глава 19 ПРОНИЦАЕМОСТЬ И ТРАНСПОРТ Р. Маркис Хотя детали прохождения растворенных веществ через барьеры проницаемости бактериальных клеток на молекулярном уровне по существу неизвестны, все же можно различать процессы двух основных типов — пассивное проникновение и (активиый) транспорт. Проникновение — это пассивный переход растворенного вещества внутрь клетки (поглощение) нли из клетки наружу (выделение) путем диффузии, которому может способствовать химическое взаимодействие между растворенным веществом и какой-либо клеточной структурой, например мембраной.
Клетка может быть проницаемои или непроницаемой для данного вещества. Проницаемость — это свойство клетки, а не растворенного вещества. Проникновение растворенного вещества через клеточную мембрану можно описать ураннением Ы/й = РА(бС), где д51Ж вЂ” изменение количества растворенного вещества внутри клетки в единицу времени, Р— коэффициент проницаемости (с размерностью расстояние/время), А — площадь мембраны и ЛС вЂ” разность концентраций растворенного вещества внутри и вне клетки. Если построить график, отложив внутреннюю концентрацию растворенного вещества (С,„„„) как функцию времеви, то получится параболическая кривая, которая переходит в плато прн Сею ~р" Ср~~ц ц т. с, когда внутрен няя концентрация равна внешней или, точнее, когда акзивность растворенного вещества внутри клетки равна активности его вне клетки.
Для такой кривой Св р=- = (шах С.„т„) (1 — е-"), где й — константа, а 1 — время. Транспорт — это процесс активного перемещения растворенного вещества в клетку или из клетки, который связан с метаболизмом и в котором могут участвовать энергизованные переносчики. У бактерий наиболее изучены два класса транспортных систем — фосфотранс- 440 Нс ПРОНИЦАЕМОСТЬ И ТРАНСПОРТ феразные и так называемые пермеазпые системы [15, 34].
Фосфотрансферазная система встречается главным образом у факулыативных анаэробов и предназначена для транспорта сахаров [391, тогда как пермеазные системы для транспорта аминокислот, сахаров, неорганических ионов и предшественников нуклеиновых кислот имеются почти у всех бактерий. Кривая, описывающая ход поглощения растворенного вещества во времени, для процессов транспорта качественно ие отличается от аналогичной кривой для пассивного проникновения. Однако активное поглощение не прекращается при С99ттр — Сц9ешм а продолжается теперь уже в форме так называемого концентрирующего транспорта — до тех пор, пока будет создан значительный градиент концентрации. Максимальное поглощение определяется соотношением между скоростями процессов, направленных внутрь и наружу. Как уже говорилось, путем транспорта может осуществляться и выделение, и поглощение растворенных веществ клетками.
Многие растворенные вещества транс. портируются в ходе так называемой обменной диффузии, т. е. При обмене внутренних и наружных веществ через мембрану в соотношении 1: 1. Такой обмен обычно изучают при помощи растворенных веществ с радиоактивной меткой [13]. Концентрирующее поглощение растворенных веществ не требует обязательного участия мембраны и транспортных катализаторов. Ионообменные смолы, например, способны поглощать и концентрировать ионы.
Г>ольшинство органических компонентов клетки находятся не в водном растворе, а в твердых фазах клеточной стенки, мембран, рибосом, нуклеоида и т. д. и потому могут поглощать растворенные вещества так же, как смола. Этот аспект транспорта и проникновения растворенных веществ рассмотрен в обзоре Дамадьяна [121. 19.1. ПРОНИЦАЕМОСТЬ 19.1.1. Методика измерения Проникновение растворенного вещества в бактериальные клетки или клеточные структуры чагце всего измеряют с помощью объемного метода или метода кон- плоть це мвтлволизм центрированной взвеси, описанного Конвэем и Дауни 111) и модвфицированиого Митчеллом и Мойлом 1321, Мак-Дональдом и Герхардтом 1261 и другими. В этом случае используют обычно большие массы клеток — 3 г и больше 1влажпых клеток) на пробирку.