Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.1 (522940), страница 98
Текст из файла (страница 98)
2 х 107 тгапауогптет) со!ошеа аге Вепегатег! рег пт!сгоцгатп ОТ депопт!с РЫА (Ватеа 1987! Ечапз ет а1. 1992). 1дг!тЪ ЬЬ18 !ече1 оу еТВс!епсу, оп!у 5 р8 оу рагт!аПу т!!деатег! Вепопт!с РЫА !5 пее11е11 Со депегате а!!Ъгагу тЪат !8 а теазопаЫе гергезептат!оп ОГ а тпапппа!!ап Вепотпе. Ргогосо! 1: Сопьггисйоп оЕбепопз)с РЖА ЕЕЬгаг)ег гп Согпг)г) Ъесгогг 4.15 Риг)п8 68аг)оп, йеге 13 а гйс йас вшаПег 6 аПшептв оЕ еи1сагуо6с РХА 1п ТЬе ргерагагюп тнП! 68аге го опе апойег апг1 го йе совш16 нес!от ргог)ис)п8 гесогпЪгпапгв йаг сои)а!п вег)иепсев г)еггнег) Егогп гтно ог гпоге попсопг18цоив веПшепгв оЕ йе Пепоше. А рорц!а6оп оЕ РХА Ега8шепгв тч)ТЬ ап анега8е в!ге оЕ 42 1сЪ М11 сои)а!п гпапу пю1еси!ев йат аге вЬоггег йап ТЬе гпеап.
А)ТЬоцПЬ ТЬеве вЬоггег гпо1еси!ев птау сошрпве оп!у а Егасгюп оЕ 1Ье гога! зне!ПЬТ оЕ ТЬе РМА, йеу шансе а гпоге вцЪяапПа! сопгпЬи6оп со йе пцшЬег оЕ гпо1еси!ев !п ТЬе рори1аПоп. Ав тЬе )ипег)св оЕ ППаг!оп аге г!есегшшег) Ьу ТЬе сопсепгга6оп оЕ геасггче сегпиш оЕ РХА, йеве япаПег гпо!еси1ев Ьесогпе ргеЕегеп6аПу )псогрогатег) )псо сопсагешегв, тчЬкЬ гпау Ье оЕ а яге вциаЫе Еог рас)га81п8 !п нПго. ТЬгее шегЬог!в аге анаг!аЫе го гег!исе йе пшпЬег оЕ ипг!еягаЫе сЬппегк с1опев ш сояпгП ПЬгапея ° Ав г1евспЬед ш 1Ье ЕоПочпп8 ргогосо1, йе рагПаПу г!18евгег) Пепопис РЫА гпау Ъе сгеагег1 тч!ТЬ аПса1ше РЬоврЬасаве Ьеуоге 68агюп. ° ТЬе соЬеяне епс)в оЕ ТЬе Пепош)с апг) сояпгП Ров шау Ье раг6аПу ЕгПег) во йаг ТЬеу ППасе оп1у го еасЬ о)Ьег апг1 пот со ТЬешве1нев ЕНип8 апг1 Юепяп)с 1984; ХаЪагонв)су апг) АППсшегв 1986; 1ойцв ег а1.
1992). 1п 1Ь)в гесЬп)г)це, Пепош!с РХА 13 раг6аПу ЙПевтег! тч)1Ь МЬо! (бАТС) апд сояпгП агшв аге ргерагег1 Ьу с1еана8е тн!ТЬ 5аП Еб ТСбАС). ТЬе соЬеяне гепшш Пепегасед Ьу МЬо! апг) 5аП аге пот поппаПу сошраПЫе, Ъиг раг6а1 66!п8 оЕ 1Ье гесеввег! 5' Гегш!п) ш сопггоПег) геас6опв ив!п8 йе К!епотн ЕгаПшепт оЕ Е соП РЫА ро1угпегаве 1 Пепегагев сошр1ешепсагу гептип1 апг! ягпи1)апеоив1у г!ее)гоуз ТЬе аЬПиу оЕ 1Ье ог)8!па! сегшш1 го ве!Е-аппеа1 ЕР1еаве вее БПиге 4-9).
Раг6а! 66ш8 оЕ 1Ье гесеяег1 гегш)п) ТЬегеЕоге вирргеяа ев ве1Е-ППа6оп апг) ргенепгв ЕогшаПоп оЕ сЬипепс пю!еси!ев оЕ Пепош)с РЫА. Сагдвг СГ)А (Атос! епсв) з'аАТС з чесгсг 0))А !5а) 1 епа в) зТСаАС „ аз з р 'а сааст ! раП)а))у Я гесеввес 3' епс чч))П ОТТР апс ОСТР зТСаАС аТСз з Ста САаот*' Стао з рагцаау Я гесеввес 3' епс езпп ОАТР ОатР з' аАТС з Аа ааз стаи ' Ицаге ГагдеГ апг) чесГсг 0)чА -- — БЛ атсаатс саастаа аатССАС г- -т — с стао ста ~' '-~З-'-"-~ рас)заде |п ч)ггс )п)с ЬасГепорпаце Х раП)с)ев, ецес) Е. соа апс ве)ес! гог Апзрг сс)оп)ев Е!СОКЕ 4-9 С1оп1п8 )пто сов Честогв нчптЬ Рагба! ЕП!)п8 1п оЕ Епг)в ТЬе вггаге8у П!цв)гатег) )п ТЫв гда8гагп аПончв йе сопнегвюп о1 попсогпраПЫе геггп)п) оЕ таг8ет апг) несгог го согпраПЫе сеггп)п!.
Гга8гпептв о) таг8ег ОНА Пепегасег) Ьу гППевт!оп нн)1Ь МЬо) аге рагт1аПу 18)ег) нн!ТЬ г)АТР геви11!п8 1п Ега8гпептв саггу!п8 а 5 ' онегЬап8 оЕ "бА." 5!гпцаг)у, нес!от РЫА ТППевгег) зн!ГЬ 5аП ь ЕП!ег) ън)ГЬ гПТР апг) г)СТР го Пепегаге гепп!п1, поън сопзр!епзепгагу Го ТЬе епй о1 ТЬе Гаг8ет Егау пептв, саггу!п8 йе 5' онегЬап8 о! "ТС." ТЬе ППагег) ргог)цст !в рас)га8ег) )пто Ьасгег!орЬа8е х рагдс)ев апг) цвет) го )п)есГ ап арргорпа)е в)гази о1 Е, со/г. 4.16 СЬаргет 4: Иго 1ащ си(Ь НегЬ-сарае!Ту Ъесготл ° ТЬе рагНа!1у й8еа(ег( 8епоппс РХА сап Ье ггасгюпагес1 ассогйп8 го яге Ъу ацагоке 8е! е!есггорЬоге915 ог сеп(НЙ8агюп (ЬгоццЬ ылсгозе ог ХаС! 8гайепь Ьеуоге 118агюп го (Ье сояп(с! аппя Носчечег, Ьесапее ог'йе шечЬаЫе 1омеа аааос!а!ее! Тч((Ь (Ьеее гесЬпн)поз, 5!7!08 ог" рагПа! й8еЯюп ргос)пс(а сап Ъе паег) оп1у счЬеп Ь18Ь-шо1еси!аг-сче18ЬГ 8епоппс Р!х)А !9 ача!1- аЫе ш аЬппс1апсе.
Ечеп йеп, гпоаг 1аЬогагоПеа Ьаче ЙЕ(ссп)гу сп гесочеПп8 кц(гсс!епс Р)х)А оу йе ргорег ыге гог с!оп)п8. рог йН геакоп, а!7108 ь поччаг)аук ТЬе 1еаег сачогег( оу (Ье ТЬгее ача1!аЫе оргюпь го гег(псе йе пшпЬег ог сЬнпелс с!опт сп сояп(г) 1сЪгаПея ТАВЕЕ 4-3 Ггес(оепсу о! Кее(г!сг!оп Епс)опос!еапе 5Иеа !и (Ье Нипзап Сепопсе ЕбтсмАтеп 0(омВек Ог 8(те5 АчекАсе ГВАсмесчт 5(ге (кВ) Вег)оемое Есчгчме !.5 х )Ое 3.75 х )04 3.75 х !Ос б х )О' 666СС 6666С6СС ССТА66 66АТСС 6ССМ,66С А6АТСТ 6С6ССС ТТТААА С66СС6 6ААТТС ААССТТ 6СС66С 66С6СС 6СТА6С 6С66СССС ТТААТТАА 6ТТТАААС С665ЧСС6 6АССТС СССС66 6ТС6АС ССТССА66 66СС)4,66СС СКСС66УС ССС666 АСТАСТ 6САТ6С 6ССС666С ААТАТТ АТТТАААТ ТСТАСА СТС6А6 2 ЕО 8 5 Ара! Асс! Ас тП ВатН! )х)Ое !х)0' 3х )О' !.5 х )Ое 3х )О~ 6 х )Ое 7.5 х )Ое 7.5 х )Ог В58 В5!П ВМНП ()та! 3 3 )О 2 Еах! ЕСОК! ЕВисПП №е! )О 5 4 4 7.5 х )Ог 3х )Ос 3х)Ос 5х )04 4 )О (00 60 )Чат! )Ч)се! Нос! Рае! 4,3 х !04 5х )04 )х)0' 5х )Ог Рте! Йет! 5ае! 5асП 70 60 3 6 !.5 х )Ое 2х )Ое !х)0' 4.3 х )Ос 5а!! 5(ф )) 55 А! 5та! 5ре! 5р)с! 5ту) 55р ! 59 а! Х()а! АТсо! 20 !5 30 70 7.5 х )О' 3х !Ое 5 х !О' б х (Ос !.5 х )О" )х)Ое 6 х !О' 4.3 х )0' 4 )О 6 50 2 30 5 7 Абер!ос) се(СЕ репшеесоп, 1996(99 Хесе ЕпВ)апд Вю!ая Сага!об (©)4ЕВ).
А 8геас чаНесу оу сояп(г! чесгогк аге ачас!аЫе, шапу ог йеш саггуш8 арес)а117ег( 6шсПопя Апюп8 (Ьеье аге бе!ессаЫе 8епеб Гог с1гп8 геяагапсе, счЬ(сЬ спау Ье паег( го еегаЫЕВЬ гпапппгйап се11 )!пек (Ьаг Ьаче шсогрогагес1 сояп(с) бес)пепси аггег сгапеуесгюп. С)(Ьег геагпгее !пс1041е ЬасгеНорЬа8е ргопюсегк Гог (Ье ргос!псгюп оу П)х)А ргоЬев сошр1ешепгагу го (Ье гегппш ог" (Ье с1опес) 8епоппс РХА Вес)пепсеб, гесо8пЬюп 5!геа гог геа(Нсгюп епгушеь (Ьа! с1еаче шапппа!гап РХА чегу гаге1у (е.8., №(1, 5а11, 5асП, Рас1; р1еаее атее ТаЫе 4-3) апс! Тпау а)(осч ТЬе с)опег! Ве8- шеп( го Ье 190!а!ее( Егош (Ье сояп(с) !п опе рсесе, еег!пепсек (Ьаг гасП(гаге Ьопю)08005 гесогпЬспагюп Ьеьчееп сояпкЬ, пш!Пр1е с1ошп8 ягеа, апс) гер)гсопб оЕ Вечега! Йггегепс сурет Рог ехашр!ез ог" (Ьеее чес(огь, р!еаае бее ГЬе Аррепйх 3 апс( НоЬп ес а1. (!988).
Ргососо! 1г Сольггисггол о1 белет!с О!чА Ытаг!еь т Сост!г( Сгессогь 4.17 ТЬе (оПоьч!па ргососо1, гсеьсг)Ъ|пц йе сопьсгиссюп о( а аепош!с ОНА ПЬгагу, Ьаь Ъееп ччг!ссеп нчссЬ 5прегСоь-1 ш пппгс. Ночгечег, 1Ье ргосегсиге сап еая1у Ье аг)арсегс Еог пье гчссЬ осЬег соьшЫ чессогь йас солса!и пно соь ясеь (е.8., р!еаье ьее Ечапь е1 а1. ! 989) апг1 Еог пье гн!1Ь Ййегепс согпЬ!папопь о( геьспссюп епгушеь. Ргоседигеь (ог ьсгеепша ПЪгайеь аге ргеьепсе8 !и РгоСоса! 2, апг) Еог агпрП(у!пц ПЬгапеь ш Ргогосо1ь 3 апгс 4. МАТЕВ1АЕй САСсТсОЫ: Р!еаье ьее Аррепгпх 12 Сог арргорпа1е сог арргорпа1е Ьапг)ппд о( та1епа1ь таг)гегС гн!1Ь <!>. Впссегь апс! йо1м6оп5 Р1еаье ьее Аррепепх С !ог сопсропеп1ь о! ьсос(г ьосипопь, Ьийегь, апгс геадепсь. ОПи1е ьсос(г ьоЬПюпь 1о 1Ье арргорпасе сопсепггапопь.
СМагагогт <1> 70х ОерИаьрЬагу!а!гав Ьийег (С!Р Ьийег) ЕСЬало! РЬело(:сЫага(агт (сгс, нАВ <!> 5М 5айит асеСаге (3 М, рН 5.2) ТЕ (рН 8.0) Епуупсе5 апс! Впйегь Васгег(арИаае Т4 ОНА Вдаье Сай !л1еьйла! рЬоьрИа1аье (С!Р! йеьглсйол еле(алис!еаьеьи ВатН(, СчСЬос, ХЬа! Кеялсйол еле!алис!еаьеь сЬас с!еане саьт!с( нессог Ьис лос сЬе Велотгс !льей О(4А Ое15 АВагоье ВеЬ (О 7/о! саьс т 0 5х ТВЕ, сол1атт8 0 5 сгВ(т! а( есИ!йит Ьгатгг(е < ! > Р1еаае ьее 5гер 24.
АВагоье ее! (0.8/) саьс и 0.5х ТВЕ, солсатта 0.5 РВ/т! а( есЬгйит Ьгатгс(е р!еаье аее 5серь 2 апгС 8, апгС сЬе раве1 (о!!охсп5 5сер 6. Ри!ьег(-(ге!г(8е!ь (аг 0.55ге а8агаье Ве!ь! Р!еаье ьее 5серь 10, ! с, апгС 26, апгС сЬе рапе! оп РСС15ЕЕС-Е!ЕЕО СЕЕ ЕЕЕСТКОРНОКЕ5!5 оп сЬе (о1- !оейп5 раца. Мес1!а ТВ айаг р!а1еь салгаглгл8 25 рот! )галатус!л ТВ гпесИит ТВ тейит солгатгл8 25 РВ(т! (галатуст Мпс!есс АсЫ5 апс! О1фоппс!еоТЫе5 Сал1га! ОЫАг Ьасгеггарйайе Х ОХА ЙВеьгег( гнгСИ Н!лсйй Сал1го! ОЫА; ьирегИейса! 5ирегСаь-! О(4А Н!ВИ-та!еси!аг-гне!ВЬ1 Велит(с ОНА сглеагггес( р!аьтгг( т сх с(ерЬаьрЬогу!а!гол Ьийег Р!еаье ьее сЬе раве! а(гег 5сер 6.
Маг(гег ОС!А: йлеаг ЬасгеггорЬаВе 2. ОЬСА 4.1В Сйаргег 4: Ног)с!лХ илй Н(ХЬ-сарас(гу ( есгогг прес!а! Ес!о!ргпепй Ига(ег Ьайа ргеье1 го 7 6 "С алс1 65'С Ас!Йт!опа! Кеа~епйй 5(ер 70 оу (Ь(а ргогосо) гег)и(геа (Ье геацелсз 7(а(ед гл СЬаргег 2, Ргогосоl 17. 51ер 23 оу 1Ь)а ргососо) гес)и(геь Яе геаВелсь )гасед т СЬар(ег 7, Рго(осо) 7. Чесйогй апс! Вастег!а! Яга!пй Вас(еггорЬаде Х рас)сафлд т(хсигек Рас)сасдпй ппхгнгее гпау Ье рнгсйаъед )п а )с(г Толп (гоги апу о(ъечега! сотрап!еъ (е.й., С(йарас)с!11 Х!. Рас$сай(пй Ехсгасг, ягасайепе). Р!еаъе гее поге го 5гер 19 апд гЬе !пГогта6оп рапе1 оп 1(ъ) Ч1Т)1О РАС(САС1)ъ(С !и СЬаргег 2.
Вассег)орЬаВе Х а!ос)с Р!еаее ъее ране! То1!очдпй 5сер 6. Е. со)! р)аплВ Ьасгег)а оу 1Ье арргорпаге агга(л Тог Иег(лВ рас)саВед созтсд (е.В., Х11-В)ие, ЕРВ767, (ЧМ554, РН5иМСЮ Еог а сотр1еге !адпй о( арргорласе ъггашя р!еаъе еее Аррепсйх 3. 5ирегСоь-7 РНА (57гагаВеле) Айег сййеайоп ъч!й а 1 геяпсйоп епгугпе (е.8., )Чо(0, (Ье РЬ(А (гайгпепгь аге ьерагагед Ьу ри1ъед-йе(д е1ес(горЬогееа йгонВЬ а 1% айагоае Ве). Тгапьчегъе а)!егпайп8 йе)д е)ессгорЬогеьь (ТАРЕ, р1еаъе атее СЬар1ег 5, Рго1осо) 17) геяъ)чеа РНА (гайтепга Ье(ъчееп 50 йЬ апд 500 )сЬ )п а ргойгапь (п ъчЬ)сЬ аъч(ссЬ йгпеь аге гагпред (гогп 7 со 50 аесопда)ри1ае а! 9 Ч)/ст (ог 20-24 Ьоига а! 15'С (5Ыхиуа е1 а). 1992).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
