Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.1 (522940), страница 95
Текст из файла (страница 95)
Рог ехатр1е, !и хечега! уАС чессоь, !пхегс!оп оЕ 13)х!А шсо |Ье с!оп!иц ясе шсеггирь а хирргеххог !ВША Пепе апд гехи!сх |п сЬе Еогспасюп оЕ гед гайег йап счЬссе со!оп!ех Ьу уеая хсга!пх сЬа! саггу ап осЬге пшСадои ш |Ье аде2 Пепе. Весасье сАСЕ Ьаче по рас)саВспц сопхггаспгх йаС 1ип6 йе|г с!оп!пВ сарас|су, |Ье ачегаВе яхе оЕ йе !пхегсх и |1есегиипед сЬ|ебу Ьу йе с)иаПсу оЕ йе ргерагадоп оЕ Вепоппс !3)х)А.
Мох! '|АС 1!Ъгаг!ех сопгаш ЬеС|чееп 250 1|Ь апд 400 1|Ь оЕ Еоге|Вп Ел)х)А рег с!опе. Но!течет, ПЬгапех оЕ таиипа1!ап Пепит!с ЕЗУСА Ьаче Ъееп сопяплссе|1 сои!а!п!пВ с1опех счЬохе яхе ехсее|Ь 1 МЬ. ° Вассепа! аггфс!а! с)сготохотех (ВАСЕ) аге с|гси1аг ЕЗДА то1еси1ех сЬа! саггу ап ап6Ьюдс геяхсапсе и|аг1сег, а хспиВепс1у сои!го!!ед гер1коп депчед Егогп |Ье Р Еассог (Еег616у Еассог) оЕ ЕссЬепсЫа соВ (ЯЬ!Еиуа е! а!.
1992), ап АТР-дпчеп Ье1!сазе (герВ) со Еас!16асе Е))4А гер11- садоп, апд йгее 1ос| (рагА, рагВ, апд рагС) со епялге ассигасе раг66оп!пВ оЕ 1осч-сорупшпЬег р1аяпнЬ со даицЬсег се11я Бевтепсх оЕ Еоге!Вп цепот!с 13)4А аге 1!Васед со йе -7- сЬе е1ис|дасюп оЕ |Ье соп|р1есе хес)иепсе оЕ йе Ьшпап Пепите |и йе уеаг 2000, ТЬас сче Ьаче 1еагпед хо ишсЬ аЪоис сЬе Ьшпап Пепите диг!пВ йе 1ахс десаде и ш раг! дие со йе дече1ортепс оЕ а хег!ех оЕ чессогв сч!сЬ |Ье сарасиу со ргораВасе 1агВе хеВтепсх оЕ Пепит!с ЕЗДА.
ТЬехе чессогх Ьаче Ьееп пьспипепса1 |и |Ье гарЫ аххетЫу оЕ очег1арр!иВ аггаух оЕ шсПч|диа1 с1опех (сои!!ее) !и счЫсЬ еасЬ гесотЪ|паис сои!а!их а р|есе оЕ Пепит!с Е)ХА йас рагда!1у очег1арх 13)х)А сагпед Ьу |Ь песПЬЬог. ЯисЬ рЬуяса1 таре Вгапг ассехх Со Вепех йаС !и йе!г епдгесу тау ергасч1 очек хечега! Ьипдгед )с!1ОЬахех! йеу 6ле1 )3ХА вес)иепссиВ ии11я апд |Ьеу ргоч|де рошь сЬгоиВЬ |чЬ~сЬ рЬуяса! ап|1 цепедс тара тау Ье пчесед соВесЬег. ТЬеге аге 6че спа)ог сурех оЕ Ь!ВЬ-сарае!су чессогя Весасье рЬуяса! спарх оЕ еи1|агуодс сЬготохогпех аге Ьш!с Ьу 1!и)с|пП совесЬег очег1арр!пв с1опея и тсвЬ! Ееет йа! йе чессог |ч(й йе!агВея сарасбу счои!д Ье ргеЕеггед Еог сопхсгисдоп оЕ Егатесчог(с !паря Носчечег, и !псих оис йас еасЬ чессог Ьах !сх ости хес оЕ адчапсацех апд дьас)чапсаПех (р!еахе хее Ье1оъч апд ТаЫе 4-1), ап|1, ш сопхес)иепсе, рЬуяса1 таре оЕ сЬготохопса! геЕдопх аге сур!са11у сопягиссед Егогп а эпоха!с оЕ 13)х)А ЕгаПтепсх с1опед (и с66егепс чессопс Епгшдисдои 4.3 тн.
Тв явдг сей4 Вир4 ийяз тн. Евон бгдевг чгггп Есов( ! 1геаг вг(гп рповрпа1аве 1 1!да1е агап гев1псеопйддев1еб апб иге-веГеогеб депопгго 0МА ЕсоРГ ийЯЗ ТЕС ТЕЕ Тйр АРБ7 СЕИ4 Есов( ЕО-гООО-ВЬ ОНА ггадгпепгв Е!Сс)КЕ 4-1 С!оп!п гп УАС нес(огв ТЬе еепогпе о( ГЬе УАС чес1ог )пс!иг!ев гъчо ве)есгаЫе гпаг)гегв (Т)гР апд Е)йЯ), ап аи(опопъоив!у гер()- садпц вег)иепсе (Я)г57), а сеп1гогпеге (СЕ)ъ)4), а вирргеввог 1Р! )А депе (5УР4), апг! 1е)огпепс вег!иепсев (ТЕЕ) а1 (Ье Гегпг(пи 11Ь ВАС чесгог гп ч!(го, апг1 (Ье 1!Вадоп гшхгиге !в шггодисед Ьу е1ессгорогагюп !шо ъчеН- сЬагасгег)гед гесогпЬ!пагюп-11ебсгепг вгга!пв оу Е, со(г', ъчЬеге (Ьеу Ьесогпе евгаЫгвЬес1 ав япВ1е-сору р1авпидя ТЬе 6гвг депегаг!оп оЕ ВАС чесгогв (5Ьггиуа ег а1.
1992) сагг)ед по пгаг1сегв 1Ьаг сои1д Ье ивег1 го д!вг)пВи!вЬ Ъегъчееп апВЬюгк-геявгапг Ъасгепа1 со1ошев саггушВ гесошЬ!пап(в апд 1Ьове саггу!пд ешргу чесгогя Ыеъчег ВАС чесгогв а!!оъч всгееп!РВ Ьу а-сошр!ешепгаг!оп го !депг!Еу гесошЬ!пап(в ъчЬЬ !пвег(в апд аге ег!шрред ъчпЬ в!(ев го Еас116асе гесочегу апг1 шашри1агюп оЕ с!опед Ег)ъ(Ав (вее ргВиге 4-2) (Кпп ег а1. 1996; Ава1саъча ег а1. 1997). ВАСЬ !Йе гАСв апд РАСв (Р1 аг66сга1 сЬгопъовошев), Ьаче по рас)саВ!РВ сопгга!пгв апг1 )Веге ге по Вхес1 1пшг го 7 Ье яге оЕ депопъ!с Ег)ь)А (Ьаг 7 Ьеу сап ассерг.
ТЬе шед(ап яге оус1опев !п шов( Ваго Н! НС()КЕ 4-2 О!а гаги ог Ве!оВАС)! ТЬе сггсЫаг нес1ог соп1а)пв депев рагЯ, рагВ, апд рагС деггчег! (гогп ГЬе (егд))гу гас(ог (Е (асгог) о( Е. сод со епвиге 1Ьаг 1Ье (оъч-сору-пигпЬег р!авгпЫ В ассига(е(у рай(1)обед 1о даидЬ(ег се)!в диг(пд д)ч(в(оп о( )гъ Ьас1епа! Ьов1. )и адд)1)оп, 1Ье нес1ог сагпев депев (огг5 апд герС) (пчо!чед )п )п(Г(а((оп апд опеп1адоп о( Сгй(А гер1ка(юп; а сЫогагпрЬеп)со! геявгапсе депе (Ст"); ап е(егпепг (!ас2) (Ьа( аПоънв со(ог-Ьавед )деп- Г(()са()оп о( гесогпЬ)папН; (охР апд сов)ъ) в)(ев )Ьа( (ас)))Га(е гесочегу о( с!опед вег!иепсев; апд гевгпсбоп ягев (Ьа1 сап Ье ивег! 1о с)опе )агде (гадгпеп1в о( депогп(с ОНА. 1итгодисттои 4.5 рт и~азот !с герзсоп Зса ! Вест Н! ВатН~Зса! Зса~ рис!9 ро!у!!пКег Е)С())ТЕ 4-4 О!а гаги о( РСУРАС1 ТЬе честог соитаюз а зиЬзет о( (Ье 8еиедс е(егиеитз сорта)иед (и рАд10засВП (Р(8иге 4-3), а Маиагиус(и геязтаисе Пепе ()гаи'), а!охР я1е, а герПсои (Р1 р(аяиЫ герПсои) дег(нед тгоит ЬастеиорЬа8е Р1 (Ьат аПотчз (Ье честог то гер(кате аз а !онн-сору-ииитЬег р!азгиЫ (и Е.
со(); аи (адис(Ые герПсои (Р1 )убс герП- сои) тЬат саи Ье изет! то (исгеазе тЬе сору иитиЬег о( (Ье р(азгиЫ; аид а зе)естаЫе гиагКег (засВ) сои!а)и)и8 а наиету о! с)ои(и8 я1ез. япаП ге8)оп оГЬастегюрЬа8е ) Р)н)А — йе соЬеяче епд яте (соз) — тчЬ!сЬ сопташз а11 оГйе сЬ-асдп8 е!етпептз гет)и!гед (ог рас)са8!п8 оу нйа1 РЫА ш1о ЪастепорЬа8е )с рагдс!ез (р!еазе зее Е!8иге 4-5) (Тот гечтетч, р1еазе зее НоЬп ! 979; НоЬп ет а1.
1988) . Ыпеаг сопсатепатед РЬ)А зиЬзтга1ез, зштаЫе Тог рас)са8!08 ш ндго, аге Пепегатед Ъу!!8ат!п8 гезтпстюп Тга8шептз сопташш8 а соз зет)иепсе то еасЬ епд оТ а Пепопис РХА пю!еси!е. Рипп8 рас)са8108, тЬе пчо йапРдп8 соз зет)иепсез аге с1еачед Ьу тЬе ЪастепорЬа8е ). тег йпстюп то Пепегате а 1тпеаг тпо1- еот1е чт!1Ь тегпип! (Ьат аге сотпр!ешептагу то опе апотЬег Ъит пот Ыептка1 (реьз ет а1.
)983; р!еазе зее тЬе рапе1 оп Х ТЕПМПк(А5Е !п йе !птгодисдоп то СЬартег 2). АТтег !п) ест!оп што зизсердЫе Ьастепа1 се1!з, тЬе сошр!ептептагу тегпиш аппеа! то опе апотЬег апд аге зеа1ед Ъу тЬе Ьозт'з Р)нА 1т8азе, Пепегатш8 стгси!аг РХА гпо!еси!ез саггутп8 а со!к!п Е1 (со!Е1) р1аяпЫ гер!коп апд а зе!естаЫе шаг1сег. Вастепа! со1ошез зе!естед оп р1атез сопташш8 йе арргорп'- а1е апдЬютк саггу пш16р1е сортез оу гесотпЬтпапт сояиЫз. тз тт всов! нои — Ю в ю Š— — нои всоси Г!С())ТЕ 4-5 0(а8гаги о( 5ирегСоз-1 (5тгата8еие) ТЫз созтиЫ чес1ог сиота(из пчо соз ятез зерагатед Ьу а ии(г)ие Х(та! гезтисдои з(те, аи 5Н40 ог(8(и от' гер)кабои (5Н40 оп), ттчо аидЬю1к геязтаисе Перез (иео аид атр ), а со)Е1 ог(8(и о( герПсатюи (оп), аид а с(ои(и8 я1е (!аи)сед Ьу ЬастегюрЬа8е ргоиютегз.
4.6 Оларгег 4: ЪЪЪ|+т8 иаг)л Н(8)л-сарае(гу Уесгагк СО)ъбТКБСТ!МС ИВКАК!ЕЬ ОГ ОЕМОМ!С 01ЧА Сепот!с 1лЬгапек аге сопкггисгед Ьу с1отп8 кевтепгк оЕ Р)ъ)А вепегасед Ьу рагда1 д(8екг!оп оЕ ЫВЬ-то1еси1аг-ъче(8Ь( 8епопис Р)ъ(А ъчиЬ геяпсгюп епхутек (Мап!агь ег а1. 1978). 1п коте сакек, (Ьеке Ега8тепгк аге Егасгюпагед Ьу ргерагайче 8е1 е1есггорЬогеяк ог депягу 8гад!епг сепгпуи8айоп Го ке1есл ГЬоке оЕ а яхе яшаЫе Еог (пкеггюп (п(о йе чесгог. 1п (Ьеогу, ечегу Р)ъ(А кес)иепсе ш (Ье гагвег вепопле кЬои!д Ъе ргороггюпа11у гергекепгес1 ш а!лЪгагу оЕ гесоплЬлпапг с1опек.
1п ргасИсе, (Ь~к Ыеа! (к печег геа1(лед. !пкгеад, ш 1лЪгапек оЕ соплр1ех вепоплек, коте РХА кециепсек аге пиккшв епг!ге!у апд о(Ьегк гпау Ье очеггергекепгед го чагут8 девгеек. 5исЬ Ьгак !к йе !печбаЫе геки1( оЕ (Ье гпе(Ьодк (Ьаг аге гьед го сопкггисс Вепот!с !лЪгапек.
Сарк !п сочегаве агье ш рагг Ьесаике йеге ь по гги1у гапдогп те(Ьод со кЬеаг согпр1ех 8епогпек, !ггекресбче оЕ гЬе!г кециепсе апд Ъаке согпроягюп. 5!псе 8епот!с 1!Ьгапек аге гурлса!!у 8епегагед Ьу рагйа1 д!8екгюп оЕ ЫВЬ-то1еси1аг-ъче!8Ь( Р)ъ(А, йе соплроядоп оЕ йе геки)г(п8 рори1айоп оЕ яхе-ке1есгел1 Ега8тепгк дерепдк оп йе д!кгг!Ьигюп оЕ гекгпсгюп ягек чдйлп йе вепопис РЫА апд оп (Ье ге)аг|че галек аг ъчЫсЬ йеке ягек аге с1еачед. 1)пЕоггипаге1у, йе йкгйЬигюп оЕ гекгпсйоп ягек ь Еаг 6от поппа1 апс1 йе еЕ6слепсу оЕ д!8екг(оп аг д(ЕЕегепг ялек ь !пЕ)иепсед Ьу киггоипд!пв кесрлепсек (Еог геч(еъч, р!еаке кее Вгоо)ск 1987).
Ке8!опк псЬ лп гекгпсгюп ягек гепд го Ье ипдеггергекепгед Ьесаике (Ьеу аге цшсИу гедисед го ап ипассергаЫу япа11 яхе. Сопчегке1у, ипрочегьЬед гев!опк тау Ъе ехс1идед Ъесаике йеу 8епегаге ба8тепгк йаг аге гоо 1агве. Рог (Ьеогегка! ггеагтепс оЕ йеке ргоЫеплк, р1еаке кее 5еес! (1982), Веед ег а!.
(1982), апс1 Тапв апд Ъъгагегтап (1990). А)(ЬоивЬ гЬеге й по вепега1 ко1тюп, )и881!пв ъчпЬ йвекгюп сопд!гюпк сап коте(апек Ье икед го соггесг ипдеггергекепгадоп оЕ кресл6с кециепсек ш вепопис! !Ьгапек (е.в., р1еаке кее чълопв ел а!.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
