Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.1 (522940), страница 82
Текст из файла (страница 82)
1п тпоьт оГ тЬе яга)пь иьед (п с1оп!пц чч(тЬ М13 честить, (ас1ь (ь сагпед чдй 1асЛЛМ15 (ьее аЬоче) оп ап Г р1аяпЫ. ° ргоАВ: ТЬе гец!оп оГ йе Ьастепа! сЬгопюьоше тЬас епсодеь епхушеь тпчо!чед !п рто1тпе ЬюьуптЬеяь. ТЬе ртпАВ цепеь аге оГгеп сагпет1 оп ап г' р1аяпЫ, тчЬкЬ сап тЬеп сотпр1ептепт рго1тпе ргототгорЬу тп а Ьоьт чч(тЬ а (1ас-ргоАВ) с1е1етюп. ЪттЬеп якЬ се11ь аге цгоччп тп тегца !асцдпц рго1ше, йе гпатптепапсе оГ тЬе Р' р!аяпЫ ш йе Ьоьт сап Ъе циагаптеед.
° тга)336: А пштабоп йат ьирргеььеь соп)ица! тгапьЕег оЕ г Гастогь (АсЬтшап ет а1. 1971). ТЬ)ь гпаг(тег ччаь тес!шгед Ьу йе Ыатюпа1 1пьтдитеь оГ Неа!тЬ (Н1Н) циЫе1(пеь тЬат тчеге ехтапт тапу уеагь ацо. ТЬе цшде1!пеь аге по 1опцег (п Гогсе, Ьш йе шаг)сег 1шцегь оп (п ьечега1 оГ йе Ъастепа1 ягатпь да6пц Гготп йат ега. ° ЬьдК17 апд ЬьдВ4: Мита6опь тЬат 1еат1 то 1оьь оГ геьтпс6оп, Ьит пот пюд(Етса6оп, Ьу йе суре 1 геьтг(ст!опЕгподтТтсатюп ьуьтетп оГ Е. соВ ьтга(п К. ()пшод(Етед Г)1)А с!опет1 д(тест!у тпто М13 честогь апд ргорацатед )п Ъастепа1 ягатпь саггушц йть пшта6оп ил1! Ье шодтТтед апс1 йегеЕоге ргогестед ацатпьт геяпсбоп (Г йе честог (ь ьиЬьес)иепт!у тптгодисет1 )пто ап Ьд ята(п оЕ В. соВ К.
Гпггоднсбгш 3.1! ° тпсгА апд тпгг: Митабопа йат 1еад то 1оы оГ геьтпстюп оГ шейу1атед РГ4А апд тЬегеЕоге епЬапсе йе с!оп!п8 оЕ Вепопнс РХА 1п ЬастепорЬа8е М!3 честогя ° гесА1: ТЬе гесА Вепе оЕ Е. соБ содеа Еог а РЬ)А-дерепдепс АТРаье йас 1а еааепт!а1 Гог Вепес!с гесоптЬ!пабоп !п Е. сой (Еог геч!етч, р!еаье аее КадсВп8 !982). 5тга)па йат саггу йе гесА! нпна6оп аге деГес6че ш гесошЪ1патюп апд тЬегеГоге Ьаче тъчо ат1чапса8ея Р)тат, р1аятпда ргораВатед 1п тЬеае атга)па гетца!и аа гпопоптега апд до пот Гопп пти1тцпепс с)гс1ез (ВедЬгоо)т апд АиялЬе1 197б). 5есопд, ае8шепта оЕ Гоге)8п РЬ!А ргора8атед !п М13 чесгога шау ехрег)епсе Гетчег де!е6опа 1п кесА атга!па ('тап!асЬ-Реггоп ет а1. !985).
° аирЕа Ап ашЬег аирргеааог йаг !иветта 81иганппе ат Е)АО содопя Ат опе типе, йе М!Н ВиЫе11пеь гег)и!гед ЬастепорЬа8е М!3 честога то саггу ап атпЪег пштатюп. "!'Ь!а гес!шгегпепт Ьаа 1оп8 ыпсе Ьееп дгорред, апс1 шорт чесгога 1п сопнпоп иае тос1ау т)о пот саггу аисЬ тпшатюпя Но мечет, гпапу оЕ тЬе атга)па оЕ Е. соВ йат аге иьед аа Ьоыта тчеге дече1оред тчЬеп йе Ви)де- 1!пеы ъчеге зт!11 !п Еогсе. ТЬеье багга)пь апд шапу оЕ йегг дег)ча6чез саггу а аирргеааог тЬас а1!отча тЬе 8готчтЬ оГ честить саггу)п8 сегтагп атпЬег пшта6опя ТаЫе 3-2 санта!пь а янпгпагу оГ атга)па оЕ Е.
соВ сопцпоп1у иаед то ргора8ате М13 чесГогъ апд гесошЪ|паптя апд Р!Вите 3-4 д)ьр)ауа йе ро1ус!оп!п8 ятеа 1п гпапу честогя СНООЯ ЧС А)Ч0 МАПЧТАПЧПЧС А Я)!ТАВ!.Е БТКАПЧ ОГ Е. СОЯ Аь шеп6опед аЪоче, 1пЕес6оп оЕ Е. соВ Ъу ЬастепорЬаВе М13 апд 1та с!оке ге!а!!чеа гег!и!геа ап !птаст Р р11ия То епаиге йат Ьастепа иаед Гог ргора8ат)п8 ЬастепорЬа8е М!3 шанцатп тЬе Р' р!аяпЫ епсосПп8 ЕЬе р1!иа аттис!иге, опе оЕ ттчо роа!т)че ае1ест!оп атгасе8!еа шау Ъе иаед: ° 1п а11 багга!па оЕ Е.
со!г сопцпоп!у иаед Еог ргора8ат)оп оЕ гпа!е-прес!Егс ЬастепорЬаВея тЬе Г р1аяпЫ сагпеа Вепеа епсосВп8 ептушеь !пчо1чед 1п рго1!пе ЬюауптЬеяа (ргоАВ ). Весаиае тЬеае Вепеь Ьаче Ьееп де1етед Егош тЬе Ьоьт сЬгопюаоше, оп1у тЬоье Ъастепа йат саггу йе Г р1аяпЫ тч1!! Ье рго!гпе ргототгорЬа апд Ьепсе Ъе аые со Еопп со!оп)еа оп мопед)а 1асЫп8 рго- 1!пе (е.8., М9 ннпцпа1 шед)иш).
Вастепа1 атга!па Вготч пшсЬ тпоге ь1отч1у оп ннпцпа! шесВа тЬап оп псЬ гпесПа апд до пот ьигчгче рго1оп8ед рег!ода оЕ атога8е ат 4'С. Рог йга геааоп, П !а нпрогтапт то ргераге ГгеаЬ си!тигеа оГ Ьоьт Ьасгепа ечегу Ген дауа оп М9 пшшпа! а8аг р1атея ияп8 а шаатег атос)с а!отед ат -70'С аа 1поси1шп (р1еазе аее Ъе1оч ). ° 5онте Ьит пот а11 Г р1аяшда саггу а Вепе епсод)п8 геа)атапсе то ап ап6Ъгобс, цаца11у 1сапаптус!и ог тетгасус!!пе.
Оп!у се!1а йат шашта!и йе Г р!аяпЫ и611 Вготч ш шегВа сон!а)п!п8 йе арргорпате ап6Ьготк. !)яп8 тЬ)а ье!ест!оп е1птипатеа тЬе пеед то иае пшшна! шед!а, йегеЬу Вгеаг!у ареегПп8 тЬе тчог!с оГ тЬе 1аЪогатогу. 'тт"гтасечег тЬе ье1ест!оп иаед то пташта!и йе Г р1аяпЫ, гпаатег атос)га оЕ Г атга)па оГЕ. со!! иаед Еог ргора8а6оп апд р!абп8 оЕ М!3 аЬои1д Ъе а!отед ат — 70 С ш 1В гпегПшп сиота!и!п8 1598 81усего1. ТЬе сЬоке оГ Ьасгепа! ягаш ьЬои1д, Ьотчечег, пот Ъе д)ссасед Ьу йе туре оЕ ае1ес6оп иаед то тпашташ йе Р' р1аяпЫ. ОЕ пшсЬ Вгеагег цпрогтапсе аге тЬе сЬгопюаоша! шпаг)сета сагпег1 Ьу йе атга)п, ъчЬ!сЬ сап Вгеат!у 1пйиепсе тЬе яаЬ!1!ту апд у!е1д оЕ М1 3 гесоптЬ1папта апд йе рипту оЕ йе яп8!е-атгапдед РЬ)А тешр1атеь ргерагес1 Ггопт гпЕестес1 се!1я ТЬе Ео!1очлп8 аге ттчо суреа оГ яга!и-г1ерепдепт ргоЫепь сопнпоп1у епсоиптегед тчЬеп с!опгп8 |п В1ашептоыз ЪастепорЬа8е честогя ° Ре!е6оп оу" рагг оЕ г)ге Гоге!дп РАНГА хедтепг.
РЬ)А с!опед што йе штег8епк ге81оп оЕ В!ашептоиь ЬассепорЬа8еь тепдо то Ъе ипагаые. ТЬе 1аг8ег йе с!опед аедпепт, тЬе Вгеасег йе гасе ат тчЬ)сЬ де1етюпа оссиг. ТЬ!а ргоЫеш сап Ъе пипптптед (а1тЬоиВЬ печет сошр!еге1у 3.12 С13ареег 33 Игог3б3щ 33б3Ф Ваегегбор13аре М13 Ъеееогз Е Е 8 О. Е Сб б с о б с о Ш О. .с о с о о б) с о Е б о о с с б 'б' СО о о .бб бБ б б о Е ) о о с бо Е с М 4 Е бб б с О о .Е Б Еб .о и О» 4' Е о =3 'у к С бб бб'3 Сб о ~)3 о О, б бо ~ .О бо Е,о =.3Д~ б а б, и б бе О3 бо а с бб О Ы .е 'б" б "Я бб б б Я «3 с го О О, бо б О йб о б, б О ОЗРЕ с б" о Е б) Е б ) бб бс Об о бб бб О б:3 б 'О д~ б ~х3 б) бб бб д~ Е 33 е О~, о о .е б, О а,„., 'О "' Л 3 Д )3 '~ б Об ".3 Д б3 о О 'О «3 б) ее Об б ЕО < о О. бе ) % Э ФО .с а. о Э о Ю ба Ф Ф бо О О о О.
о о Э ю бб с бб бЮ о Ф бб Ю о б Е .О Е бб б ) о о Е а. о < Е О О „а о Е Я б с бб б с ) о о о о 'О С о.а О С. Е с о Ед б, б .а б с бб а с о О б о о ) о а О ) .о о Е с бб Е с о Ед О б .а бб б б бб ) о о о о о .а Е О. 1 о,. Ед б ,а ) бб О о б о Е о о о .а .):о Е а) Е о б си Ед ) О о бб с б о б Е о о оО -'Ф о 'Е '"„" о )) Е О о а. Е Е о б ОК Е д -о а б" бб С Г.Е о б о о В о :а. о ) Е И. з Е о < лк 'д Е, 9 а Е б) б с и ) о о В ) о .а .- .о ф о Е~ „ бб Р бе йй О. о .а а .с йй .с а О.
О. а о .О й о а о »Е »Е 'с о ь О. о а О а Б О с а о .с Е О Ой с Й .с с й '> а а Е о '» 1 Е о < Ед « .а "с «й 3 » О Я О о о ь ас о а а » 'а Е а'З йй 'Е о и 'с н О с о Е КЕ "а д Е.с о с а с о Е .а о йй О Е о а О а а о ОО Е »Е с о а.Е ь О Е а \ а о 'а с а < 3 Е а.
Ой о О й а. а 3 .с Е йй с а о Я Б Ой о .с О В ОС х2 ю Й О -«~а ОО о Е «1 йа щ Е Е «1 йс ' Е «1 йа ~~ Ю Е вЂ” Ю Ю о С щ О О, а„ ОО о О 3 а М М йо., о О .О Е~ о .. -а "а М Е О Ой а д о а > а о О.а О а. 'а Е о 7 а" с аЪ- с Е а.- д о ".Е ь а ойс а Е Х Д 1 ь а ' аЕ о о а .С Ой Зс о В « .с о а о о Л 3 ~ ф ~л а ОО о о а а к сД Е о с 1ы ~а -а О :Е а 'Е .Й йй й 1 Е а ' о О Ой .с . с » о н о— Ой а :Е са Д а <ЕЕао .-к Ед Е < НО Ой а а Е а Ой О с Е а .
о О йй .с . с о о Ой «о о с а о Я 1 О„ Е йс ж ОЮ Ой О с .О а 'О Е .а Е Е .О Б й а, ь .а ь .с % йй .с о О О. о а О. Ю .'Е йй д с а а с О .а »ь ~ а Е .Е о й. а о ." с с о с о .с с а аЮ Ю О а Е а 'а '- а. О О а ю "й~ .о а Ю сс О йа -' с О Р а й Х Ю О О .- Ю 5 ь а Е « (~ .О 'Ф Я Ю О о ь Е а -а о Ю .с о о О .а Е- а с а "Е Е й»й О Ь о с а с о Оо Е .а о й Ю Бф йй ,Л Е О.
В о 3 о .а ' О м1:а а. о Е О с 'а .Е а Е с а .а о .а ь Ю а о й" .с ь .с з » » а йй О .с й М о о с с .О с о О .О с ~а с о О с а ». о — Е о с 1 'й « .с Е с й О .с Е а. о о с ь с Ю:Ю О ю с с О а Ю О Я '' < -7 Д с » йй Х ь О Е .а а а о а а о о о а « .а Е Е с Е с о о о 'О о Е Е с О Ю о с о .» "а О «» а с О Ю Ы О о о О О а .с Ю .а .а О а а' 'О й а .с з о Е с йй с -с .с о а й» о о о *Ф Е О 'О Е.,Е »О О с».
о о .о о О с "о .с с « Е .с а — с ь ) ) а а а а с а ай .~ о й .а '» о о о, с Г о Е 3. л 4 СЬ аргер 3: И/ог!аль нн/Ь ВасгеггврЬаее М13 Ъеегогз М13гпр7/рг/С7 7237/2674 Тиг Меу Ие Тиг Авп 5ег Ра Авр Ра Зе ти Сув тд Бе тп Авр Ро ВГу Авп Бег Ьеч АГа Атв лес Ага Атт Асв ллт тсс сса алт сса тса Асс твс Ааа тсв лса влт сов ааа мт тол ств всс ! ! 1 ! ! 1 ! 1 1 3 е яг ВатНГ ~ Р Л 1 — — — 3 ВалНГ ЕсоЯГ ЗаГГ Зав АссГ Асс Г Нюсй алел М13птр8/р0С8 7237/2674 ть мег и ть Ав 5т А д пу 5 чаг лвр ье ал Р о 5е ье Ага ьеч Ага Атв лсс лта лтт Асв мт тес сва ввл тсс втс алс ств слв сел лвс ттв вол ств асс ! ~1 1! ! Е и 1 15атНГ 5ви РЛ Нг От 5лю Г Асс Г ХтаГ Н лов М13пур9/р!3С9 7598/2665 Меу Ие тиг Рт Зег Ьео ЛГа ЛГа ВГу Л д Л д Ие Р о ВГу Л и Бе Ьео Ага лес лтв Атт Аса сел Авс па аст асл ыт свл сва Атс ссс вы мт тол ств асс 1 3 1 3 1 3 1 4 и от Р Л ! ! ВатНГ ~есоЯГ 5аЛ 5твг АссГ хтвг Нглоь М13пур10/р!3С12 7243/2680 Тиг Меу Ие ТЬ Авп Зег Зег 5ег Рго Пу Авр Рго Г.ег ВМ Ве ТЬ Сув Бе Рго Зег Г.еч АГа Г.еч ЛГа ЧаГ Атв Асс Атв лтт Асв мт тса лас тса ссс аы алт сот стл алв тса Асс гас лас сел Авс тта вол сто всс втс ~ 1 3 ! 3 1 ! 1 ! ЕсоЯГ ! ~ Опт ~ ХЬвГ С 1 Рвп нюот ЗасГ ХтаГ ВвтНГ зал АссГ нпа М13пур11/рг/СТ 3 7243/2680 ТЬ Меу Ие тЬг Рга Бе Ье БГУ СУв Ад Ве тп Ье ВМ АИР Рга АМ На Зег Зег Л и 5ег Ье АГа Ага лес лтв Атт Асв сел Аас ттв ввс твс лов уса Аст стл вла влт ссс свв оса пас тсв мт толста всс 1 ! 3 1 3 Млтп Рвл ~ ХЬаГ ~ ЗтаГ ЗасГ 5вЛ ВатНГ ХлтГ Есот лссГ Нл и М13пур18/р0С18 7249/2686 ть мвг ие тьг лви 5 5 Бег чаг Рп а|у Авр Рга ьеч ам Бег тм сув Агд не Ага Вег ьеч Ага ьвч Ага лтв Асс лта Ап лов мт тсв Авс тса втл ссс вва алт сст стл вла тса Асс гас Ааа слт асл Аас па асл ста всс ! ! 1 1 1 1 ! 1 1 еояг 1 1крпг! 3втнг ! 3 Згм ! ! зрьг ЗвсГ БтвГ ХОГ ЛсГ РЛ нюоа хтаг Нюсь М13пур19/рг/С19 7249/2686 ть маг ие тьг Рт 5ег ьеч нп Аг ° сув л д Ве ть ьеч ам Авр Рг Ап чаг Р а В г зе Ам Б г о Ага лтв лес Атв Атт Аса сел лес ттв слт асс твс Аы тсв Аст стл ала алт ссс сы атл сов лас тсв мт тол ств всс ! 1 1 1 ! 1 ! нюот ! ! Рл ! 3 ховг ~ 3 1 3 за г ЗРЛГ ЗаЛ З тНГ ЗтвГ КрпГ е яг А хтаг и .и Е!СЕ!!ЕЕ 3-4 Мм11!р1е С!оп!пе 5!1еБ 1п Вас1ег!орЬа е М13 апи! РЬа епт!г! чес1огд 5Ьоччгп аге ТЬе ропггопБ о1 ге51пс6оп Б!Тез уп 1Ье пуа!1!р!е с!оп!пе В!Тез о1 сопнпоп1у озоди Ьасгег!орЬаее М13 несгогз апе! ТЬе!г соггезропт!!пе р13С р1азпу!с!В.
ТЬе пигпЬегд ЬепеагЬ ТЬе паптеВ о1 1Ье чес!огБ аге 1Ье!г арргохнпаге В!Еез (!и пос1еоТЫез). ТЬе ро1ус1оп!пе гее!опз о1 ТЬе соггезропс!!пе рЬаеепу!т!Б аге чнгоаПу !т!епг!са!. 1п)гор)ис))оп 3.15 рСВ 2.1 3900 Т»г Ме» Ие Рга Яег Иеи Ч Г Р а Яе Яег А»р Р а Иви Ч Г Т»г АГа ЛГа Яег Ч Г лт6 лсс лт6 лтт ссл лбс ТТЗ Втл сс6 АВС тс6 Злт ссл стл Стл лс6 Зсс Зсс лбт Втб Иеи ЗГИ Р»е ВГу Чаи ВГу ст6 Зм ттс ыс ттл Всс ЕсойГ И МИ КрпГ Вас! Ватй! ВрвГ ЛГа 5ег А д ВГУ Рта А»п Ям Рта Туг 5ег Вск тот АВА ый ссс мт тсс ссс тлт лбт ) ) хьаг Ми Р»е Сув Агд Туг Рго Вм ттс тбс АВА тлт ссл ) Есой~ ЕсойЧ 5* Нь Тгр Агд Рго И М Н» тол слс т66 с66 сс6 стс Вля слт ) ) АуаГ Х»ог рВ)мезспр1 9 ВК (л)-) 2981 мег ть м и и т» ро я г Аг м и и тпг иеч тп иув му л иу 5е тр я г яв т» и чаг 6 Злл лск Зст лтс Асс лт6 лтт Асб сок Аж Всб см ттл ксс стс лст лм сы мс мл АЗс т66 АЗс тсс Асс Ссб Зтб ЯасГ ЗГУ Р о ЧаГ Р а А п Ве Рго Туг Яе ВЬ 5е Туг Ту АГа Агд Яег Г.е АГа У»Г ЧвГ Г.в ЗГп 66с ссс Зтл ссс мт тс6 ссс тлт лбт ВАЯ тс6 тлт тлс Всб сбс тол ст6 Всс Зтс Зтт ттл см 1 ) крлг рВ)мезспр1 9 Кб (+7-) 2981 мег ть мм ие т»г рго яег ма Вгп иеи ть иеи т» иу» му м иу» Яе т р чаг Рго Згу Рго 6 ВМ АСЛ Вот лт6 АСС Лтб Лтт ЛСЗ ССА ЛЗС ЗСС СМ ттк ЛСС СтС ЛСт ЛМ 666 мс лм АВС т66 Втк ССЯ 66С ССС ко г ч г Яе ие яег г.ео гге яег л»п Вег 5у» Яе Рта Згу А»р Р о г.е чаг г.еи 6ь А д Р Р о Р о л д Зтл тс6 ктл Аяс тт6 лтл тс6 мт тсс тбс лбс сс6 666 Влт ссл стл Втт стл Злб с66 сс6 ссл сс6 с66 ) .
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
