Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.1 (522940), страница 81
Текст из файла (страница 81)
КаГЬег, йе 1епбгЬ оЕ гЬе 61агпепсоы рагбс1е чапек ассогд(пб Го йе агпоппГ оЕ Е)ЫА 6 сопка!пк. Рагбс1ек!побег йап афпг! 1епбГЬ апс1 сопга!п|пц пш!пр!е сор|ек оЕ гЬе ч(га! цепоше аге Еоипд ш к!ос)гк оЕ а1! 6!ашепгопк ч!гыкек (5а| очаг ес а1. 1967; 5соп апд Ъпдег 1967; Ргап ег а!. 1969), апд !пкеггк оЕ Еоге(бп Е)ЫА кечеп бгпек !побег йап йе ъч|)д-Гуре ч|га! Вепогпе Ьаче Ьееп с!опед апс1 ргорабагед Еп М!3 (Меккшб 1981).
ТЬе гер1|саггоп оЕ йе 61ашепсопк ЬасгепорЬабек осспгк |п Ьаппопу чч(ТЬ йас оЕ йе Ьокг Ъасгепшп, апд йе !пЕесгед се!1к аге йегеЕоге пог!укед Ьш сопбпце го бгочч (а1Ъе6 аг опе Ьа1Е го йгее с)иаггегк оЕ йе поппа1 гаге) кчЬ|1е ргодпс|пб кечега! Ьипдгед гдгпк рагбс1ек рег се11 рег бепегабоп (Магч!и апс1 НоЬп 1969). ТЬ|к ргог1псбоп!садк го йе ассшпп1абоп оЕ чакг пшпЪегк оЕ рагпс1ек |п гЬе шед)иш; йе г|гег оЕ ЪасгепорЬабе Егот а си!гоге оЕ |пЕесгед Ьасгепа Егес!иепг!у ехсеедк 1Оп рй/гп1. 3.8 Г йартег лй ЪЧогй|ид тчттй Вастег|орйаде М)3 Ъестогк ВАСТЕВ1ОРНАСЕ М13 АЬ А УЕСТОВ Весаике япд1е-ягапдед Р|ъ(А Ь а роог киЬксгасе Гог пюя гекспсдоп епдопис!еакек апс1 Р(ъ|А!тдакек, доиЫе-ктгапг|ег| кедтептк ау Гогетдп РЫА аге тпкег1ед тп ъдтго тито йе КР ау йе Ъас1егю рЬаде РЫА (р1еаке кее сЬе рапе! оп ЕЫС|ЫЕЕК3(ъ(С М13 А5 А ЧЕСТОК).
ТЬЬ доиЫе-ктгапдед с1окег1 стгси1аг РЫА сап еая1у Ье рипйед (тот |пуессед се11к, гпап|ри1асед сп сЬе кате мау ак р!аяпЫ РЫА, апд йеп гетпсгодисед тисо се1!к Ьу ксапдагд сгапкуоппадоп ргоседигек. ТЬе доиЫе-ксгапдед РЫА (Ьеп геепсеп сЬе гер1кадоп сус1е, ечепсиа!1у депегас|пд ргодепу ЬассепорЬаде рагск!ек сЬас сопсатп оп!у опе оу (Ье съчо ягапсЬ оГ сЬе Гоге(дп РЫА.
ТЬе ойег ксгапт1 оу (Ье Р(ъ(А, (Ье ( — ) к1гапд, Ь печег рас|садед. ЕЗЧС3$ъ|ЕЕК36(С М13 А5 А ЧЕСТОК |п 1963, ъчЬеп РетегНапк НоЬсЬпеЫег дексиЬед СЬе Ьо|атюп о( Мип(сЬ 13 йоги Вачаиаи кем аде, йе мгик кеегиед со Ьаче Геъч ргокресск. |пдеед, гекеагсЬ оп М13 гета|пед рагосЫа3 ипЫ сЬе еаг|у 1970к, мйтеп 3оасЬни Мекяпд, сЬеп а дгадиасе ксис|епс ас сЬе мах-Р|апсй )пкс(сисе |и мип(сЬ, кам йас сЬе Ыо|од(са! ргорегйек о( (Ье ЬассегюрЬаде сои|с$ Ье ехр|о|сес$ (ог с|оп|пд апс$ кег|иепс(пд о( (оге|дп 034Ак. Мекк(пд геакопед сЬас сЬе |еид|Ь о( сЬе ЬассегюрЬаде й|атиепск гейессес! сйе к(ге о( йе япд1е-ксгапс$ет3 ! 034А |пят|е СЬеги. М13 т(дЬС йеге(оге Ье аЫе Со ассоитгиог$ате адд(С)опа! кег|иеисек о( попчга3 0НА (п а итаппег сЬас ойег к|пд|е-ксгапт3ед РНА н)гикек, кисЬ ак йе ЫокаЬедга| ьХ174, соиЫ пос.
|и адд(с)оп, сЬе япд|е-ксгапс$ет| пасите о( (Ье М13 депоите тас3е й Ыеа| (ог ике ак а септр|асе (и сЬе гесепс3у декспЬед 5апдег 0(ъ|А кег|иепс(пд гиедюд (5апдег ес а|. 1973). Номенег, сигп|пд (Ьеке ргорег6ек |пса ап адчапсаде тес|отед ко|ийопк со коите кегюик ргоЫегпк. |и 1974, Фе гекспсйоп итар о( М13 ъчак пкйтеисату, (Ье |осайопк о( йк | деиек м еге чадие, апд, ъчогкт о( ай (ог Мекк)ид, сЬе гекспссюп епгугпек апд РЛА йдакек гет|Ыгет! (о ко|че ! СЬеке д(й)си|С(ек апд со сопксгисс чессогк меге пос соитгиегс|айу ача|аЫе.
Мекяпд (1991, 1993, 1996) Ьак декспЬес! )п коте десай йе Ьоосксгарр|пд апд Ьоггомлпд сйас ечепсиайу айоъчед Ыги со |пкегс |пса М13 йе деиейс е|епъеис сЬас Ьак Ьееп сЬе 1сеу со сЬе киссекк о( ай киЬкег|иепс чессогк о( сЬе птр кепек: а 789-Ьр (гадитепс о( Е)НА епсод(ид СЬе сопсго! гед(оп о( сЬе м тЫ суре |ас орегои апд йе Игя 146 апт|по аскЬ о( й да|ассоядаке. ТЬе геки|С(пд гесоптЬтпаит М13тир1 дог Мах-Р!апсй )пксйлсе), ъчЫсЬ сагпес$ сйе |ас кес|иепсек |пкегсед (исо а Наей| ясе |п йе |псегдепк гед(оп о( (Ье ЬассегюрЬаде, ъчак ч|аЫе апд ехргеккед ап а-согир|егпепс(пд (гадтепт о( !)да|астояс|аке |и |п(ессег$ сейл (Мекк(пд ет а|.
1977; СгопепЬогп апд Мекк(пд 1978). Мекк(пд де$(Ьегасе!у сЬоке а к(та|и о( гиа$е Ьокс сейк сагту(пд ап Г ' р|акгиЫ епсод)пд а птисапс о( йда|ассояс$аке |асЫпд апйпо аскЬ 11-41. ТЫк с1е(ессЫе ро|урерсЫе сап аккоаасе ъчй йе 146-гек(дие аихио-сегптва! (гадтепс о( И-да!ассок)дале еисот|ес$ Ьу М1 3гпр1 со (опп ап епгуитайсзйу аяте ргосе|п. М1 Зптр1 млй сЬеге(оге (опп деер Ыие р|ас|иек м Ьеп р|асес| оп Ьокск сагту(пд йте арргорпасе Г ер|коите оп гиедюги сопса)п(пд |РТС ((коргору|-й-ст-(Ь(ода(ассок(де, а дгасвсоик |псйлсег от' сЬе И-да(ассок(даке депе) аид Х-да| (5- Ьгото-4-сЫого-3-(иди|у!+Ел-дтйассок(де, а сЬгогподеп|с киЬксгасе). (Гог адсйсюиа| ЬЬ|опса| десайя р|еаке кее йе (п(отта()оп рапеЬ оп Х-САЕ апд а-т ОМРсЕМЕи(ТАТ|О(ът |и СЬарсег 1.) )пкепюп о( (оге)дп РилА |иго сЬе (ас2 гед(оп о( М13гир1 иялайу ейт(пасек а-сотпр|ептепсайоп апс! д(чек пке со гесогпЬ)иапь йас , '(опп ра|е Ыие ог со|ог|екк р|ас|иек (СгоиепЬоги апг$ Мекк)пд 1978).
Мекяпд мак йеге(оге аЫе со г$ече|ор , 'а Ыксосйеикса| секс со ддйпдвкй Ьепчееп М13 гесотЫпапск (Ьас сагпес! а р|есе о((оге|ди 0$4А аис$ еитрсу | честогк йат ЫЫ по1. Мекяпд'к пехт Сакй мак Со ел|и(р йе |ас гед(ои о( М13тр1 млй гектпстюп ятек кЫСаЫе (ог с|оп(пд, ТЬе ' (ас (гадтеи1 спаса(пед по икейл| гексиссюи ясек апд (ечч кет|иеисек сЬас соиЫ Ье еая|у соичегсет! (псо опе. 0ипид а сир ти Са|3(оггт(а, Ьом ечег, Мекк)ид |еагиед йас Ите сЬчик а| тттисадеп плсгокигиейу|игеа мюиЫ ей)- с|епйу рюпюте СЬе соинегкюп о( диап(пе геядиек Со СЬупнпе.
СгопепЬогп апс! Мекк(пд (1978) СЬеге(оге сгеасес! М13птр1 мл|(Ь пйгокоитесЬу1игеа апг$ ксгееиес3 (ог всессюик КГ пто|еси1ек сЬас ъчеге йпеаигед Ьу, ЕсоК$. |п й|к ъчау, 1Ьеу ъчеге аЫе со Ьо|асе а ЬассепорЬаде (М13тр2) (Ьас сагпед ап Есой! ясе ас содои ях 1 оНЬе И-да|ассок)дале депе ак а сопкет|иепсе о(а С со Т сгапясюп.
Мекк(пд с|и(ей|у геа|ыед йтас |пдгапте вкег-, Сюпк о( куисЬе6с |вйегк |пса сЬе пем|у сгеасед Есой| ясе геса|пед (Ье(г аЫ$(су со куп(Ьек(ге ап а-согпр|егиепйпд йадтепс о(|3-да|ассояс|аке (п (п(ассад сейк. ТЫк оЬкегъа6оп ъчак ьлгпед со дгеас адчапсаде диппд СЬе соигке о( СЬе киссеед(пд 15 уеагк, м Ьеп Мекквд апд Ык сом огйегк ес|Ырред а киссеккюп о| тир нессогк млсЬ а млде чаг(ееуо( тииЫр|е с|оп|пд к(сек (е.д., р1еаке кее Мекк)пд 1979; Мекк|пд ес а|. 1981; уапЬсЬРеггоп ес а!.
1985; Ч(е)га апт| Мекяпд 1987, 1991). ТЬеке етиЬеИЫтптепЬ, сотЬ|иед мл|(Ь ап а|геас3у ромегйл1 кес о( Ыо|од(са! ргорег6ек, ргочт|ес! М13 чессогк ъчй дес)к)че ргасйса) адчапсадек (ог ясе-сйгессед тисадепек)к, киЫгасйне ЬуЬг)д)гасюп, апд кйосдип 0$4А кег|иепс)пд. 3.10 Отартет 3: ЪМот)ттпц тчтй Вастеттор)таце М13 Ъестоть пшпегагу сору оЕ депе Х тп йе 1агце тптегцепк гец(оп оЕ М13 (Сш!Гоу1е апд 5пнтЬ 1994). Ехргеьь(оп оГ йе депе (ь дпчеп Ъу йе Т7 ргопютег апд тЬегеЕоге оссшь оп1у ш Ьоьт се1! ь, ьисЬ аь )М109(Г3Е), тЬат ехргея Т7 ВЫА ро!утегаье.
ЮЬеп Гоге(цп Г)ХА ьет)иепсеь аге с1опед )пто йе ьирегпшпегагу сору оЕ депе Х, тЬе цепе (ь тпасбчатед апд тЬе геьп16пц гесотпЬтпапть сап тЬегеЕоге гер1кате оп !М109(1ЭЕ) се!1ь, ччЬ!сЬ, оЕ соигье, аге попрегш(ьяче Ьоьть Еог ешрту честогь. ТЬть е1ецапт ьуьтет, ьчЬ1сЬ тчаь дече!оред то гедисе йе соьт апд шапиа!!аЪог оЕ ьсгеешпц 1агце пшпЬегь оЕ р1ат)иеь Ьу ЫьтосЬеппса! ьтатп)пц, Ьаь пот Ьееп тчЫе1у адортед.
ВАСТЕгх!АЕ НОСТЬ ЕОгх ВАСТЕтх1ОРНАСЕ М13 ЧЕСТОтьЦ Весаые М13 ептегь тЬе Ьоьт се1! йгоицЬ ьех р)!т епсодед Ьу ап р Еастог, оп1у пта1е Ьастепа аге иьед то ргорацате йе гдгия 1п(ес6опь сап Ъе еьтаЫ)ьЬед ш Гегпа1е се11ь )Г йе ЪастепорЬаце Г)Ь)А (ь (птгос1исес1 Ьу тгапьЕестюп. Ноччечег, тЬе ргоцепу раг6с1еь ргодисед Ьу йе тгапьЕестед се11ь аге ипаЫе со шГест ойег се1!ь )п йе си!тите, апд йе у!е1дь оЕ чкгб аге сопьет)иепт1у чету 1очч. Вастепа1 ьтгашь саггутпц Р' р1аяпЫь апд а пшпЬег оГ цепебс шаг)теть иьеци1 (п ччог)т тч)тЬ М13 честогь Ьаче Ьееп сопьтгиссед Ъу Меьяпц апд Ьгь со-ччог)теть ( тап(ьсЬ-Реггоп ет а1.
1985). '1'Ье Го!!очч(пц аге тЬе пюя ипрогтапс оЕ тЬеье тпаг1сегь: ° 1асХА)М!5т А де!е6оп пштапт тЬат 1ас1сь тЬе ьет(иепсеь оГ тЬе (пс2 цепс сод!пц Гог йе апппотегпипа! рогтюп оЕ !1-ца1астоядаье (Вес(ттч(тЬ 1964). ТЬе рертЫе ехргеььед Ьу АМ!5 сап та)те рагс (п а-сотр1егпепсат)оп (()!1шапп ет а1. 1967; И1тпапп апд Регпп 1970). Мапу Ьоьть Гог ЬастепорЬаце М13 честоть саггу тЬть де1етед чегяоп оГ йе !ась депе оп ап р' р1аяпЫ. ° А(1ас-ргоАВ)т А де1е6оп оЕ тЬе сЬтотоьота1 ьецшепт йат ьрапь йе 1ас орегоп апс1 пе(цЬЬоппц цепеь сод(пц Гог епхутеь шчо1чед )п рго1(пе Ьюьупйеяь.
Вастепа1 Ьоьть сатгу!пц йть шаг)тег аге ипаЫе то иье 1астоье аь а сагЪоп ьоигсе апт1 гет)шге рго1!пе Гог цготчтЬ, ип1еьь ргоАВ (ь ргеьепт оп ап Г р1аяпЫ. ° 1ас1ь: А титапт оЕ тЬе 1ас) цепе тЬат ьуптЬеягеь арргохппате1у тепГо!д пюге гергеььог йап ед!д туре (Ми1!ег-Н111 ес а1.
1968). ТЬ)ь очегргодистюп оГ гергеььог ьирргеььеь ь611 Еигйег тЬе а1геат)у 1отч!ече1 оЕ тгапьспр6оп оЕ йе 1ас орегоп тп тЬе аЬьепсе оГ (пдисег. ТЬиь, ьуптЬеяь оЕ росепба!1у тохк рготе)пь (ь пппипгаед тчЬеп Гогетцп сод)пц ьес(иепсеь аге р!асед ипдег йе соптго! оГ тЬе Еас2 ргопютег )п се1!ь саггутпц а 1ас)ь гпитатюп. тттЬеп йе Ьоьт се!1ь саггу(пц а 1ас!ь пштатюп аге цгоччп ш ц!исоье, сатаЪо16е гергеьяоп гедисеь йе!ече1 оЕ тгапьспр6оп асгоьь тЬе тптегцепк гец!оп Еготп тЬе 1асУ ргопютег, апд ьо ротеп6атеь йе ргос1ис6оп оЕ япц!е-ягапс(ет1 )3ЫА.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
