Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.1 (522940), страница 79
Текст из файла (страница 79)
1992. ТЬе РЬаде 2 депе О сгапьспрбоп апсКегпипасог Ьбпбь РХА !п йе !асс депе рготосег аь К гпойЕеь КХА ро1утегаье. СеП 69: 1181 — 1189. Уео А. ап6 Ресм М. 1995. 5рес(Вс (псегассюп оГ сеппспаье, сЬе РХА рас)сад(пд епгугпе оГ ЬассепорЬаде 2, чбсЬ сЬе рогса! ртосеш оЕ йе ргоЬеай 1. Мо1. В(о!. 245! 14! — 150. Уоипд К. 1992. ВасгепорЬаде 1уяы МесЬапыпь апб геди1абоп. Мссгоб(о1. Век 56: 430 — 481. уоипд К.А. апд Райт К.Ч'. 1983а. ЕГЕс(епс Ко!а6оп оГ депеь Ьу ияпд апг(Ьоду ргоЬеь. Ргос. №й Асай 5с(.
80г 1194 — 1198. - — --. 1983Ь. уеаьс КХА ро1угпегаье П депеь: 1ьо!абоп чбсЬ ап6- Ьоду ргоЬеь. 5сгеисе 222! 778 — 782. ддм!ег !. 1967. 1пседгасюп-педассче (си!) пшсапсь оЕ РЬаде Е Ъг!'го1оду 31: 189. Е(ьь1ег 1., 5(диет Е., апб 5сЬаеб:г Е 1971. ТЬе го1е оЕ гесоспЬспасюп сп дгоигй оГ ЬассегюрЬаде !атЬда.!. ТЬе дапипа депе. 1п Т)се бассе!(ар)саде 1атЫа (ес1.
А.Р. НегьЬеу), рр. 455 — 475. Со!6 5рищ НагЬог 1.аЬогасогу, Со!д 5рппд НагЬог, Хесч Уог)с. 3.2 Сйаргег 3: (гчог)г(пд и тй ВастеПорйаде М)3 )гестогт ТНЕ 0!%СОТ(ЕКУ ОЕ МАЕЕ-ПРЕС)Е|С ВАСТЕК)ОРНАСЕ5 А аеагсЬ о( Ь)етч уодг Сйу аетчаде 0.оеЬ 1960) Еог ч(гиаеа Йат дгом оп1у оп гпа|е (Г апд Н*) атгава о( ЕтсйепсЫа сой гехи)тед (п (Ье Во|атюп о( аечеп туреа о( Ьастегюрйадеа Ф1 (ЬгоидЬ т7). Моат о| йеае ЬастепорЬадеа тигпед оит то Ье ыпай, арйег)са! чгиаеа тЬат сопта|п КЬ)А аа тйе)г депейс гпатепа! ((оеЬ апт$ Узпдег 1961). $1, а)тйоидЬ с|еаг$у д)((егепт Егогп тЬе о(Ьега |п Ьиоуапт депыту апт$ апйдепк а|гостите, мгах пос |гпгпетйасе|у атид(ед Ьесаиае |т гладе тигЫд р(аг)иеа (Ьат мгеге тййси$1 то де(ест алд соил(. Нотчечег, (Ье (п(т)а! герогт о( гпа(е-арес(йс Ьастег)орЬадеа (пар)гед о(Ьег дгоира то аеагсЬ (ог адд)т)опа! ч(гиаеа тчйЬ а аехарес|йс Ьоат галде.
Егопт (Ыа мог(т егпегдед тйе гла)е-арес)Ек Ьастег)орйадеа М13 (МипЫЬ 13) (Но(асйпе(дег 1963) апд Ы (Магчп апг! Нойгпап-Вегйпд 1963). Еаг|у е|ес|гоп пйсгодгарЬа о( И рЬадеа айомгед арйегеа егпЬетЫед |л а гпатпх о( тапд|ет$ ЙЬгоиа птатепа|, мгЫсЬ тчаа ат Вгат (Ьоидйт то Ье рй! (Лат Ьад детасЬед Егогп йе Ьастепа| сей май. Номечег, диппд ех|епаье апегпрь то с|еап дте Ьас|егюрЬаде ргерагатюпя (п(есйчйу а|мауа гегпа|пед аааос)атед майт (Ьеае |опд йех(Ые год-й(те ягистигеы ТЬе соле|па(оп йат (Ьеае й)аглелта и еге, |п (аст, йе Ьастепорйадеа мгаа атгепд(Ьепед Ьу йе оЬаегчатюпа (1) (Ьат Ь~дй |Вега о( (л(есбоиа ч)гиа тчеге а|и ауа Ь|дЫу часоиа апд (2) (Ьат йе |п(есйчйу мах чеку аепвйне то ейеаппд Еогсеы СЬепт|са| апа)уа)а аЬотчед йат Ите й)агпепЬ солта|лед Е)$4А и Ьоае Ьаае согпроыйоп тчаа пот сол. аьтепт ма|(Ь ууатаоп-Сг(с(т Ьаае ра|ппд.
|и атЫЫоп, (Ье $3НА аЬомгед апогпа)оиа Ьус|годупапт|с ргореи(еа ~ Фат мгеге пот ипдегатоод ат йе 6гпе Ьит аге лом еаайу |птегргетаЫе аа йоае ехрестед о(с|гси|аг апд йпеаг а(пд)е-атгапдед Е)Ь(А пто|еси|ея ТНЕ В1О1.ОСтг ОГ Н!А|у!ЕНТО!.$$ ВАСТЕШОРНАСЕЬ М13 ь а тпетпЪег оЕ а Еашду оЕ Ет1ашептоиа ЬастепорЬадеа чд(Ь а|пд1е-атгапдед $3Ь)А депошеа -6400 Ьааеа |п 1епд(Ь. ТЬе депошеа оЕ М13 апд (ь ттчо с1оаеат ге1ат|чеа Я апд Е1 аге огдашхед Ыепдса11у, апд тЬетг рагдс1еа аге ыпи1аг ш яке апд аЬаре. ТЬе Е)Ь)Аа оЕ (Ьеае ЪастегюрЬадеа Ьаче Ъееп сошр1ете!у ает)иепсед (Я, Вес1с ет а|.
1978; М13, чап ЧтехепЪее)с ет а1. 1980; Й, Вес)т апд 7(п)с 1981). Моте тЬап 989а оЕ йетг пис1еодде аес(иепсеа аге Ыепдса|; йе Еетч а|тех о! д|ЕЕегепсея аге асаьегед агоипд йе депоше, шоаду ш йе (Ьтгд роядоп оЕ гедипдапт содопз (Вес1с апд Х|п)с 1981). М13, Я, апд 6 асдче!у сошр1ешепт апд гесошЫпе мпй опе апотЬег (1уопа апс1 Х(пдег 1972) апт1 шау Ье гедагдед ав Ыепдса1 Еог йе ригроаеа оЕ (Ье ашпшагу (Ьат Ео1!отчы ТЬе депедс шар оЕ ЬастегюрЬаде М13 ь аЬотчп тп Р|дите 3-1. ° М13 ЬастепорЬадеа аге Ет1ашептоиа рагдс|еа тЬат |пЕест оп1у ша|е Ъастепа апд с$о пот !уае тЬе|г Ьоаты!пвтеад, (Ьеу аге ге1еааед Егош |пЕестес1 се1!а ечеп аа (Ье сеПа сопдпие то дгоъч апд д|н|де.
° Е)иг(пд |и!ест|оп, йе а|од!е-атгапдед ЪастепорЬаде депоше Ы сопчегтед (пто а доиЫеатгапдед, стгси1аг Еоггп сайед тЬе гер1кадче Еогш (КР), м ЬкЬ гер1|сатеа аа а Са(гпа ог 0 атгиссиге. ТЬе Кр шо!еси1еа (Ьеп депегате япд!е-зтгапдед р|ть (+)-атгапд ргодепу !)Ь)А пю1еси1еа Ъу а го11тпд-стгс1е шесЬапып. КР тпо1еси!ев аге а!во тешр1атев Еог тгапаспртюп оЕ М ! 3 депеы оЕ мгЬ~сЬ (Ьеге аге $ !. ° ТЬгее оЕ (Ье ига! депе ргодиста (р11, рУ, апд рХ) аге тпчо!чед |п тЬе гер1кадоп оЕ тЬе тдга! Е)Ь)А апс1 6че ч|га1!у сот1ед тгапыпешЬгапе ргосе|па (р1| Ь ртг1, р тг!1, рУ!!1, апд р1Х) ша1се ир йе сара(д.
° Ргодепу рагдс!еа аге Еоппед Ьу а сопсегтед ргосеаа !п м|дсЬ соат рготе|па аге шиатегед што йе Ъастеда! шептЪгапе тчЬеге тЬеу аге аааетпЫед агоипд (Ье (+)-атгапд ргодепу $3Ь)А пто1- еси1еы ТЬе рготе|п-Е)Ь)А соптр1ех Ы ехтгидед 6огп йе се11 ш тЬе Еопп оЕ а 6!ашептоиа ч(гиа рагтк1е. ТЬеае ьчо ргосеааеы аесгет|оп апд аааешЫу оЕ йе 6!ашептоиа чтгть рагдс1е, оссиг яши1(апеоиа1у тп а соогд|патед тпаппег. ТЬе ч(га1 депе ргос1ись р1, р!' (ъчЬкЬ Ь а1ао )тпоччп аа рХ1), апс1 р!"тг аге тес!шгет1 Еог аааегпЫу оЕ ргодепу ЪастегюрЬадеы Ьит с1о пот Ъесоше шсогрогатед тпто рагдс!еы ЗА СЬарсег 3| Мог)стП ил|с)т Вас!ее|ар)ласте М!3 Нес!оп ТАВГЕ 3-1 5ишшагу оЕ СЬе Риис!!опз оЕ РгоСе1пз Епсот)ет) Ьу ВасСег!орЬаее М13 Рептесмтт 5суе Рслмсгспм р1, ъчЬкЬ арапа йе |пист тпеи|Ъгапе оЕ М13-и|Гессе|1 Ъассепа, |и|стась ччсЬ сЬе чьа! р1Н апИ Ьозс-епсос$ед Ииоге- Иох)п апИ гпау а)ю гесо8п!ге сЬе рас)са8)п8 я8па! ш рЬа8е РХА, |ЬегеЪу ш!с)аИп8 рЬа8е аыешЫу.
А япаПег ргоИисс, рХ1, Ь ргодисеИ Ьу шсегпа! !пи|асюп оЕ сгапз1аИоп |чиЬш сЬе Пепе 1 тгапзспрс ас п|есЬюп|пе со|1оп 241. рХ), |чЫсЬ Ь а)зо )спи|чти аз р!', тиау Ъе личо!чеИ !и Еогпип8 йе я|е Еог аыешЫу оЕ ЬассепорЬа8е рапк1ез. рП348 гезЫиез рП )псгодисез а пк)с ас а зрес|6с яте |п сЬе |псе|8епк ге8!оп оГ йе (+)-зсгапд оГ Кр РХА, шйас|п8 йе гоП|п8 сис)е рЬазе оЕ гер1каИоп, итЬкЬ 8епегасез (л+зсгапс$ рго8епу РХА шо1еси!ез. РП аЬо деачез йе яп8)е-зсгапИед рго|Ьлсс оЕ гоПш8 с|гс!е гер1касюп шсо п|опогпепс тпо!еси!ез |Ьас аге рас)та8ед |пса рго8епу ЬассегюрЬа8е рагИс)ез. рП/410 гез!Ииез р1П, а пнпог соас ргосе|п, ь апсЬогеИ со йе гпеп|Ьгапе Ьу а яп81е шесиЬгапе-зрапп|п8 Иоша!п пеаг йе са|Ъоху) сегпшилз. Аз йе М13 6)ап|епс еп|ег8ез Ггогп йе шГессе|1 сеП, йгее со 6че сор|ел оГ р1П аге ассасЬед со йе ргохниа! Ир оГ |Ье ЬассепорЬа8е рапк!е.
ТЬе ргохииа1 Ир епсегз а пе|ч Ьоы 6гзс дипп8 |пГесиоп апИ!еачез йе гпегпЪгапе )азс |чЬеп рго8епу рагск1ез аге ехсгиИей р!П, |чЬьсЬ ьз аыос|асеИ |Ый рН! ат сЬе ргохнпа! Ир, ь гет)и!геИ Гог а|Ьогрсюп оЕ йе ЬассепорЬа8е со йе зех рП| оЕ пе|ч Ьозь апд Гог репетгасюп оГ йе рЬа8е РХА. Еияоп рерсЫез |п ЬассепорЬ48е йзр1ау 1|Ьгапез аге )оса|ад ш сЬе еаг1у тпашге ге8!оп оГ рШ, пеаг ог !пнпесПасе! у аИ)асепс со йе я8па! рерИ|1е с)еача8е ясе.
р1П/427 гез!Ииез р)Н, а спи1Итпепс ргосе!п, гпау Еопп а Пасе|1 сЬаппе1 соппесИп8 йе Ьассепа! сусор!аып со йе ехсегюг. р!Н, |чЬкЬ |з зуп- йеятес) !и )аг8е т)паис!с!ез |п )пуессеИ се!Ь, !псегассз ж!сЬ р! апИ Ь тел)и!геИ Еог йе !п|Ъ|ссюп оГ йе В. соЬ рлр (рЬа8е зЬос)с ргосе!п) орегон сЬас оссшз Ииг!п8 М13 |пГесИоп. р)Н/428 гея|1иез рН, ап 87-апнпо-асЫ ргосеш зупсЬеыгеИ !и 1аг8е ашоипь !и !иГессеИ сеПз, Ь~п|Ь зсгои8)у апд !и а соорегаИче тпаппег со пе|ч1у зупсЬеытеИ (+) зсгапдз. ТЬе гею!ип8 рН-РХА со|пр!ехез шоче со зрес!а1ЬеИ рас)са8!и8 ясез оп сЬе Ьассег|а! и|еи|Ьгапе, |чЬеге рН ь зспрре|1 !тоти йе чиа) Г)ХА ап|1 ь гесус)еИ !псо сЬе сеП,!п аИсПИоп со РХА Ъ!псПп8, рН а1зо ась аз а стаи|!асюпа! гергезюг Ьу Ъ|псПп8 зрес|6саПу со йе )еаИег зет)иепсез оЕ ч!га! п|КХАз соИ!и8 Еог 8епе П апИ о|Ьег чиа) ргосешз.
ТЬезе ичо ргорегИез оЕ рН |чтит)с !и сои|Ь~паИоп со ге8и)асе ЪосЬ йе ехргеыюп апИ гер1касюп оГ йе ч!га! 8епотпе, )НЪеп йе |пьасеПи!аг сопсепсгаИоп оГ рН геасЬез а спИса! 1ече! (10| со 10| ию1еси!ез/сеП/8епега|1оп), йе сопчегяоп оЕ рго8епу (т) зсгапИз со ИоиЫе-зьапИеИ Кр Ь юрргегьей апИ сЬе гоП!п8 сьс)е рЬазе оЕ ЬассегюрЬа8е РХА гер1|сасюп сЬегеЕоге ргосееИз ас ап еыепИаПу сои|санс расе. рН!87 гезЫиез рН! ь а пнпог соас ргосе|п оЕ М)3. А Ее|ч тпо)еси1ез оЕ рН1 аге )осасеИ ас йе ргохииа1 епИ оЕ сЬе М13 61атпепс, итЬеге |Ьеу аге аззос!асеИ |чиЬ рП!. рН! Ь а п|е|пЬгапе ргосе)п йат ь )осасеИ !и йе сусор1аыпк п|ешЬгапе Ьетоге шсогрог- асюп )псо Ыгиз рагИс)ез.
рН!7!12 гезЫиез рНП Ь а соас ргосе!п сЬас |псегасычЬЬ сЬе рас)са8!п8 я8па! 1осасе|1 ш |Ье |псе|8еп!с ге8!оп оЕ М13 РХА. ГПче тпо1еси1ез оЕ рНП аге )осасеИ ас йе епИ оЕ сЬе ЪассепорЬа8е рагИс1е сЬас ешег8ез 6гы Егогп йе !пуессеИ сеП. рНП)ЗЗ гез)Ииез рН1П, йе п|а)ог соас ргосеш оГ М13, ь зупсЬез!хед аз а ргергосе!п 1|по|чп аз "ргосоаср |чЫсЬ Ь|п|Ь со сЬе шпет зшЕасе оЕ йе р1аяпа шешЬгапе апд зиЪзес)иенс)у сгап|1осасез аз а 1оор зсгиссиге асгоы йе гпеп|Ьгапе ш йе ргезепсе оГ а тгапяиеп|Ъгапе росепИа).
РагИс!ез оЕ М13 санса!п -2700 сор|ел оЕ сЬе ргосегьес1 ог шашге 50-гезЫие с|-Ье1ка! ргосе!п, аггап8еИ |п а суПпдпса! зЬеасЬ агоипс) |Ье ЬассепорЬа8е РХА. рНПП73 тех!диез р!Х!32 тезкЬ|ез Тгапз!аИоп оЕ рХ Ъе8!пз а| йе ш-Егатпе АПС спр1ес ас соИоп 300 оГ рП. рХ ь |ЬегеЕоге Ыепс)са! 1п зетрлепсе то сЬе сагЪоху-сегпнпа) сЬ)гд оГ рП. рХ, |чЬзсЬ лз тес)и!геИ Гог еЕ6с)епс ассипш!асюп оГ з)п8)е-зсгапИеИ РХА, ь а россет)и! гергезюг оЕ рЬа8е-зрес|6с РХА зупсЬеяз |п что апИ ь сЬоиПЬ| со Ппнс сЬе пшпЬег оЕ Кг тпо1еси1ез |п !иГессеИ сеПз. рХ рХ1, |чЬ!сЬ зраиз йе сусор!аяик гпешЬгапе Ьш 1ас1|з а сутор!аыи)с т)огпа!п, ь ргоИисеИ Ьу |псегпа! |пн!ас)оп оЕ стана)асюп |чиЫп йе 8епе! сгапзспрт ас тпейюп|пе соИоп 241, рХ! тпау Ъе !ичо)чед ш Гопшп8 сЬе ясе Сот аыеп|- Ыу оГ ЬассепорЬа8е рагск)ез.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
