Диссертация (1174376), страница 19
Текст из файла (страница 19)
Насколько сильно состояние Вашей кожи помешало Вашим контактам сокружающими, активному отдыху за последнюю неделю?6. Насколько сильно состояние Вашей кожи помешало Вам в занятияхфизкультурой и спортом за последнюю неделю?7. Помешало ли Вам состояние Вашей кожи в работе или учебе запоследнюю неделю?1188. Влияло ли состояние Вашей кожи на общения с друзьями, близкими,родственниками, партнерами за последнюю неделю?9. Насколько сильно состояние Вашей кожи затрудняло Вам интимныеотношения за последнюю неделю?10. Насколько сильно лечение Вашего заболевания изменило порядок Вашейжизни (например, Вы потеряли много времени, денег, уделяли мало вниманияработе, семье)?Степень влияния заболевания на качество жизни больных определялось по4-х балльной шкале Likert (0 – нет, 1 – немного, 2 – умеренно, 3 – очень сильно,ответ «неактуально» – 0 баллов). DLQI находился в пределах от 0 до 30.
Междузначением индекса КЖ (DLQI) и уровнем КЖ существует обратная зависимость –чем выше ДИКЖ, тем более тяжёлые расстройства наблюдаются у данногопациента. Максимальное значение (30 баллов) – существенное ухудшениекачества жизни за счет болезни. На вопрос № 7 трактовка отличалась (при ответена вопрос «нет» выставлялось 0 баллов, при ответе «да» – 3 балла).4.2.2. Лабораторные методы исследованияЛабораторные исследования включали определение провоспалительныхцитокинов (IL-2, IL-6 и VEGF).Решающую роль в регуляции иммунного ответа играет рецептор цитокинаинтерлейкина 2 (IL-2), который в основном экспрессируется на поверхностиактивированных Т-клеток.
Связывание IL-2 с его рецептором (IL2R) М запускаетсерию внутриклеточных сигнальных процессов, в результате которых происходитактивация и пролиферация покоящихся Т-клеток с образованием субпопуляцийТ-хелперов, Т-суппрессоров и цитотоксичных Т-лимфоцитов, которые являютсямедиаторами иммунного ответа [1, 25].Для КПЛ характерным является эпидермотропизм – проникновениелимфоцитов (в основном, цитотоксических CD8-лимфоцитов, являющихсятриггерами апоптоза) в эпидермис, где они осуществляют цитопатогенное119действие в отношении кератиноцитов. В результате разрушения кератиноцитовобразуетcя повышенное количество IL-1, который стимулирует выделение IL-2.Количественное определение уровня рецептора интерлейкина-2 в сывороткепациентов производилось на анализаторе IMMULITE 2000.
В основе тестаIMMULITE 2000IL2R(Рецепторинтерлейкина 2)–твердофазный,хемилюминесцентный иммуноферментный анализ (сэндвич). В качестве твердойфазы использовался набор из 200 шариков (IL-2R Bead Pack (Клинья с шариками)– L2IP12), покрытых моноклональными мышиными антителами к IL2R. Вкачестве реактива применялись IL2R Reagent Wedges (Клинья с реактивом) –L2IPA,содержащие11,5 млщелочнойфосфатазы,конъюгированнойсполиклональными кроличьими антителами к IL2R, в буфере с консервантом.Специфичность: антитела, используемые в тесте IMMULITE 2000 IL2R, высокоспецифичны к рецептору IL-2.
Значения IL2R выражаются в Е/мл, по умолчанию.Интерлейкин-6 (IL-6) является иммунорегуляторным медиатором и обладаетшироким спектром биологической активности. Основная функция IL-6 –стимуляция дифференцировки B-клеток и активация Т-клеток. В присутствии IL-2оннаправляетдифференцировкуТ-клетоквцитотоксическиеТ-клетки, оказывающих цитопатическое действие при КПЛ, и индуцируетпролиферацию тимоцитов.
IL-6 проявляет активность в концентрациях менее10 пг/мл. Уровень IL-6 в сыворотке или плазме крови может быть повышен приразличных заболеваниях, например, при сепсисе, аутоиммунных процессах,лимфомах,СПИДе,алкогольномпоражениипечени,упациентовсинфекционными заболеваниями и при отторжении трансплантата [25].Количественноепроводилосьнаопределениеанализатореуровняинтерлейкина-6IMMULITE 2000.Тествсыворотке«Интерлейкин-6»используется для «in vitro» диагностики воспалительных заболеваний.
В основетестаIMMULITE 2000IL-6–твердофазный,хемилюминесцентныйиммуноферментный анализ (сэндвич). Твердая фаза содержит IL-6 Bead Pack(Клинья с шариками) – L26P12. Каждый клин мечен штрих-кодом и содержит 200специальных полистирольных шариков, покрытых моноклональными мышиными120антителами к интерлейкину-6. В качестве реактива использовалось 11,5 млщелочнойфосфатазы,конъюгированнойсполиклональнымиовечьимиантителами к ИЛ-6, в буфере с консервантом (IL-6 Reagent Wedges (Клинья среактивом) – L26PA2). Значения IL-6 выражаются в пг/мл, по умолчанию.Для определения микроциркуляторных нарушений при типичной игипертрофической формах КПЛ проводилось изучение фактора роста эндотелиясосудов (ФРЭС, VEGF) как одного из основных регуляторов ангиогенеза.ОпределениеVEGFвсывороткепациентовпроводилиметодомиммуноферментного анализа с использованием коммерческих наборов реагентовVEGF-ИФА-БЕСТ, производства ЗАО «Вектор-Бест», Россия, кат.
№ А-8784.Принцип определения – твердофазный «сэндвич» вариант иммуноферментногоанализа с применением моно- и поликлональных антител к VEGF человека.Анализ проводили в соответствие с инструкциями к наборам реагентов, учетрезультатов реакции проводили на микропланшетном фотометре Multiscan Ascentпроизводства Thermo Electon Corporation, Финляндия. Обработку данных ивычисление концентраций исследуемых показателей проводили с использованиемпрограммы “Ascent Software™ ver.2.6” производства Thermo Labsystems,Финляндия.
Значения VEGF выражаются в пг/мл, по умолчанию4.2.3. Статистическая обработка полученных данныхНапервомэтапестатистическойобработкивнастоящейработеосуществлялась проверка нормальности распределения по каждому признаку сиспользованием критерия Колмогорова-Смирнова, на втором этапе-многомерныйдисперсионный анализ с проверкой гомогенности групп (использованы методикиЛевена и Дункана). Распределения признаков являлись нормальными, поэтомуиспользовались параметрические методы (t-критерий Стьюдента для связанных инесвязанных выборок с определением средней арифметической (М) и еестандартной ошибки (m); различные виды дисперсионного анализа).
Оценкавзаимосвязи между ранговыми и количественными параметрами производилась121методом корреляционного анализа Спирмена. Коэффициенты корреляции иразличия между группами считались статистически значимыми при р < 0,05.Статистическая обработка полученных данных производилась при помощи пакетапрограммSPSS 16.0иOrigin Pro 2016.Дляграфическогоотображениярезультатов применяли программу «Microsoft Excel XP™» и Origin Pro 2016.4.2.4. Оптические методы исследования у больных КПЛ.
Выбориммерсионного агента для проведения УФA-1 терапииУ всех пациентов с красным плоским лишаем до начала проведения УФA-1терапии проводилась сравнительная оценка просветляющих агентов с помощьюоптического когерентного томографа OСS1300SS (производство Thorlabs Inc,США). Данное исследование было необходимо как в отношении изучениядинамики просветления при использовании разных иммерсионных веществ впораженном участке (папулезный элемент при КПЛ) для повышения качествадиагностики, так и для выбора оптимального наружного средства, способногоувеличить доставку УФ-излучения в глубь ткани при проведении фототерапии.Также, проводилась оценка безопасности используемых веществ у пациентов.Проведение данного исследования включало несколько этапов.
Вначале, укаждого отдельного пациента проводился выбор 4-х папулезных элементов,сходных по величине и размеру и расположенных в одной анатомической области(вбольшинствесгибательнаяслучаевповерхностьосновнойлокализациейпредплечий).Затем,высыпанийсцельюявляласьувеличенияпроницаемости рогового слоя по отношению к исследуемым просветляющимагентам производилась обработка пораженных участков 95%-м растворомэтилового спирта. После этого, иммерсионные вещества наносили на элементыКПЛ под окклюзию (полиэтиленовую пленку) для усиления чрескожногопроникновенияипредотвращениястеканиявеществ.ОКТ-визуализациюпроводили до нанесения ПА и через 5 – 15 – 30 – 60 минут. Максимальное времяэкспозиции составило 60 минут.
После проведения исследования просветляющие122агенты удалялись с поверхности кожи с помощью воды с мылом. Результатыисследований подробно описаны в главе 3 разделе 3.4.4.3. Оценка эффективности УФA-1 терапии у больныхкрасным плоским лишаем4.3.1. Динамика показателей индексов ILP, пруриндекса и ДИКЖв процессе леченияЭффективностьпроводимойтерапиив3-хисследуемыхгруппахопределялась по динамике индекса дерматологического статуса красногоплоского лишая (ILP), пруриндекса и ДИКЖ. В зависимости от суммарногозначения индексов у пациентов было отмечено различное течение дерматоза:легкая степень тяжести диагностировалась у 20 человек, средняя степень тяжести– у 46 человек, тяжелое течение – у 14 человек.Для тяжелого течения было характерно: в основном, распространенныйхарактерпораженияпритипичнойформе(> 30%поверхноститела),гипертрофическая форма, непрерывно-рецидивирующее течение, отсутствиеэффекта от стандартных методов терапии на амбулаторном этапе лечения илинезначительное улучшение в предыдущую госпитализацию, ILP ≥ 18 баллов,пруриндексвдиапазоне8-10,ДИКЖ > 20.Среднетяжелоетечениехарактеризовалось следующими показателями: площадь поражения кожи убольшинства пациентов не > 20%, охват нескольких зон, ILP - от 10 до 18 баллов,пруриндекс – 5-7, ДИКЖ – 10-20.
Для легкого течения дерматоза былохарактерно:характерпораженияограниченный(площадьпоражениянепревышала 10%), ILP < 10, пруриндекс – 1-4, ДИКЖ < 10; первичное обращениепо поводу высыпаний КПЛ или длительные ремиссии в анамнезе. Во всех группахпациенты были сопоставимы по исследуемым показателям (таблица 4.6).123Таблица 4.6 – Распределение 3 групп пациентов по степени тяжести дерматоза иих характеристики (M ± m)Характеристика 1 группы (УФА-1 терапия + 1,2-ПГ)Тяжелое течение(n = 4)ILP20,5 ± 0,4Среднетяжелое течение(n = 15)16,1 ± 1,4Легкое течение(n = 6)8,3 ± 1,5Пруриндекс8,7 ± 0,46,3 ± 0,62,2 ± 0,6ДИКЖ22,5 ± 1,517,8 ± 1,59,6 ± 0,4Характеристика 2 группы (УФА-1 терапия)Тяжелое течение(n = 5)Среднетяжелое течение(n = 14)Легкое течение(n = 6)ILP18,7 ± 1,615,6 ±0,37,5 ± 0,5Пруриндекс8,4 ± 0,55,6 ± 0,83,3 ± 0,5ДИКЖ23,2 ± 1,217,3 ± 1,18,8 ± 0,8Характеристика 3 группы (УФБ, 311 нм)Тяжелое течение(n = 5)ILP19,4 ± 0,6Среднетяжелое течение(n = 17)15,9 ± 0,5Легкое течение(n = 8)7,7 ± 0,4Пруриндекс8,1 ± 0,45,8 ± 0,63,6 ± 0,6ДИКЖ22,4 ± 0,817,1 ± 0,47,7 ± 0,5Среднегрупповое значение ILP в основной группе составило 14,7 ± 0,8, сдостоверно выраженной динамикой снижения исследуемого индекса до 0,5 ± 0,2(р < 0,05) после лечения.
У пациентов 1-й группы с тяжелой степенью теченияКПЛ после проведения УФА-1 терапии с 1,2-ПГ значения ILP находились впределах3-5баллов,чтосоответствовалозначительномуулучшениюпатологической картины на коже. При средне-тяжелом и легком течении –значения индекса не превышали 3 баллов, что соответствовало практическиполному или полному разрешению патологического процесса на коже.У пациентов 2-й группы ILP до лечения составил 14,9 ± 0,9, к концу лечения– 3,8 ± 0,2 (р < 0,05) соответственно. В результате проведенного лечения убольных с тяжелой степенью течения дерматоза диапазон значений индекса ILP124не превышал 8 баллов, что соответствовало улучшению клинической картины накоже. У большинства пациентов со средне-тяжелым течением красного плоскоголишая ILP колебался в диапазоне 4-7 баллов, что свидетельствовало означительном улучшении патологической картины.
При легком течениидерматоза после окончания терапии рассматриваемый индекс был в пределах3-5 баллов,чтотакжесоответствовалозначительномуулучшениюпатологического процесса на коже.В 3-й группе пациентов, получавших узкополосную средневолновуюУФ-терапию, также прослеживалось достоверное снижение индекса послелечения, но в значительно меньшей степени по сравнению с группамиУФА-1 терапии – с 14,8 ± 0,8 до 5,4 ± 0,5 (р < 0,05). После окончания терапии убольных с тяжелым течением ILP был в пределах 10 баллов, при средне-тяжеломи при легком – не превышал 7 баллов, что свидетельствовало об улучшенииклинической картины, но в меньшей степени, чем в 1-й и 2-й группах(рисунок 4.8).Рисунок 4.8 – Динамика регресса индекса ILP в процессе лечения в 3 группахпациентов: УФА-1 + ПА (просветляющий агент 1,2-пропиленгликоль)При сравнении динамики клинической картины в 3 группах больныхнаиболее выраженное позитивное влияние как на скорость разрешения125патологических элементов, так и на конечный уровень ILP после лечения,прослеживалось в основной группе.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
