Диссертация (1174350)
Текст из файла
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ НАУЧНОЕУЧРЕЖДЕНИЕ «ИРКУТСКИЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР ХИРУРГИИ ИТРАВМАТОЛОГИИ»На правах рукописиЗЕЛЕНИННиколай ВадимовичУПРАВЛЕНИЕ ПРОЦЕССОМ ЗАЖИВЛЕНИЯ ХИРУРГИЧЕСКОЙ РАНЫПУТЁМ ИЗМЕНЕНИЯ АКТИВНОСТИ Р38 МАРК КАСКАДА14.01.31 – пластическая хирургияДИССЕРТАЦИЯна соискание учёной степеникандидата медицинских наукНаучный руководитель:доктор медицинских наук,Н.Е.
МантуроваНаучный консультант:доктор медицинских наук,профессор РАНИ.А. ШурыгинаИркутск – 20192ОГЛАВЛЕНИЕВВЕДЕНИЕ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4ГЛАВА 1 УПРАВЛЕНИЕ ПРОЦЕССОМ ЗАЖИВЛЕНИЯХИРУРГИЧЕСКОЙ РАНЫ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ) . . .
. . . . 101.1 Современные принципы лечения ран . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 101.2 Фазы заживления раны. Факторы, влияющие на заживлениераны . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 131.3 Митогенактивируемые протеинкиназы. Влияние р38 МАР-киназына развитие соединительной ткани . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 171.4 Использование блокаторов p38 MAP-киназ . . . . . . . . . . . . . . . . . .22ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ, ИСПОЛЬЗОВАННЫЕВ РАБОТЕ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . .252.1 Моделирование кожно-мышечной раны . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 252.2 Определение механических характеристик сформированногорубца на модели кожно-мышечной раны . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 272.3 Морфологические и морфометрические исследования . . . . . . . . . 282.4 Иммуногистохимические и иммунофлюоресцентныеисследования . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 292.5 Электронно-микроскопические исследования . . . . . . . . . . . . . . . .322.6 Методы статистического анализа . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 32ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ . . . . . . . . .
. . .. . . . . . . . . . . . 333.1 Особенности формирования послеоперационного рубцав условиях локального подавления активности p38 МАР-киназыпри заживлении кожно-мышечной раны . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 333.2 Механическая прочность послеоперационного рубцапри подавлении активности р38 МАР-киназы . . . . . . . . . . . . . . . .443.3 Оценка синтеза коллагена при формированиипослеоперационного рубца на фоне снижения активностир38 MAP-киназы .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4833.4 Влияние блокатора р38 МАР-киназы на дифференцировкуфибробластов в зоне формирования послеоперационногорубца . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . .583.5 Изучение ультраструктуры клеток фибробластического рядапри подавлении активности p38 МАР-киназы . . . .. . . . . . . . . . . . . 72ЗАКЛЮЧЕНИЕ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .78ВЫВОДЫ . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 86ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 87ОБОЗНАЧЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ . . . . . . . . . . . . . . . . .. . .
. . . . . . . . . . . . . 88СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .894ВВЕДЕНИЕАктуальность темыМожно без преувеличения сказать, что знания о заживлении ран относятсяк фундаментальным знаниям медицины и пластической хирургии, в частности.Jeffrey E. Janis и Bridget Harrison считают, что успех развития пластическойхирургии основан на углублённом понимании одного фундаментального вопроса –заживления раны [117].Что бы ни было целью пластической хирургии, будь то замещение дефектовтканейлоскутамисосевымкровотоком,реплантацияконечностиилиэндопротезирование груди, выполненное по эстетическим показаниям, исходоперации зависит от заживления разрезов без осложнений [117].
С другой стороны,лечение уже возникших осложнений требует новых данных о механизмахочищения ран, роли биомаркеров в прогнозе и выборе тактики лечения [59],стволовых клетках и их роли в регенерации тканей [177], раневой инфекции иразвитии биофильма вокруг имплантатов [98].Пока остаётся мечтой создание таких условий для заживления раны, чтобыона заживала совсем без образования рубца или чтобы такой рубец формировалсябы с заданными свойствами.Понятно, что решение таких задач требует совместных усилий пластическиххирургов и учёных самых различных специальностей, а также огромныхфинансовых затрат [115, 153].Тем не менее, становится очевидным, что одно только совершенствованиехирургической техники не приведёт исчезновению проблемы заметных рубцов,и для качественного скачка нужны новые фундаментальные знания о механизмахвоспаления и формирования соединительной ткани.В современном понимании заживление раны представляет собой сложнорегулируемыйпроцесс,состоящийизмногочисленныхпоследовательнопроходящих реакций между клетками и формирующимся внеклеточнымматриксом.
Этот процесс регулируется хемоаттрактантами и митогенами,5а многочисленные факторы роста дают клеточные и молекулярные сигналы,необходимые для нормального заживления раны [62, 75, 76, 79, 194].Исследования, выполненные in vitro, приводят к значительному накоплениюнаших знаний по этому вопросу, однако в практической медицине по-прежнемуотсутствуют лекарственные препараты, которые препятствовали бы чрезмерномуразвитию рубцовой ткани [38, 53, 60, 74, 111, 135, 137, 144, 148, 158].Открытие митоген-активируемых протеинкиназ (mitogen activated proteinkinases, MAPK) позволило подойти к возможности управления процессомзаживления послеоперационной раны с новых позиций, так как дальнейшееизучение протеинкиназ, которые активируются митогенами, показало, что ониучаствуют в регуляции клеточной активности (экспрессия генов, митоз,дифференциация, выживание клеток, апоптоз).
В настоящее время механизмс участием МАР-киназ представляется следующим образом. Воздействие нарецепторымембраныклеткиприводит к развитию каскадныхреакцийфосфорилирования MAP-киназ и других регуляторных белков, в результате чегообеспечивается передача полученного сигнала в ядро клетки. Многократноусиленныйсигналприводиткактивацииилиподавлениюактивностиопределённых генов, а в результате запускаются воспалительный ответ, апоптоз,деление и дифференциация клеток [31, 84, 106, 134, 141].Управление активностью MAP-киназ может привести к появлениюпринципиально новых возможностей для заживления ран и образованиясоединительной ткани с заданными улучшенными свойствами.Целью нашего исследования стало изучение возможности управленияпроцессом образования послеоперационного рубца путём снижения активностимитоген-активируемой протеинкиназы группы р38.Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:1.
Наэкспериментамоделихирургическойисследоватькожно-мышечнойзакономерностипроцессапри искусственном снижении активности р38 MAPK.ранывусловияхзаживленияраны62. В условиях асептической кожно-мышечной раны при искусственномснижении активности р38 MAPK изучить экспрессию маркеров дифференцировкиклеток фибробластического ряда и синтетическую активность фибробластов.3. Определить механические свойства образующегося послеоперационногорубца при уменьшении активности р38 МАРК-каскада.4.
Разработатьметодформированияпослеоперационногорубцас заданными характеристиками посредством изменения активности р38 MAPK.Научная новизна1. Впервые установлено, что снижение активности p38 MAP-киназногокаскада в ранние сроки раневого процесса существенно влияет на характеристикиобразующегосясоединительнотканногорубцаисущественноизменяетвоспалительный процесс.2. Установлено, что при применении блокатора р38 МАРК снижаетсявыраженность нейтрофильной инфильтрации, модифицируется ответ клетокфибробластического ряда в зоне асептического повреждения.3. Доказаноснижениесинтетическойактивностифибробластовпри локальном применении ингибитора р38 МАРК в ранние сроки раневогопроцесса заживления раны.4. Впервые показано, что местное использование блокатора р38 MAPКSB 203580 приводит к существенному изменению механических характеристикобразующегосярубцанаместеасептическойкожно-мышечнойраны,соответствующей ране при субпекторальном увеличении молочных желез черезсубмаммарную борозду.
Характеристики
Тип файла PDF
PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.
Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
