Диссертация (1174334), страница 28
Текст из файла (страница 28)
Качественные изменения характеризуютсядегенерацией архитектоники примордиальных фолликулов, высокой степеньюфолликулярнойатрезииипреждевременнымсозреваниемфолликулов,вызванные, по мнению отдельных авторов, воспалительным процессом,ассоциированным с эндометриозом [150]. Развивая тему обоснованногоинтересакповреждениюовариальногорезервапослеповторныхорганосохраняющих операций на яичниках по поводу эндометриодныхобразований, как предикции вероятности наступления и вынашиваниябеременности,отметимфактпревалированияубольныхнемогутсРЭОЯдегенеративных явлений.Морфометрическиеизмененияклетокнапрямуюсвидетельствовать об активности пролиферативных, про- и антипоптотическихпроцессов,которыемоглибыобъяснитьмеханизмрецидивированияэндометриоза яичников [33,84]. Следовательно, для дальнейшего пониманияпатогенетическихмеханизмоврецидивированияэндометриозаипрогностической оценки рецидива мы предприняли попытку провестииммуногистохимическоефенотипированиесцельюобоснованияролинарушений механизмов рецепции эстрогена и прогестерона, процессовпролиферации, апоптоза и клеточной адгезии в патогенезе заболевания.Информативность иммуногистохимического исследования считают доказаннойдля прогнозирования вероятности реализации репродуктивной функции.Общеизвестным является значение уровня экспрессии рецепторовэстрадиола в развитии и прогрессировании эндометриоза; биологическизначимые уровни эстрогена и прогестерона вырабатываются в эндометриодныхтканях из-за аномальной активности каскада стероидогенеза [79], что всовокупности с воспалением отвечает за два основных клинических проявленияэндометриоза - хроническую тазовую боль и бесплодие [100,111].
Эстрогеныпотенциируют распространение и выживание эндометриодной ткани, в то166время как простагландины и цитокины способствуют воспалению, боли ибесплодию. В пользу чувствительности очагов эндометриоза к влияниюэстрогенов свидетельствует их наличие в имплантатах [79,84,185]. Согласноотдельнымсообщениям,нарушеннаяэкспрессиярецепторовполовыхстероидных гормонов может приводить к недостаточной функции яичников, и,таким образом, повлиять на фертильность [79].В ходе нашего исследования расширено представление о стероидномпрофиле рецидивирующих и впервые выявленных образованиях яичников.Спектр рецепторной активности к эстрогенам в ИГХ-позитивных клеткахэпителиального и стромального компонента РЭОЯ в I группе изменялся от 10до 70% (33,33±4,32%).
Во II группе выраженность экспрессии находилась впределах от 10 до 35% (20,71±4,92%). Суммируя полученные результаты, врецидивирующих ЭОЯ экспрессия ER достоверно выше, чем в образцах,полученных при впервые выявленном эндометриозе (критерий Манна-Уитни,p=0,035),свидетельствуяовысокойпролиферативнойиэстрогеннойактивности рецидивирующего эндометриоза [33].Согласно литературным данным, ученые не сошлись на едином мнениипо поводу экспрессии прогестероновых рецепторов в энуклеированныхэндометриоидных образований [1,33,84,100,185]. В одних работах активнонаходит подтверждение факт о высоком уровне экспрессии прогестероновыхрецептороввэндометриоиднойткани[33,84].Другимиавторамипродемонстрировано повреждение экспрессии рецепторов прогестерона вклеткахэктопическогополученнымиврезистентностьСовокупныйэндометрия,нашемкисследовании,терапиианализчтосогласуетсячто,споказателями,вероятно,обусловливаетгестагенсодержащимиполученныхданныхпрепаратамипоказал,что[1,84].экспрессияпрогестероновых рецепторов (PR) снижена в 1,8 раза при РЭОЯ в сравнении саналогичными показателями впервые выявленного эндометриоза (p=0,045).Представленныеданныеоповрежденииэкспрессиипрогестероновыхрецепторов в тканях РЭОЯ говорят о необходимости исследования рецепторов167прогестерона в тканях, полученных в ходе оперативного вмешательства сцелью определения патогенетически обоснованной гормональной терапии имогут выступать базисом предикции развития инфертильности за счетдиссоциации молекулярно-клеточных взаимодействий.Особую роль в потенциировании заболевания играют нарушения врегуляции процессов апоптоза, антиапоптотических и пролиферативныхкаскадов.
Пролиферативная активность напрямую связана с ее агрессивностью,поэтому мы изучили экспрессию Ki-67, как важнейшего маркера для оценкиуровняпролиферацииопухоли.Группойисследователейизученаиммунореактивность онкобелка Ki-67 у наблюдаемых с классифицируемым всоответствии с RAFS наружным генитальным эндометриозом III и IV стадии, вкотором установлена корреляционная связь между экспрессией белка Ki-67 сразмером образования и стадией эндометриоза [67].
Маркер Ki-67 указывает наповышение пролиферативной активности клеток, объясняя свою прямопропорциональную взаимосвязь с тяжестью заболевания [142]. Ki-67 маркерспособствует повышению активности клеточной диссеминации, что объясняетего экспрессию, прямо пропорционально связанную с тяжестью заболевания[33]. Анализ пролиферативного маркера Ki-67, согласно Красильниковой Л.В.(2017) обладает высокой прогностической ценностью при рецидивирующихэндометриоидных образованиях яичниках, что подтверждается в полученныхнами результатах иммуногистохимического фенотипирования.
Так, уровеньэкспрессии белка Ki-67 при рецидиве эндометриоза яичников характеризовалсяфлюктуацией значений и варьировал от 10% до 65% (25,83±3,95%). Привпервые выявленном эндометриозе показатели изменялись в пределах от 5% до30% (12,14±4,06%). Интерпретируя вышеизложенные показатели, для образцовтканей, полученных в ходе повторной монолатеральной энуклеации РЭОЯ,характерен более высокий (в 2,1 раза) пролиферативный потенциал в сравнениис гистологическим материалом впервые выявленных ЭОЯ, что свидетельствуето дисхронизме пролиферации в операционном материале сравниваемых групп.При персонализированном анализе обращает на себя внимание наличие168положительной тесной связи между выраженностью экспрессии Ki-67 иуровнем опухолеассоциированного антигена СА-125.Отдельногопролиферациирассмотрениязначенияпро-заслуживаютинарядуантиапоптотическихспоказателямифакторов.Средииндукторов апоптоза наиболее изучен в настоящее время белок p53, тесносвязанный с регуляцией транскрипции и роста клетки.
Снижение активностипроапоптотического маркера p53 опосредованно способствует индукциипролиферативного пула эндометриоидных гетеротопий [226]. Доказано, что вмеханизмызлокачественнойтрансформации,ассоциированнойсэндометриозом, вовлечен ген p53, мутации которого способствуют геномнойнеустойчивости и пролиферации опухолевых клеток. Согласно проведенномуранее исследованию Михалевой Л.М. и соавт. (2016),уровень экспрессии p53прямо пропорционально коррелировал со стадией эндометриоза [39].
Уровеньэкспрессии опухолесупрессирующего белка p53 имел контрастные значения:наиболее высокое в группе нерецидивирующего эндометриоза яичников – 25%,наименьшее – 5% - отмечено при рецидивировании ЭОЯ. Средние показателимаркера в I группе составили – 4,17±1,40%, во II – 19,29±1,84%. Таким образом,экспрессия проапоптотического белка p53 при рецидивировании эндометриозаяичников почти в 4 раза ниже таковой при впервые оперированномэндометриозе, что свидетельствует о низком уровне апоптоза клеток очаговэндометриоза яичников (p<0,05). Следовательно, наряду с повышениемпролиферативнойактивностиэндометриоидныхобразованийяичниковзначительно подавляются процессы апоптоза.Ключевой механизм апоптоза — регулирование распада ДНК с участиембелков семейства Bcl-2.
Гиперэкспрессия Bcl-2 несет антиапоптотическийпотенциал в клетке и защищает ее от гибели (апоптическая устойчивость).Аргументом в сторону изучения иммунореактивности Bcl-2 в эндометриоиднойткани является установленная прямая корреляционная связь c тяжестьюзаболевания по мнению ряда различных зарубежных исследований [84,232].Однако, мы не обнаружили данных о модификациях маркера в отношении169рецидивирующихэндометриоидныхобразованияхвзарубежныхиотечественных источниках, что вошло в задачи нашего исследования.При иммуногистохимической оценке отмечено накопление онкопротеинаBcl-2 как в эпителиальном, так и в стромальном компоненте.
Сравнительныйанализ экспрессии ингибитора апоптоза Bcl-2 показал, что уровень его выше вобразцах, исследуемых с рецидивирующими ЭОЯ – 59,09±5,09% в отличие отпациенток с впервые выявленным эндометриозом яичников - 42,86±6,44%(p=0,039). Обращает на себя внимание высокий уровень маркера Всl-2, чтопрепятствует восстановлению баланса в про- и антиапоптических сигнальныхпутях.Приэтомвгруппесрецидивирующимиэндометриоиднымиобразованиями экспрессия ингибитора апоптоза Bcl-2 (59,09±5,09%) превышаетв15разэкспрессиюиндуктораапоптозаp53(4,17±1,40%),p<0,05.Аналогичные данные продемонстрированы во II группе, однако показатель p53оказался выше в 2 раза в сравнении с Bcl-2 (42,86±6,44% vs 19,29±1,84%,p=0,068).
Исходя из полученных значений, иммунореактивность ингибитораапоптоза Bcl-2 статистически значимо больше, чем его индуктора p53, чтосвидетельствует о подавлении активности процессов апоптоза.Одним из перспективных направлений оценки инвазивного потенциалаявляется изучение взаимодействия клеток между собой и с внеклеточнымматриксом, которое регулируется молекулами межклеточной адгезии. Одной изотличительных свойств эндометриоидных гетеротопий является способность кпроникающему, инфильтративному росту в подлежащие ткани. Особыйинтерес сегодня представляет b-катенин, поскольку помимо влияния наадгезивные свойства клетки он активно участвует и в других процессах,включаяклеточныйциклипролиферацию.Ограниченноеколичествоисследований встретилось нам в ходе изучения литературных источников вотношении роли маркера в диссеминации эндометриоидной болезни [250].В ходе диссертационной работы исследование тканей эндометриозаяичников проводилось с использованием антител к онкобелку b-катенину —маркерумежклеточнойадгезии.Прииммуногистохимическом170фенотипированииматериаласантителамикобнаруженоb-катенинумембранное и диффузное цитоплазматическое окрашивание эпителиальногокомпонента.Нами получена разница экспрессии белка b-катенина в рецидивирующихи впервые диагностированных эндометриоидных образованиях яичников.Выявлена высокая экспрессия маркера межклеточной адгезии в I группепациенток – 51,67±4,14%, что превышает таковую во II группе - 38,57±4,82% (p= 0,039).
Данный факт свидетельствует об усилении процесса межклеточнойадгезии в рецидивирующих эндометриоидных кистах яичника по сравнению снерецидивирующимвариантом.Попыткаизученияb-катенинаприэндометриозе яичников ранее на нашей кафедре не продемонстрировалазависимости экспрессии маркера от стадии тяжести заболевания [39].Совокупность полученных данных позволила сделать заключение, что вслучаях рецидивирующих форм эндометриоза уровень b-катенина являетсявысоким при инициации заболевания и не зависит от тяжести заболевания.Нарушенная активацияWnt/b-катенина сигнального пути в регуляциипроцессов пролиферации и апоптоза способствует развитию эндометриоидныхгетеротопий посредством повышения клеточной инвазии и резистентности капоптозу, что приводит к развитию фиброза при эндометриозе.