Диссертация (1174301), страница 22
Текст из файла (страница 22)
Таким образом,расширение зоны экспрессии bcl-2 на все протяжение крипт в TSA фактическиэквивалентно экспрессии bcl-2 в базальных отделах и нижней половине крипт вCLA.Схожесть характера экспрессии bcl-2 в АТ, ATV и TSA при постепенномнарастании интенсивности окрашивания в ряду АТ–ATV–TSA позволяетвысказать предположение о биологической близости описанных образований исуществовании эволюции свойств в ряду АТ–ATV–TSA.Выявленное нами отсутствие ядерной экспрессии бета-катенина в НР и SSAописано в ряде исследований [67, 69, 94, 114], выявленная нами частота ядернойаккумуляции бета-катенина в TSA сопоставима с результатами Fu B.
ссоавторами [66], в АТ и ATV – c результатами Rubio C. A. с соавторами [154] иYamamoto T. с соавторами [198]. Несмотря на использование нами селективныхантител к С-концу молекулы бета-катенина, наши результаты сопоставимы срезультатами Li L. с соавторами лишь отчасти [114] – выявленная нами ядернаяэкспрессия в TSA и CLA встречается чаще, чем в указанной работе. Выявленная в214нашей работе частота выявления ядерной экспрессии в TSA достоверно ниже, чемв АТ и ATV; среднее число ядер, экспрессирующих бета-катенин, в TSAдостоверно ниже, чем в ATV, однако не отличается от АТ; особенностираспределения окрашенных ядер и интенсивность окрашивания не отличаютсямежду TSA, АТ и ATV.
С другими изученными работами отмечаютсязначительные расхождения, что может быть объяснено целым рядом факторов,включая отсутствие диагностических стандартов для различных типов зубчатыхобразований,молекулярно-генетическуюгетерогенностьпредопухолевыхобразований, малые размеры и другие особенности исследованных выборок.Однако, учитывая отсутствие столь выраженных противоречий при исследованииэкспрессии других маркеров, включенных в наше исследование, мы полагаем, чтоосновнойпричинойявляетсяприсутствиеодновременнонесколькихмолекулярных форм бета-катенина в клетках, причем, вероятно, какая именно измолекулярных форм выявляется в ходе иммуногистохимической реакцииопределяется не только специфичностью антитела к С- или N-концу молекулы[114], но и особенностями использованного протокола.
Тем не менее, полученныенами результаты оценки экспрессии бета-катенина свидетельствуют о возможноймалигнизации TSA через Wnt-сигнальный путь. Отсутствие ядерной экспрессиибета-катенина среди НР и SSA/Р свидетельствует о низкой вероятностималигнизации по каноническому Wnt-сигнальному пути, что однако не исключаетучастие белков-модуляторов Wnt-сигнального пути в качестве механизмазлокачественной трансформации.По совокупности полученных данных предопухолевые образования можнообъединить в две группы CSL и CLA+TSA.При анализе экспрессии CDX2 в предопухолевых образованиях толстойкишки нами был отмечен ряд закономерностей, сопоставимых с данными другихавторов. Нами не было выявлено ни одного случая нарушения экспрессии CDX2ни в CLA, ни в TSA, что свидетельствует в пользу сходных механизмов развитияCLA и TSA.
Сходные результаты были получены и другими авторами [52, 128,215194]. Нарушение экспрессии CDX2 в НР и SSA/P по нашим данным отмечается в42,9% и 46,7% соответственно, по данным Wu J. M. с соавторами [194] – в 47,4%НР и 45,5% SSA/P. Нарушение экспрессии проявлялось снижением как числаCDX2-позитивных ядер, так и интенсивности окрашивания. Аналогичные данныеполучены и другими авторами [52, 128, 194]. Более слабое окрашивание присохранениидиффузностиреакциипозволяетпредположить,чтопотеряэкспрессии CDX2 происходит после формирования НР или SSA/P, но до развитиязлокачественной опухоли.
В таком случае снижение интенсивности окрашиванияявляется отражением своеобразного «переходного» состояния. Потеря экспрессииCDX2 может быть морфологическим проявлением прекращения его работы вкачестве кишечного транскриптационного фактора и, как следствие, снижениеманти-митотической активности. С другой стороны, доказано влияние CDX2 наWnt-сигнальный путь посредством модулирования активности бета-катенина ивовлечения альтернативных механизмов активации генов, регулируемых Wntсигнальным путем [75]. В то же время, более слабая экспрессия CDX2 в части НРи SSA/Р может свидетельствовать о меньшей дифференцированности эпителия взубчатых образованиях по сравнению с TSA и интактной слизистой оболочкой,что также может рассматриваться как один из возможных механизмов развития. Влюбом случае, снижение экспрессии CDX2 может рассматриваться в качествеопределенного этапа реализации программы злокачественной трансформации.При сравнении НР и SSA/P нами не было отмечено достоверных различийни по одному из исследованных критериев (доля образований с нарушениемэкспрессии, характер экспрессии, среднее количество CDX2-позитивных клеток),как и другими авторами [52, 128].
Wu J. M. с соавторами отмечают, что среднееколичество CDX2-позитивных клеток в SSA/P достоверно ниже, чем в НР (30,0 ±16,5 и 52,5 ± 29,7 соответственно). По результатам нашей работы среднееколичество CDX2-позитивных клеток несколько выше в НР (83,9±7,2% для НР и66,0±18,4% для SSA/P), но разница не достигает уровня статистически значимой216(р>0,05).Тем не менее, в нашей работе отмечается тенденция к болеевыраженным нарушениям экспрессии CDX2 в SSA/P.Wu J. M. с соавторами отмечают, что в 10/12 CDX2-положительных SSA/Pокрашенные ядра располагались преимущественно в нижней половине крипт, а в10/10 CDX2-положительных НР - преимущественно в верхней половине крипт[194]. Описанное распределение, возможно, является аналогом отмеченного намиградиента. Поскольку CDX2 является маркером зрелых эпителиальных клеток, томожно предположить, что наличие восходящего градиента в НР являетсярезультатомнарушениядифференцировкиклетокврасширеннойпролиферативной зоне в НР.
В таком случае обнаружение градиента в НР можетбыть маркером самых ранних этапов процесса малигнизации НР. Припоследующеймиграциискомпрометированныхклетоквнаправленииповерхности образования формируется нисходящий градиент, описанный нами в1 НР и 3 SSA/P. Исходя из этого и отсутствия достоверной разницы в экспрессииCDX2 между НР и SSA/P, как в нашем исследовании, так и по данным другихавторов, можно предположить, что НР и SSA/P представляют собой этапыразвития одного образования, в котором происходит постепенное накопление«поломок» генетического аппарата.
Одним из биологических маркеров этогопроцесса, вероятно, является снижение и последующая потеря экспрессии CDX2.Вовлечен ли CDX2 непосредственно в процесс злокачественной трансформацииНР и SSA/P или является лишь маркером происходящих молекулярныхизменений, а также на каком этапе происходит нарушение экспрессии CDX2 внастоящее время остается не ясным.Нами не было выявлено ни одного случая отсутствия экспрессии СК20 ни вобразцах интактной слизистой оболочки, ни в исследованных предопухолевыхобразованиях. Наши данные сопоставимы с данными других авторов [26, 31, 53,103, 178, 181] и являются достаточно ожидаемыми, так как потеря экспрессииСК20 считается одним из поздних событий в процессе канцерогенеза [103].217По сравнению с ранее опубликованными исследованиями [26, 167, 178,181], в своей работе мы использовали более дифференцированную шкалу дляоценки распространенности зоны экспрессии СК20, а также оценивалиинтенсивностьреакции,чтопозволилоуточнитьрядбиологическихзакономерностей.Во всех исследованных группах предопухолевых образований зонаэкспрессии СК20 достоверно расширена по сравнению с интактной слизистойоболочкой.
Это может свидетельствовать об относительно большой доле зрелыхклетоквпредопухолевыхобразованиях.Присравненииразныхгрупппредопухолевых образований нами отмечено наибольшее расширение зоныэкспрессии СК20 в ATV и TSA (различия не достоверны), менее выраженное – вНР и SSA/P (различия отсутствуют), наименьшее расширение зоны экспрессииотмечается в АТ (достоверно отличается от всех остальных групп).Выявленный нами характер распределения СК20-позитивных клеток в НРсхож с результатами других авторов [26, 53, 167, 178, 181]. Несмотря навысказываемые в разных исследованиях предположения о диагностическойценности СК20 для решения вопроса о принадлежности образования к НР илиSSA/P [26, 167, 181], по результатам нашего характер распределения позитивныхклеток в НР и SSA/P достоверно не отличался.
Отсутствие достоверных различиймежду НР и SSA/P по характеру распределения клеток и по интенсивностиокрашивания свидетельствует об участии сходных процессов в развитии НР иSSA/P и их биологическом сродстве. Интенсивность окрашивания, на наш взгляд,отражает степень дифференцированности колоноцитов. Во всех группахпредопухолевых образований интенсивность окрашивания ниже, чем в интактнойслизистой оболочке, что свидетельствует о локальном нарушении созреванияколоноцитов. Различия в интенсивности реакции между НР, SSA/P, TSA и ATVне достигают уровня статистически значимых, достоверно менее выраженнаяинтенсивность реакции отмечена в АТ. На наш взгляд, это может быть связано спроцессом накопления «дозревающих» эпителиоцитов в процессе разрастания218ткани аденомы.
Этим же можно объяснить и наименьшее из всех группрасширение зоны экспрессии СК20 в АТ.Локализация маркера Ki67 достоверно различалась между CSL и CLA – вНР и SSA/P Ki67-позитивные клетки локализованы в нижней половине крипт, ATи ATV – преимущественно в верхней половине или на всем протяжении крипт.Отделы с более высокой пролиферативной активностью с большей вероятностьюстанут источником развития опухоли.Отсутствие достоверных различий по числу Ki67-позитивных клеток междуНР и нерасширенными криптами SSA/P свидетельствует о биологическойсхожести НР и SSA/P.
Отмеченное нами в 67,9% SSA/P отсутствие Ki67позитивных клеток в расширенных базальных отделах «диагностических» криптвпервые описано Torlakovic E. E. с соавторами [181]. В сочетании с выраженнымснижением пролиферативной активности в расширенных криптах SSA/P посравнению с нерасширенными криптами и НР, это позволяет предположить, чтоналичие расширения и/или ветвления в базальных отделах крипт связано не смиграцией пролиферативной зоны и нарушением процесса апоптоза, а сизменением клеточного состава базальных отделов крипт, что неизменно влечетза собой нарушение эпителиально-мезенхимальных взаимодействий и, какследствие, архитектуры базальных отделов крипт.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
