Диссертация (1174248), страница 16
Текст из файла (страница 16)
мтДНК», значениямедиан которых у пациенток с преэклампсией были существенно выше, чем вгруппе здоровых беременных.88Примечание: Клеточную ДНК выделяли из клеток крови, вкДНК выделяли из образцов плазмыбеременных; вкДНК – внеклеточная ДНК; вк мтДНК – митохондриальная ДНК в составевкДНК; мтДНК – митохондриальная ДНК в составе клеточной ДНКРисунок 15 – Характеристики клеточной и внеклеточной ДНК у пациенток спреэклампсией и у здоровых беременныхИсследование количества митохондриальных повторов в составе клеточнойДНК (выделена из клеток крови – лейкоцитов) не выявило статистическизначимых различий между группой пациенток с преэклампсией и группой снормально протекающей беременностью.
В группе пациенток с преэклампсиейбыли также зарегистрированы значительные изменения концентрации и состававкДНК по сравнению с группой здоровых. У пациенток с преэклампсиейконцентрация вкДНК варьировала от 67,0 до 11579,3 нг/мл (медиана 589,3 нг/мл;р = 0,001). В соответствии с повышением общего уровня вкДНК в кровотоке, упациентокповышениеспреэклампсиейактивностибылоДНКазыIобнаруженовобразцахстатистическиплазмы.Призначимоеусловнофизиологической беременности (здоровые беременные) активность ДНКазы I89варьировала от 0,8 до 14,8 ед./мл (медиана 4 ед./мл), а при беременности,осложненной преэклампсией ‒ от 3,7 до 52,4 ед./мл (медиана 12,6 ед./мл;р = 0,0301).Кроме того, у пациенток с преэклампсией было выявлено повышенноесодержание мтДНК повторов в составе вкДНК. Так, значения медиан количестваповторов мтДНК в группе с преэклампсией составили, соответственно, 394,0 у.е.против 96,7 у.е.
в группе здоровых (оба р < 0,0001). Аналогичные данные былиполучены для интегративных показателей «вк мтДНК /клет. мтДНК», значениямедиан которых у пациенток с преэклампсией составляли, соответственно, 2,41против 0,38 в группе пациенток с не осложненной беременностью (оба р < 0,0001)и свидетельствовали, по крайней мере, о повреждении нейтрофильныхлейкоцитов.На Рисунках 16–18 представлены результаты исследования корреляционнойзависимости между характеристиками вкДНК и клиническими параметрами.Срок гестацииСт. гипотр.Вес плодаБелок в мочеОтеки степеньДАДСАДВозраст-0,8-0,6-0,4Преэклампсия-0,20Условно здоровые0,20,40,6Все беременныеРисунок 16– Корреляция Спирмена (Spearman Correlation) между клиническимипоказателями и концентрацией вкДНК90Как видно из данных, приведенных на Рисунке 16, в группе пациенток спреэклампсией была выявлена умеренно выраженная, но статистически значимая,положительная корреляционная связь между концентрацией вкДНК и уровнембелка в моче (R = 0,33; p = 0,023), степенью отеков (R = 0,30; p = 0,034) и ЗРПR = 0,42; p = 0,002).
Кроме того, у пациенток с преэклампсией была обнаруженавыраженная отрицательная корреляция между концентрацией вкДНК и весомплода (R = -0,56; p = 0,003).Как видно из данных, приведенных на Рисунке 17, в общей группебеременных пациенток с осложненной и не осложненной беременностью былавыявлена статистически значимая, положительная корреляционная связь междусодержанием вк мтДНК в плазме и показателями САД и ДАД, степенью отеков,уровнем белка в моче, ЗРП.
Кроме того, в группе из всех обследованных былаобнаружена отрицательная корреляционная связь между содержанием вк мтДНКв плазме и весом плода, а также между содержанием вк мтДНК в плазме и срокомгестации. Статистически значимая корреляционная связь между уровнем вкмтДНК в плазме и концентрацией белка в моче была выявлена в группепациенток с преэклампсией.Срок гестацииСт. гипотр.Вес плодаБелок в мочеОтеки степеньДАДСАДВозраст-0,6-0,4-0,2Преэклампсия00,2Условно здоровые0,4Все беременные0,60,8Рисунок 17– Корреляция Спирмена между клиническими показателями исодержанием мтДНК в образцах вкДНК91У беременных с нормально протекающей беременностью содержание вкмтДНК в плазме и клинические параметры слабо коррелировали между собой.У всех в общей массе беременных была также выявлена выраженнаястатистическизначимаяположительнаякорреляционнаясвязьмеждуинтегративным показателем «вк мтДНК / клет.
мтДНК» и значениями САД иДАД, степенью отеков, уровнем белка в моче и степенью ЗРП. Одновременно,статистически значимая отрицательная корреляционная связь (Рисунок 19) былаобнаружена между интегративным показателем «вк мтДНК / клет. мтДНК» ивесом плода (R = -0,40; p = 0.005), а также между показателем «вк мтДНК / клет.мтДНК» и сроком гестации (R = -0,49; p < 0,001).
У беременных с преэклампсиейпоказатель «вк мтДНК/ клет. мтДНК» и клинические параметры слабокоррелировали между собой.Срок гестацииСт. гипотр.Вес плодаБелок в мочеОтеки степеньДАДСАДВозраст-0,6-0,4-0,2Преэклампсия00,2Условно здоровые0,40,60,8Все беременныеРисунок 18– Корреляция Спирмена (Spearman Correlation) между клиническимипоказателями и интегративным показателем «вк мтДНК / клет. мтДНК»Полученныерезультатыпоказывают,чтоприпреэклампсии,сопровождающейся повышением артериального давления, отеками происходитповышение концентрации вкДНК и изменение ее характеристик, в частности92повышаетсяколичествомитохондриальныхкопийвсоставевкДНКисущественно возрастают значения интегративных показателей «вк мтДНК/ клет.мтДНК», что свидетельствует о повреждении митохондрий и выходе продуктових деградации в периферическое русло.
Концентрация вкДНК, содержаниемитохондриальных фрагментов в ее составе, а также интегральный показательвысококоррелировалисклиническимипараметрами,характеризующимисостояние плода и матери.120%100%80%60%40%20%0%Условно здоровыеУмеренная преэклампсия0-500500-1000Тяжелая преэклампсия1000+120%100%80%60%40%20%0%Условно здоровыеУмеренная преэклампсия0-500500-1000Тяжелая преэклампсия1000+Рисунок 19 – Результаты частотного анализа исследуемых показателей погруппам наблюдений (концентрация вкДНК, нг/мл)93Проведенный частотный анализ (Рисунок 19) выявил значительныеколебания изучаемых показателей, однако в большинстве наблюдениях убеременных с преэклампсией они отличались от небеременных и здоровых.При индивидуальном анализе наших наблюдений у беременных спреэклампсией клиническая картина заболевания не всегда совпадала срезультатамиисследованиявкДНК.Так,приумереннойПЭипочтифизиологических колебаниях вкДНК (от 67 до 500 нг/мл) САД и ДАД превышалинормативные показатели у 14 из 22, уровень белка в моче у 13 из 22, отеки у 16 из22, задержка роста плода зарегистрирована у 4 из 22 беременных.
При колебанияхвкДНК от 500 до 1000 нг/мл САД и ДАД превышали физиологические параметрыу 6 из 13, белок в моче у 6 из 13, умеренные отеки наблюдались у 6 из 13,головная боль – у 5 из 13, ЗРП у 2 из 13 пациентов.При тяжелой преэклампсии у 9 из 22 беременных концентрация вкДНКбыла от 589 до 1000 нг/мл, у остальных 13 превышала эту величину. У пациенток,имеющих в крови концентрацию вкДНК до 1000 нг/мл САД и ДАД превышалифизиологические параметры в 4 из 9, белок в моче – в 6 из 9, выраженные отеки –в 8 из 9, головная боль – в 3 из 9, ЗРП в 1 из 9 наблюдений. При концентрацияхвкДНК в крови беременных выше 1000 нг/мл САД и ДАД превышалифизиологические показатели в 10 из 13, белок в моче – в 10 из 13, выраженныеотеки в 11 из 13, головная боль – в 6 из 13, ЗРП – в 6 из 13 наблюдений.Полученные результаты вкДНК и клинические характеристики пациентовсвидетельствуют либо о гипердиагностике преэклампсии, либо о неизвестных ещекомпенсаторных возможностях у части наших беременных.В современной медицине хорошим тестом (маркером) является таковой,когда при сравнении 2 групп он не встречается в группе сравнения примерно в70%.
В наших исследованиях практически по всем параметрам таких наблюденийбыло большинство при сравнении с группой здоровых и беременных с умереннойпреэклампсиейпреэклампсией.иприсравнениипациентоксумереннойитяжелой94Следует отметить, что у пациенток в 23% при умеренной и в 36% притяжелой преэклампсии новорожденные родились с ЗРП различной степенитяжести. Тяжесть ЗРП при умеренной форме ПЭ в 4 наблюдениях составила 1-яст., в 3 – 2-я ст., в 1 – 3-я ст. При тяжелой форме ПЭ наблюдалось болеевыраженное внутриутробное страдание плодов: 1-я ст. ЗРП зарегистрирована у 2,2-я ст.
– у 5, 3-я ст. – у 1 из родильниц. При этом в крови пациенток с умереннойПЭ в 4 из 8 наблюдений концентрация вкДНК колебалась от 611 до 946 нг/мл,нуклеазная активность от 11,1 до 21,6 ед./мл, а количество повторов мтДНК всоставе вкДНК уже в 5 из 8 наблюдений превышало физиологическое значение иколебалось 370 до 1169. При тяжелой ПЭ в крови этих беременных вкДНКпревышала 1000 нг/мл, нуклеазная активность колебалась в 6 наблюдениях от 9,5до 19,9 ед./мл, а количество копий мтДНК в составе вкДНК уже в 7 из 8наблюдений превышало физиологические значения, колеблясь 257 до 1342 копий.Клеточная мтДНК в составе вкДНК при этом существенно не менялась.Следовательно, изменения, обнаруженные нами при исследовании вкДНК еесостав и нуклеазная активность, в большей мере были связаны тяжестью ПЭ, чемвыраженностью ЗРП.Индивидуальный анализ тяжелых форм преэклампсии показал, что прикритических формах происходили самые выраженные изменения вкДНК и еехарактеристик.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
