Диссертация (1174199), страница 43
Текст из файла (страница 43)
Изначально происходит распознавание и конкурентное связывание с белками, имеющими отношение к системе врожденного иммунитета: с BPI, способного подавлять биологическую активность ЛПС, или с LBP, осуществляющего совместно с молекулами sCD14 перенос ЛПС на клеточные мембраны для последующей индукции медиаторного каскада [8,10,57,123,244,357,403]. Активация специфической антиэндотоксиновой защиты проявляется усилением продукции IgG кcore-региону ЛПС, ответственных за нейтрализацию ЛПС [110].В нашем исследовании установлено, что вторая половина нормальнойбеременности сопровождалась снижением в 1,6 раза уровня системной эндотоксинемии по сравнению с небеременными (0,34 (0,01-0,62) и 0,54 (0,090,81) EU/ мл; p<0,001), что можно объяснить интенсивным связыванием ЛПСспецифическими белками крови для нейтрализации их биологической активности с целью предотвращения негативного воздействия на плод и материнский организм.
В динамике второй половины физиологической гестациинаблюдали постепенное падение плазменной концентрации ЛПС, что подтверждалось наличием обратной корреляционной связи между сроком гестации и уровнем ЛПС (r=-0,3; p<0,01). Надо отметить, что похожие тенденциик снижению плазменного уровня ЛПС регистрировали при развитии «больших акушерских синдромов». Не исключено, что уменьшение выхода ЛПС всистемный кровоток в поздние сроки гестации может означать их перераспределение в организме беременной с преимущественной кумуляцией награнице раздела «мать-плод» для подготовки к родовой деятельности.Установлено, что для беременных, в отличие от женщин вне гестации,характерна активация факторов антиэндотоксиновой защиты, имеющих отношение к системе неадаптивного и адаптивного иммунитета, что, предположительно, является филогенетически223сформированным механизмом,направленным на связывание свободных ЛПС. Показано, что гестационныйпроцесс ассоциировался с повышением продукции LBP на 17% по сравнениюс небеременными (p<0,001).
Важно отметить, что в противоположность снижению системной эндотоксинемии по мере увеличения гестационного срока,активность синтеза острофазного белка LBP постепенно нарастала к родам,что подтверждалось наличием положительной корреляции между концентрацией LBP и сроком гестации (r=0,4; p<0,001). Кроме того, отмечено с увеличение титров специфических антиэндотоксиновых антител во второй половине беременности на 23% относительно небеременных (p<0,01). При этомпри нормальном течении гестационного процесса было зарегистрированоувеличение титров общих IgG и IgM на фоне снижения IgA в системном кровотоке по сравнению с их уровнем вне беременности.
«Медиаторные каскады» во второй половине физиологической гестации характеризовались повышением выработки СРБ и сдвигом соотношений оппозиционных пулов вразличных направлениях, часть из которых обеспечивала подготовку организма матери и плода к родам, а другие регулировали развитие избыточнойвоспалительной реакции и предотвращали массивное попадание ЛПС в системный кровоток.
При нормальной беременности регистрировали увеличение уровней провоспалительных IL-2 (p<0,01), IL-6 (p<0,05) и снижениепротивовоспалительного IL-10 (p<0,05), а также подавление синтеза Th1цитокина TNF-α (p<0,01).Патологическое течение второй половины беременности сопровождалось 25-кратным нарастанием относительно физиологических значенийуровня эндотоксинемии до 8,4 (2,2-10,1) EU/мл (p<0,001), 2,6-кратным увеличением sСD14 до 6,5 (4,3-7,2) мкг/мл (p<0,05), 1,6-кратным - BPI до 102(48-132) нг/мл (p<0,001) и 1,6-кратным - титров IgG к core-региону ЛПС до100 (48-152) MU/мл (p<0,001), что является прямым доказательством участияГр- бактерий в патогенезе «больших акушерских синдромов» и основаниемдля рассмотрения ЛПС в качестве универсальных лабораторных «биомаркеров» поздних осложнений гестации.
При патологическом течении второй по224ловины беременности не отмечали подъема уровней острофазных протеиновLBP [244,358] и СРБ, относящихся к позитивным белкам острой фазы печени, неспецифично реагирующим на любые неблагоприятные факторы(стресс, травма, инфекция, ожог и др.) и нормализующихся в течение 14-21дня после окончания воздействия [17].Изменения концентраций оппозиционных пулов цитокинов при патологическом течении второй половины гестации не полностью соответствовали «Th1/Th2» парадигме. В основной группе регистрировали нарастаниеуровней IL-1β в 6 раз (p<0,01), IL-2 - в 2 раза (p<0,05), IL-8 - в 8 раз (p<0,05),TNF-α - в 1,8 раз (p<0,05) и IL-10 - в 3 раза (p<0,01), а также подавление синтеза IFN-γ в 2,4 раза (p<0,05) в плазме по сравнению с показателями контрольной группы.
Выявленная тенденция к снижению уровня цитокина IL-4(p=0,06) у женщин основной группы, в определенной степени, согласоваласьс классическими представлениями об иммунологии осложненного гестационного процесса [115,369].Различия в индивидуальной реактивности организма, дозозависимостьэффектов ЛПС, а также многоэтапность развития «медиаторного каскада»[35,57], предшествующего клинической манифестации осложнений беременности, ограничивали возможность установления сильных корреляций междуконцентрациями ЛПС и антиэндотоксиновых факторов. Не обнаружено прямой корреляционной зависимости между уровнем ЛПС и активностью антиэндотоксиновых факторов врожденного иммунитета (sCD14; LBP и BPI).
Темне менее, удалось выявить слабую отрицательную корреляцию между плазменной концентрацией ЛПС и титрами IgG к core-региону ЛПС (r=-0,3;p<0,05), которая, с одной стороны, может указывать на уменьшение системной гемоциркуляции свободных ЛПС, за счет их связывания со специфическими IgG к core-региону ЛПС. С другой стороны, учитывая отсутствие возможности установить точное направление причинно-следственной связимежду обозначенными лабораторными параметрами, не исключается первичное подавление антиэндотоксиновых протективных механизмов, повы225шающее восприимчивость организма беременной к «эндотоксиновой атаке».Несмотря на отсутствие «отклика» показателя LBP в ответ на нарастаниеуровня ЛПС, выявленная средняя по силе положительная корреляция междуLBP и IgG к core-региону ЛПС (rs=0,4; p<0,05) свидетельствует о параллельной активации адаптивных и неадаптивных антиэндотоксиновых факторовиммунитета в ответ на повышение «эндотоксиновой нагрузки».Анализ корреляционных зависимостей между ЛПС, sСD14, BPI, LBP,IgG к core-региону ЛПС, общими иммуноглобулинами и цитокинами различной функциональной направленности показал наличие прямой корреляционной связи между ЛПС и IL-1β (rs=0,4; p<0,001), что соответствует представлениям о последовательности формирования ЛПС-индуцированных медиаторных каскадов через стимуляцию продукции IL-1β и служит подтверждением «эндотоксинового происхождения» провоспалительного цитокиновогопула при осложненной гестации.
Сильная прямая корреляционная взаимосвязь, выявленная между IgG к core-региону ЛПС и IL-2, позволяет сделатьпредположение об участии IL-2 в индукции синтеза антиэндотоксиновых антител В-лифмоцитами (rs=0,8; p<0,01). IgG к core-региону ЛПС обратно связаны c IL-6, который, по всей видимости, участвует в подавлении их синтеза(rs=-0,3; p<0,05). Для sCD14 установлено наличие умеренной по силе положительной корреляции с цитокином IFN-γ (rs=0,6; p<0,01) и отрицательной с IL-4 (rs=-0,4; p<0,05), что подтверждает роль молекулы sCD14 в развитиипровоспалительных реакций.
Обнаружение обратной корреляции между BPIи IL-1β (rs=-0,4; p<0,05) объясняется способностью BPI, выполняющего протективную роль за счет блокирования ЛПС-индуцированных цитокиновыхкаскадов, препятствовать повышению концентрации основного провоспалительного цитокина IL-1β, способного нарушить течение гестации [145,206],Обнаружение положительных корреляций между BPI и IL-6 (rs=0,4; p<0,05) иIL-8 (rs=0,5; p<0,01) и IL-10 (rs=0,3; p<0,05) может указывать на усилениесинтеза BPI при длительной стимуляции цитокинами.226Наличие корреляционных взаимосвязей между уровнем эндотоксинемии, антиэндотоксиновыми иммунными факторами и общеклиническими параметрами, характеризующими состояние гомеостаза, позволяют предположить ЛПС-ассоциированную природу изменений большинства лабораторныхпоказателей у беременных с поздними акушерскими осложнениями.
Корреляционный анализ обнаружил слабые положительные взаимосвязи междуЛПС и эритроцитами (rs=0,3; p<0,01), ЛПС и тромбоцитами (rs=0,4; p<0,001),что объясняется способностью эндотоксинов к цитокин-опосредованнойстимуляции гемопоэза. Корреляция между ЛПС и глюкозой (rs=0,3; p<0,05),вероятно, обусловлена свойством ЛПС к нарушению толерантности к глюкозе и формированию инсулинорезистентности с гипергликемией [265].Активация синтеза белка в печени провоспалительными цитокинамиIL-1β и IL-6 приводит к массивной продукции различных белковых фракций(глобулинов, белков острой фазы, системы комплемента и др.) [45,202], чтоспособствует ускорению СОЭ [17], со значением которой уровень ЛПС связан слабой, но статистически достоверной связью (rs=0,3; p<0,05).
Усилениевыработки фибриногена может быть проявлением острофазовой реакции печени на внедрение ЛПС [45,78], а также активацией внутрисосудистого свертывания вследствие массивного повреждения эндотелия [46,90].Обнаруженная умеренная положительная взаимосвязь между BPI иобщим белком (rs=0,5; p<0,01) обусловлена однонаправленной активациейразличных иммунных факторов белковой природы и антиэндотоксиновыхзащитных механизмов в ответ на внедрение ЛПС. Не исключено, что наличиесильной обратной взаимосвязи BPI с уровнем АСТ (rs=-0,73; p<0,01) свидетельствует об ослаблении цитолиза гепатоцитов при усилении протективныхантиэндотоксиновых реакций, в основе которых лежит нейтрализация ЛПСпутем связывания с BPI.
Выявлено наличие обратных корреляций между IgGк core-региону ЛПС и активностью печеночных трансаминаз АСТ (rs =-0,6;p<0,001) и АЛТ (rs=-0,8; p<0,001). Можно предположить, что отсутствие эффективной защиты от «эндотоксиновых атак» вследствие недостаточного со227держания антиэндотоксиновых антител позволит ЛПС беспрепятственно повреждать клеточные мембраны, сосудистый эндотелий, повышать проницаемость капилляров, что закономерно приведет к перераспределению жидкостив ткани, снижению гематокрита, относительному повышению эритроцитов игемоглобина.
Вероятно, указанным вполне возможно объяснить наличиеумеренной по силе обратной взаимосвязи между концентрацией IgG к coreрегиону ЛПС и уровнями эритроцитов (rs =-0,5; p<0,001), ЛПС и гемоглобина (rs =-0,4; р<0,01), ЛПС и гематокрита (rs =-0,4; р<0,01).Содержание общих IgA, IgG и IgM в плазме крови сопоставимо при патологическом и нормальном течении гестации (p>0,05 - для всех).Оценка уровня системной эндотоксинемии, характера липополисахарид-индуцированных цитокиновых каскадов, активности антиэндотоксинового иммунного ответа при ПР, ПЭ и СЗРП позволила установить степеньучастия ЛПС в патогенезе каждого из «больших акушерских синдромов».Межгрупповыеотличия,подтвержденныекритериемКраскела-Уоллеса, установлены для плазменной концентрации ЛПС (Hk (2;142)=8,9;p<0,05), максимальный 28-кратный подъем которой был характерен для беременных с ПР (p<0,001), минимальный 9-кратный – для обследуемых с ПЭ(p<0,001) по сравнению с установленными физиологическими значениямипоказателя.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
