Диссертация (1154712), страница 9
Текст из файла (страница 9)
Подобная тенденция отмечена и в гранулемах вокругнитей ТПП эндопротеза, где количество пролиферирующих клеток снижаетсяс 33,6+3,1% до 26,9+3,6% (р<0,05). Таким образом, более выраженноеснижение пролиферативной активности отмечено в гранулемах вокруг нитейПП эндопротеза (табл. 3).АБРис. 4.
Сетчатый эндопротез, 30-е сутки после имплантации: А- ПП эндопротез, Б – ТППэндопротез. ИГХ реакция с антителами к белку Ki-67. Окраска ДАБ-гематоксилин Майера (х400).Н-нить сетчатого эндопротеза; П – ядра пролиферирующих клеток.На 90 сутки после имплантации эндопротезов достоверных различий вколичестве пролиферирующих клеток в гранулемах вокруг нитей ППэндопротеза (11,38+2,53%) и ТПП эндопротеза (11,85+5,40%) выявлено небыло (р>0,05) (табл.3; рис.5А,Б). Таким образом, следует отметитьпостепенное снижение пролиферативной активности клеток в зоне контактанитей ПП и ТПП эндопротезов с окружающими тканями на протяжении всегосрока наблюдения от 7 до 90 суток.50АБРис. 5.
Сетчатый эндопротез, 90-е сутки после имплантации: А- ПП эндопротез, Б – ТППэндопротез. ИГХ реакция с антителами к белку Ki-67. Окраска ДАБ-гематоксилин Майера (х400).Н-нить сетчатого эндопротеза; П – ядра пролиферирующих клеток.Таблица 3Пролиферативная активность клеток в гранулемах вокруг нитей сетчатыхэндопротезовСуткинаблюдения7309073090Материал эндопротезаПолипропиленТитанизированныйполипропиленПролиферативная активность%29,1+5,7%*15,9+4,3%*11,38+2,53%**33,6+3,1%*26,9+3,6%*11,85+5,40%**Примечание: * - р<0,05, ** - р>0,05Какпоказалинашиисследования,внезависимостиотимплантируемого в ткани эндопротеза определяется однотипная динамикапролиферативной активности клеток, характеризующаяся высокой степеньюна ранних сроках наблюдения, и постепенно снижающаяся к 90 суткам(рис.6).
Однако, на ранних сроках наблюдения в гранулемах вокруг нитейПП эндопротезов пролиферативная активность клеток достоверно ниже, посравнению с гранулемами вокруг нитей ТПП эндопротезов.51Количествопролиферирующих клеток %40353025201510507суток30сутокППэндопротез90сутокТППэндопротезРис. 6. Изменение пролиферативной активности клеток в гранулемах вокруг нитейсетчатых эндопротезов.Какпоказалиспециальныеморфологическиеисследования,наблюдаемые различия в пролиферативной активности клеток оказываютвлияние на формирование соединительнотканных волокон вокруг нитейсетчатых эндопротезов.Наличие коллагеновых волокон в гранулемах вокруг нитей сетчатыхэндопротезов в различные сроки после их имплантации определяли припомощи световой микроскопии гистологических препаратов, окрашенныхSirius red.
Для количественной оценки коллагеновых волокон срезы,окрашенные Sirius red, изучали при помощи поляризационной микроскопии.На 7 –е сутки после имплантации в гранулемах, окружающих нити какПП (рис. 7А), так и ТПП эндопротезов (рис.7Б) в области контакта нитей сокружающими тканями определялись единичные коллагеновые волокна.Зрелые коллагеновые волокна I типа, окрашенные темно-красным ижелтымцветами,располагаютсяпреимущественновнегранулем,окружающих нити эндопротезов.
В гранулемах вокруг нитей эндопротезовотмеченонезначительноеокрашиваниезеленоватымцветом,чтосвидетельствует о начале формирования незрелых коллагеновых волокон IIIтипа. Окраска коллагеновых волокон в темно-красный и желтый цвета,которая соответствует зрелым коллагеновым волокнам I-типа, наблюдается52редко (рис.8А,Б).Соотношение коллагеновых волокон I и III типов в гранулемах вокругнитей эндопротезов составило для ПП эндопротеза 1.085+0.022. Приимплантации ТПП эндопротеза это соотношение было достоверно выше 1.107+0.013 (p<0.05) (табл.4).АБРис. 7.
Сетчатый эндопротез, 7-е сутки после имплантации: А- ПП эндопротез, Б – ТППэндопротез. Световая микроскопия срезов, окрашенных Sirius red (х400). Н-нить сетчатогоэндопротеза; К – коллагеновые волокна.АБРис. 8. Сетчатый эндопротез, 7-е сутки после имплантации: А- ПП эндопротез, Б – ТППэндопротез. Поляризационная микроскопия срезов, окрашенных Sirius red (х400). Н-нитьсетчатого эндопротеза; КI – коллагеновые волокна I типа; KIII – коллагеновые волокна III типа.53На 30-е сутки после имплантации в гранулемах вокруг нитей как ПП(рис 9А), так и ТПП (рис.9Б)сетчатых эндопротезов четко выявляютсяколлагеновые волокна. В гранулемах вокруг нитей ПП эндопротезаколлагеновые волокна окрашены преимущественно в зеленый цвет, чтосвидетельствует о формирования незрелого коллагена III- типа (рис.10А).
Вгранулемах вокруг нитей сетчатого ТПП эндопротеза коллагеновые волокнаокрашены преимущественно в темно – красный и желтый цвета, чтосвидетельствует о формировании зрелого коллагена I-типа (рис.10Б).Соотношение коллагенов I-го и III-го типа в гранулемах вокруг нитейПП эндопротеза составило 1,174+0,036, а ТПП эндопротеза - 1,246+0,102, чтодостоверно выше, по сравнению с ПП эндопротезом (р<0.05) (табл. 4).АБРис.
9. Сетчатый эндопротез, 30-е сутки после имплантации: А- ПП эндопротез, Б – ТППэндопротез. Световая микроскопия срезов, окрашенных Sirius red (х400). Н-нить сетчатогоэндопротеза. К – коллагеновые волокна.На 90-е сутки после имплантации в гранулемах вокруг нитей как ПП(рис.11А), так и ТПП (рис.11Б) эндопротезов выявляются коллагеновыеволокна.54АБРис. 10. Сетчатый эндопротез, 30-е сутки после имплантации: А- ПП эндопротез, Б – ТППэндопротез. Поляризационная микроскопия срезов, окрашенных Sirius red (х400).
Н-нитьсетчатого эндопротеза; КI – коллагеновые волокна I типа; KIII – коллагеновые волокна III типа.При этом определяются волокна как незрелого коллагена IIIтипа,окрашенные зеленым цветом, так и волокна зрелого коллагена I типа, темнокрасной и желтой окраски (рис.12А,Б). Соотношение коллагенов I и III типа вгранулемах составило для ПП сетчатых эндопротезов 1,38 +0,07, для ТППсетчатых эндопротезов оно было достоверно выше – 1,48 +0,112 (р<0,05)(табл.4).Таким образом, на протяжении всего срока наблюдения ( с 7 по 90 сутки)в гранулемах вокруг нитей как ПП, так и ТПП эндопротезов соотношениеколлагенов достоверно изменяется в сторону увеличения количества зрелогоколлагена I-типа (табл.4; рис.13).55АБРис.
11. Сетчатый эндопротез, 90- е сутки после имплантации: А- ПП эндопротез, Б – ТППэндопротез. Световая микроскопия срезов, окрашенных Sirius red (х400). Н-нить сетчатогоэндопротеза. К – коллагеновые волокна.АБРис. 12. Сетчатый эндопротез, 90-е сутки после имплантации: А- ПП эндопротез, Б – ТППэндопротез. Поляризационная микроскопия срезов, окрашенных Sirius red (х400).
Н-нитьсетчатого эндопротеза; КI – коллагеновые волокна I типа; KIII – коллагеновые волокна III типа.56Таблица 4Соотношение коллагенов I/III (М+м) в гранулемах вокрух нитей сетчатыхэндопротезовМатериал эндопротезаСутки наблюденияСоотношение коллагенов I/III73090730901.085+0.022*1,174+0,036*1,38 +0,07*1,107+0.013*1,246+0,102*1,48 +0,112*ПолипропиленТитанизированныйполипропиленПримечание: * - р<0,05Соотнощение коллагеновI/III1,61,51,41,31,21,117суток30сутокППэндопротез90сутокТППэндопротезРис.13 Динамика соотношения коллагенов I/III в гранулемах вокруг нитей сетчатых эндопротезовКакпоказалинашиисследования,различнаяпролиферативнаяактивность клеток в области контакта нитей сетчатых эндопротезов с тканямивлияет на процессысинтеза соединительной ткани и, как следствие,образование из нее соединительнотканной капсулы вокруг нитей сетчатыхэндопротезов.
Так, в гранулемах с невысокой пролиферативной активностьюклеток вокруг нитей ПП эндопротезов соотношение коллагена I и III типовниже, чем в гранулемах с более высокой пролиферативной активностью57клеток вокруг нитей ТПП эндопротезов на всех сроках наблюдения. Исходя изэтого,можнозаключить,чтоТППэндопротезобладаетлучшейбиосовместимостью по сравнению с ПП эндопротезом, что проявляется вболее эффективной его интеграции в мягкие ткани за счет ускорения синтезаи более высокого содержания зрелого коллагена I типа. В результате приимплантации ТПП эндопротеза происходит формирование более прочнойсоединительнотканной капсулы вокруг нитей сетчатого эндопротеза, асоответственно и рубца в зоне его имплантации, что, как следствие, можетповышать эффективность пластики грыжевых ворот.3.1.2 Влияние на протективную активность В-системы иммунитетаРазвитие реакции тканей на инородное тело после имплантациисетчатых эндопротезов сопровождается комплексной реакцией организма,проявляющейся активацией, пролиферацией и дифференцировкой Влимфоцитов и синтезом антител.
Изучение изменений протективнойактивности В-системы иммунитета в ответ на имплантацию сетчатыхэндопротезов дает возможность оценить их биосовместимость на уровнегуморального звена иммунитета.После имплантации сетчатых эндопротезов в мягкие ткани приисследовании сывороток крови животных было выявлено изменение титраиммуноглобулинов G (IgG), высокоавидных (ВААТ) и низкоавидных (НААТ)антител и их соотношения на протяжении всего срока наблюдения от 7 до 90суток.При этом в обеих группах животных, которым производиласьимплантация ПП и ТПП эндопротезов, до операции определялисьсопоставимые титры иммуноглобулинов G (IgG) с преобладанием секрециивысокоавидныхантител(ВААТ)(75-85.5%отобщеготитра),наднизкоавидными антителами (НААТ) (табл.
5 и табл. 6). Полученные данныесвидетельствуют об отсутствии у этих животных супрессии протективнойактивности В-системы иммунитета, вторичных нарушений иммунной58системы и расстройств механизмов иммунобиологического контроля,обеспечивающих в норме эффективный иммунный ответ (рис.14).14Титр IgG в у.е.121086420ППэндопротезВысокоавидныеантителаТППэндопротезНизкоавидныеантителаРис. 14.
Титр IgG до операцииТаблица 5Изменение титра IgG в сыворотке крови в динамикеЭндопротезППТППКонтрольСредние значения титров IgG в у.е. (М±м)IgGСуммаВысокоавидныеНизкоавидныедо(n=20)10,4±1,8**7,8±1,6**2,6±0,9**СуммаВысокоавидныеНизкоавидныедо(n=20)12,0±1,9**9,9±1,1**2,1±0,7**Суммадо(n=10)11±0,8ВысокоавидныеНизкоавидные8,6±0,52,4±0,3Сутки наблюдения71430(n=20)(n=15)(n=10)51,2±2,2* 116,2±3,3* 64±3,2*11,2±0,7* 17,0±2,1** 8,8±1,5*40±2,1*99,2±3,2*55,2±2,9*Сутки наблюдения71430(n=20)(n=15)(n=10)48,0±1,4* 29,3±2,1*64,0±2,7*32,0±1,1* 13,3±1,7** 24,0±1,7*16,0±0*16,0±2,1*40,0±2,8*Сутки наблюдения71430(n=10)(n=10)(n=10)10,8±1,011,2±0,910,4±1,08,4±0,52,4±0,7Примечание: * - р<0,05, ** - р>0,05598,4±0,42,8±0,57,6±0,72,8±0,590(n=5)44,8±2,3*4,8±0,4**40,0±2,1*90(n=5)16,8±1,7*6,0±1,0**10,8±1,0*90(n=10)10,2±0,87,4±0,52,8±0,3Таблица 6Процентное соотношение высокоавидных и низкоавидных IgGв сыворотке крови в динамикеЭндопротезIgGВысокоавидныеНизкоавидныедо(n=20)75**25**ВысокоавидныеНизкоавидныедо(n=20)85,5**17,5**ВысокоавидныеНизкоавидныедо(n=10)78,121,9ППТППКонтрольСоотношение антител в %Сутки наблюдения71430(n=20)(n=15)(n=10)21,8*14,6*13.7*78,1*85,3*86,2*Сутки наблюдения71430(n=20)(n=15)(n=10)66,6*45,3*37,5*33,3*54,6*62,5*Сутки наблюдения71430(n=10)(n=10)(n=10)77,7757322,3252790(n=5)10,7*89,2*90(n=5)36,8*63,2*90(n=10)72,527,5Примечание: * - р<0,05, ** - р>0,05На 7 сутки после имплантации сетчатых эндопротезов в обеих группахотмечалось усиление антителогенеза с достоверным повышением общеготитра IgG до 51.2 ± 2.2 у.е.
(в 4,9 раза) в группе с ПП эндопротезом и до 48±1.4у.е (в 4 раза) – с ТПП эндопротезом (р<0,05) (табл.5). При этом отмеченоувеличение содержания низкоавидных антител до 78.1% (в 15.8 раз) и до33,3% (в 7,6 раз) соответственно (р<0,05) (табл.6, рис.15).Полученные данные свидетельствуют о незначительном понижениипротективной активности В-системы иммунитета при имплантации ТППэндопротеза по сравнению с ПП эндопртезом, где наблюдается болеевыраженное снижение протективной активности В-системы иммуниета,проявляющееся в усиленном биосинтезе IgG, преимущественно за счетнизкоавидных антител.6060Титр IgG в у.е.50403020100дооперации7суткидооперацииППэндопротез7суткиТППэндопротезВысокоавидныеантителаНизкоавидныеантителаРис.
15. Изменение титра IgG на 7 сутки после операцииК 14 суткам после операции наметилось очевидное расхождение внаправленности пролиферативных процессов В-системы иммунитета взависимости от имплантируемого эндопротеза (рис.16). Так, в группе симплантацией ПП эндопротеза отмечалось усиление биосинтеза антител сувеличением концентрации титра IgG до 116.2±3.3 у.е (в 2,2 раза по сравнениюс 7 сутками (р<0.05)).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
