Диссертация (1154323), страница 9
Текст из файла (страница 9)
Омска и клинической базой кафедрыфтизиатрии и фтизиохирургии ОмГМУ. Основное направление деятельностиКПТД № 4 – консервативное и хирургическое лечение больных туберкулезомлегких и туберкулезом внелегочной локализации на основе современных методикв соответствии с международными стандартами. В КУЗОО «КПТД № 4»размещены 2 диспансерных отделения суммарной мощностью на 155 посещенийв смену, дневной стационар на 14 мест и дневной стационар на дому на 4 места.Осуществляется прием взрослого и детского населения г. Омска, а также приембольных внелегочными формами туберкулеза (туберкулез мочеполовой сферы,туберкулез глаз, туберкулез костей и суставов, периферических лимфоузлов,кожи) со всей области.
В диспансере имеется стационар на 426 коек и 6 отделенийдлябольныхтуберкулезоморгановдыхания,туберкулезноелегочно-хирургическое отделение с отделением анестезиологии и реанимации, палаты длялеченияпациентов,страдающихкостно-суставнымтуберкулезом,урогенитальным туберкулезом и туберкулезом глаз.Для сравнительных исследований и выявления общих тенденций в регионеиспользовались открытые данные крупнейших больниц г. Омска и Омскойобласти – ОКБ и КХМЦ. Все медицинские учреждения, являющиеся объектаминастоящегоклиническимиисследования,располагаютбактериологическимисобственнымилабораториямиисовременнымиимелинамоментисследования в своей структуре службу клинической фармакологии.Для оценки кадрового обеспечения службы клинической фармакологии врегионах РФ (Урал, Западная и Восточная Сибирь) использовались материалыкрупнейших областных и краевых больниц, предоставленных главными иливедущими специалистами: Скальского С.
В. (Омск), Костанян А. М. (Омск),46Верлан Н. В. (Иркутск), Курц Е. В. (Красноярск), Саприной Т. В. (Томск),Пастуховой Т. П. (Екатеринбург), Митрохина В. Е. (Новосибирск).2.2. Методы исследования2.2.1. Методы исследования количественных и качественных характеристикмикроорганизмов – возбудителей внутрибольничных инфекцийСогласно методическим указаниям МУК 4.2.1890-04 [127], для оценкиантибиотикорезистентностимогутиспользоватьсядваосновныхметодаэпидемиологического надзора: 1) постоянный мониторинг за качественнымисвойствамивозбудителейинфекций;2)эпизодическиймониторингзаантибиотикорезистентностью микроорганизмов, вызывающих возникновениекакой-то определенной патологии.
В настоящем исследовании преимущественнона постоянной основе применялся первый вид эпидемиологического надзора заантибиотикорезистнтностью, но в ряде случаев использовался и второй вид –эпизодический (специальный). В частности, для определения количественных икачественных свойств возбудителей мочевых инфекций у беременных спатологией органов мочевыделения (БУЗОО «ГК БСМП № 1»): для оценкиантибиотикорезистнтности у пациентов с ожоговой травмой (БУЗОО «ГК БСМП№ 1»); для оценки свойств микроорганизмов – возбудителей карбункула кожи (ГКБСМП № 1); для оценки свойств бактерий у пациентов с синдромомдиабетической стопы (ГБ № 2); для той же цели – у пациентов с инфекциямикожи и мягких тканей (БУЗОО «ГКБ № 1 им. Кабанова А. Н.»).Помасштабностипроведенияэпидемиологическийнадзорзаантибиотикорезистнтностью может быть всеобъемлющим и сигнальным [127].Всеобъемлющий (или полный) надзор предполагает вовлечение как можнобольшего количества ЛПУ, специалистов различного профиля для полученияинформации глобального характера – демографических характеристик пациентов,локализации каких-либо инфекций и т.п.
Сигнальный тип эпидемиологического47надзора подразумевает сбор данных на ограниченной территории или уопределенной части популяции с целью получения данных, которые могут бытьиндикаторами состояния антибиотикорезистентности для всей популяции в целом(при условии соблюдения репрезентативности выборки) [127]. Данный типэпидемиологического надзора предпочтителен для проведения локального(регионального) сбора данных и именно он использовался в этом исследовании.Во всех случаях наблюдений по методике выполнения эпидемиологическийнадзор являлся пассивным, то есть основанным на спонтанном поступлениимикробиологических данных из первоисточников без всяких активных усилий состороны наблюдателя. Еще одной важной характеристикой проведенной оценкиколичественных свойств возбудителей является полнота охвата материала,предполагающаяучастиекаждогополученногорезультатарутинногоисследования содержимого ран, мокроты, мочи и крови.Качественные свойства микроорганизмов оценивались стандартным дискодиффузионным методом (ДДМ), разработанным в 60–70-е гг.
прошлого столетияи с методической точки зрения принципиально не претерпевшего изменений и внастоящее время [29; 127; 166; 173; 180; 179]. ДДМ широко применяется внастоящее время как наиболее простой, экономичный способ, позволяющийдостоверно судить о качественных свойствах микроорганизмов – возбудителейвнутрибольничных инфекций [12; 17; 102; 118; 147; 158; 181; 187], – а также прииных состояниях и проблемах, требующих оценки потенциальной эффективностиПМС [36; 116; 133; 138; 167; 221; 222; 224].Принцип ДДМ заключается в подавлении роста микроорганизмов ПМС,пропитавшимибумажныедиски,которыепомещаютсянаповерхностьпитательного агара в чашку Петри с растущими колониями, полученными избиологического материала пациента.
Диффузионные методы определениячувствительности основаны на проникновении ПМС из носителя (бумажногодиска) в плотную питательную среду и на торможении роста исследуемойкультуры в той зоне, где концентрация ПМС превосходит минимальноподавляющую концентрацию (МПК). МПК – минимальная концентрация ПМС,48подавляющая видимый рост исследуемого микроорганизма в бульонной культуреили на плотной питательной среде. Выделяют МПК90 – концентрация ПМС, прикоторой тормозится рост 90% колоний, МПК50–тормозится рост 50% колоний[127; 166; 179].
Для оценки чувствительности микроорганизмов применялипитательные среды, утвержденные для этой цели к применению в РоссийскойФедерации. Агар разливался по чашкам Петри слоем толщиной 4 мм, затем чашкиоставляли для застывания при комнатной температуре. Готовые для исследованиячашки Петри использовали немедленно, допускали их хранение в запаянныхполиэтиленовых пакетах в холодильнике при температуре 4–8° С в течение 5суток [127].ДляопределениячувствительностикачественныестандартизированныеОбязательнымусловиемДолговременноехранениебылоДДМдискистрогоеобеспечивалосьиспользовализаводскогособлюдениевтолькоизготовления.правилгерметическойхранения.упаковкевморозильной камере при температуре -18° С и ниже.
Небольшие партии дляповседневной работы хранили плотно укупоренными при температуре 4–8° С вхолодильнике, исключая попадание влаги. За 1 час до начала тестирования диски,содержащие ПМС, извлекали из холодильника.ДляосуществленияДДМизготавливалистандартныйинокулюм,соответствующий по плотности 0,5 стандарта МакФарланда и содержащийпримерно 1,5х108 КОЕ/мл, который использовали в течение 15 мин послеприготовления. Инокуляцию осуществляли с использованием стерильных ватныхтампонов.
Тампон погружали в суспензию микроорганизма, затем удалялиизбыток инокулюма, отжимая тампон о стенки пробирки. Инокуляцию проводилиштриховыми движениями в трех направлениях, поворачивая чашку Петри на 60°[127; 179].В течение последующих 15 мин после инокуляции на поверхностьпитательной среды в чашку Петри стерильным пинцетом наносили диски с ПМС.На одну чашку помещали 6 дисков, плотно прижимая их к поверхности агара.Далее чашки Петри помещали в термостат кверху дном и инкубировали при49температуре 35° С в течение 18–24 ч. После окончания инкубации чашкипомещали кверху дном на матовую поверхность так, чтобы свет падал на них подуглом в 45°, и диаметры зон задержки роста измеряли с точностью до 1 мм.В рутинной клинической практике интерпретация результатов оценкикачественных свойств микроорганизмов заключалась в отнесении исследуемогомикроорганизма к одной из трех категорий – чувствительный, промежуточный(умеренно чувствительный), устойчивый.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
