Диссертация (1151601), страница 6
Текст из файла (страница 6)
Первые симптомывключают: нарушение плавательных движений, у отдельных рыб отмеченыспиральныедвижения,потемнениекожи,экзофтальм,вздутиебрюшка,покраснение жаберных крышек и тела. У мальков наблюдались мягкие и упругиедоброкачественные наросты (неоплазмы) в коже. У больных рыб отмечаютследующие гистологические изменения: обширный некроз паренхимы печени,почек и собственной пластинки слизистой оболочки кишечника. В печёночныхклетках обнаруживаются ядерные тельца - включения Каудри, иногда отмечаютвакуольную дистрофию, некротический гепатит и некротический нефрит [94].У оставшихся в живых после заражения и заражённых взрослых CyHV1отмечали атрофию иммунокомпетентных органов [17], также появлялисьпапилломы [177], развитие которых отмечали через 7.5 месяцев [94]. Пригистологическом исследовании обнаруживают гиперплазию кератиноцитов, вкоторых наблюдается маргинация хроматина и эозинофильные внутриядерные28включения.
Папиломы сохраняются и развиваются при 15 0С и регрессируют при25 0С. По данным Hongda Lu et al. (2009) рост папиллом происходит за cчётпролифирации клеток. Растущие папилломы постепенно распространяются наприлегающие участки, занимая иногда две трети поверхности тела. Цветпапилломсеровато-белый.Гистологическипапилломыхарактеризовалисьмногократным утолщением эпидермиса за счёт прогрессирующего разроста игиперплазии эпителия. Внутри папиллом часто происходит распад клеток иочаговый некроз тканей с образованием пустых пространств. В опухолевыхклетках обнаруживают деформацию и лизис ядер, маргинацию хроматина,органеллы в цитоплазме уменьшены или отсутствуют.
Некроз клеток в опухолинаблюдается когда опухоли регрессируют при увеличении температуры [93].Часто папилломы могут возобновляться после регрессии. Секвенирование геномапоказало что вирус CyHV1 имеет онкоген JUNB, который может быть частичноответственный за образование опухолей [44]. Предварительный диагноз наCyHV1 ставится на основании характерных симптомов. Диагноз может бытьподтвержден методом ИФА или ПЦР [81].
При электронной микроскопиивыявляются нуклеокапсиды – 113±9 и вирионы - 190±27 нм.[173].Метод in situ гибридизации демонстрирует присутствие латентного вируса вкраниальных и спинальных нервах и в подкожной клетчатке [93, 172].Некрозгемопоэтическойтканизолотойрыбки,возбудитель–герпесвирус некроза гемопоэтической ткани золотой. Jung, Miyazaki (1995)впервые описали тяжёлую болезнь культивируемых золотых рыбок, Carassiusauratus обозначенный какгерпесвирусный некроз гемопоэтической ткани(HVHN). Эпизоотии имели место в Японии в 1992-1993 годах.
Вспышки болезнитакже наблюдались в США [149] Великобритании [110], Венгрии [152], Чехии[191], Франции [69], Австралии [80, 103] и Китае [99]. В настоящее время вирусшироко распространён в аквакультуре многих странах [54, 92, 116]. Оченьчувствительным видом к данному вирусупомимо золотых рыбок являетсясеребристый карась, Carassius gibelio [51, 81, 117, 152]. Обыкновенный карп,Cyprinus carpio ,гибрид кои и золотой рыбки, а также толстолобик и белый амур29не восприимчивы к CyHV2 [44, 81, 90]. Возраст рыб был до 1 года, масса 5-15грамм.
Вспышки болезни имели место весной при температуре воды 15-200С урыб всех возрастов. Механизм передачи вируса может быть вертикальный игоризонтальный [69]. Смертность достигала 100 % [44, 78, 79]. Привнутрибрюшной инъекции в дозе 105 ТЦД50 кумулятивная гибель достигала 100%в течение 13 дней [117]. При температуре более 250С болезнь затухала, при этомвыжившие рыбы становились носителями и являлись источником болезни длянезаражённых рыб [114, 117]. Вирус выделяли в клеточных линиях FHM, EPC иKF при температуре 200С [110]. Выделить вирус, даже в чувствительныхклеточных линиях, трудно [30, 78, 117]. Для выделения вируса и решенияприкладных задач может использоваться клеточная линия золотых рыбок [90,131].Поражённые рыбы были истощёнными, апатичными, отказывались откорма, держались на дне, учащённо дышали [44, 78, 110, 117].
У части рыбнаблюдались побелевшие плавники, кровоизлияния в области основанияплавников [99, 191], гиперемия брюшка [136], изменение пигментации тела [99],пучеглазие и водянка [109, 116]. В жабрах некротические бледные пятна сизбытком слизи [69, 78], очаги кровоизлияния [51, 69, 99, 134], гиперплазия ислияние жаберных лепестков [30, 110]. Наиболее сильные поражения наблюдалив почках и селезёнке [54, 116,117, 132].
Почки набухшие, увеличенные, бледные[44, 82, 110]. В кроветворной ткани головной и туловищной почки наблюдалсяочаги некроза [51, 69, 78, 80, 99, 110] в клетках кариопикноз и кариорексис. Впочечных канальцах и клубочках незначительные очаги некроза [117],дегенерация [44], дилатация капилляров клубочков [99]. Cелезёнка увеличена сбелыми узелками 1мм. Селезёночная пульпа с обширным некрозом [ 69].Некротические поражения иногда сопровождаются геморрагиями. Печеньбледная, но гепатоциты выглядят нормальными, иногда в синусоидах стаз крови[117]. У некоторых рыб поджелудочная железа воспалена [69]и отмечаетсянекроз ацинарных клеток и островковой ткани [117]. Кишечник лишён пищи[110,136],слизистаясочагаминекроза,наблюдаетсявоспалительная30инфильтрация лимфоцитами, нейтрофилами, макрофагами, плазматическимиклетками [69].
В плавательном пузыре отмечены геморрагии [78, 136]. В другихорганах (мускулатуре, сердце и головном мозге) патолого-гистологическиеизменения не обнаружены [117]. В некротичных клетках наблюдаютсякариорексис, а также кариопикноз и гипертрофия ядра с маргинацией хроматинаи включения в центре ядра [69, 78, 81, 99, 110, 136].Для постановки диагноза часто применяется электронная микроскопия, прикоторой обнаруживаются нуклеокапсиды-115-117 нм и вирионы-170-220 нм., атакже гистология [79].
Также разработан метод ПЦР [51,54] и болеечувствительный и дешёвый метод – флуорисцентная in situ гибридизация (FISH)[99].Герпесвирусная болезнь карпа кои, возбудитель – герпесвирус карпакои. Впервые болезнь обнаружена в Великобритании в 1996 г., но возбудительсyprinid HV 3 выделен в Израиле после вспышки болезни в 1998 г. [28]. Случаимассовой гибели обыкновенных карпов и карпов кои регистрировались с 1997 г.
вСеверной Америке, Европе, Индонезии, Корее, Японии, Африке, ЮжнойАмерике, Австралии, Малайзии, Таиланде, Тайване [21, 22, 41, 47, 56, 62, 63, 70,123, 135, 150, 195, 196, 211].Восприимчивыми кCyHV 3 являютсяобыкновенный карп (Cyprinus carpio), сазан и карп кои [41, 186,194], Однако поданным Miwa S., et al, (2015) кои более чувствительны к данному вирусу. Болеютвсе возрастные группы, но мальки 2.5-6 гр. более восприимчивы [62, 63, 150].Основным путём передачи вируса является вода [149]. Механическимипереносчиками являются другие виды рыб и беспозвоночные [104, 149, 195].Вирус выделен в клеточных линиях KF-1, CCB, CFC [84, 105, 190]. ЦПЭпроявлялся через 5 суток при температуре 200Собразованием симпластов,вакуолизацией и образованием гигантских клеток [21, 105, 190].
Через 7-10 сутокнаблюдалось полное поражение монослоя [105]. Оптимальная температура длярепродукции CyHV3 22-260С [62]. Особенно остро болезнь протекает притемпературе 17-260С [146, 186,194]. При более низких температурах водыболезнь протекает в хронической форме с низкой смертностью, при 130С31клинические признаки отсутствуют, инфекция переходит в латентную форму, апри повышении температуры до 230С происходит обострение болезни и гибельрыб [105]. Инкубационный период составляет 7-21 день в зависимости оттемпературы [190]. При этом заболеваемость достигает 100%, смертность 90100%, [84, 146, 186, 190].У инфицированных рыб отмечены отказ от корма, апатия, за которой можетследовать гиперактивность, нарушение координации движения ориентацияголовой вверх, энофтальм или экзофтальм [63, 84, 105, 153, 210], плавание намелководье [62].Воротами инфекции считают кожу, в которой развиваются основныесимптомыболезни[35,45,98,153,При154].этомотмечаются:депигментированные пятна на [105], у отдельных рыб повышенная [194] илипониженная секреция слизи [46, 105, 191], некроз и слущивание эпидермиса,покраснение и геморрагии в основании плавников [21, 190, 196].
Полагают, чтовследствие поражения кожи возникает осмотический шок, являющийся главнойпричиной гибели рыб [153]. Позже вирус обнаруживается в жабрах и черезнесколько дней во внутренних органах [153]. В результате поражения кожи рыбыболее восприимчивы к вторичным инфекциям и инвазиям. Происходит это врезультате уменьшения экспрессии мРНК генов, кодирующих несколько важныхкомпонентов слизистого барьера, в частности муцина 5В, бета дефенсина 1и 2 иплотных соединений белка клаудина 23 и 30 [46].В жабрах отмечаются гипертрофия, гиперплазия, слияние жаберныхпластинок и очаговый некроз.
Селезёнка увеличена. В паренхиме отмечаютнекроз отдельных клеток или очаговый некроз. Почки увеличены, в паренхимевоспалительная инфильтрация, застойная гиперемия, дистрофия эпителияканальцев во многих нефронах, очаги некроза. Некротические измененияобнаруженытакжевподжелудочнойжелезеивпаренхимепечени.Некротические поражения в собственной пластинке кишечника [21, 47, 190, 199].Внутриядерные включения обнаружены в нейронах головного мозга,который рассматривается как место локализации вируса при латентной форме32инфекции, также как при герпесвирусных инфекциях у других животных ичеловека [106, 153]. При этом патизменения в мозге, как правило, не выявляются[153], но ряд авторов отмечают отёк [47] и менингит [84].
Предполагают, чтовируспроникает в ЦНС рыб через систему обоняния, так как вирус онпервоначально обнаруживается в обонятельных луковицах [153] При латентнойинфекции вирус может находиться в лейкоцитах [21, 105, 107, 145, 150, 165].Нуклеокапсиды обнаруживаются в ядре, зрелые вирионы в цитоплазме. Размернуклеокапсида от 100 до 110 нм, зрелого вириона 170-230 нм.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
