Диссертация (1151601), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Они являются базовыми для постановки предварительного диагноза.Окончательнуюкомплексносдиагностику герпесвирусной болезни следует осуществлятьобязательнымвыделениемвирусаиегоидентификациисуществующими методами.Полученные в результате исследований материалы используются в«Московскойгосударственнойакадемииветеринарноймедициныибиотехнологии – МВА имени К.И. Скрябина» при проведении практическихзанятий и чтении лекций по дисциплинам: «Болезни рыб» и «Вирусология».Методологияиметодыпоставленныхзадачпозволяющиеполучитьисследования.использованыДляобщепринятыедостоверныерезультаты.достиженияметодическиеВработецелииприёмы,применяли7современные вирусологические (постановка биопробы, вирусовыделение, расчёттитравируса),гистологические,электронно-микроскопическиеметодыисследований.Положения, выносимые на защиту:1.Течение,клиническиепризнаки,патолого-анатомическиеимикроструктурные изменения при экспериментальной герпесвирусной инфекциисибирского осетра.2.Патоморфологическиеизмененияприестественномтечениигерпесвирусной инфекции.3.Системное патогенное действие герпесвируса на организм сеголетковсибирского осетра и его гибрида с русским осетром.4.Результаты комплексных исследований в диагностике и расшифровкепатоморфогенеза герпесвирусной болезни осетровых рыб.Степень достоверности и апробация результатовДостоверность полученных результатов исследований подтверждаетсявыполнением работы на достаточно большом материале и современномметодическом уровне.
Научные выводы и рекомендации, сформулированные вдиссертации, вытекают из результатов. Поставленные цели и задачи реализованыв полной мере.Основные положения выполненной работы доложены: на Международнойучебно-методическойинаучно-практическойконференции«Актуальныепроблемы ветеринарии, зоотехнии и биотехнологии» (МГАВМиБ имени К.И.Скрябина, Москва, 2014 г.), IV Международной конференции «Проблемыиммунологии, патологии, охраны здоровья рыб и других гидробионтов» (Борок –Москва, 2015 г.).Публикации.Основныерезультатыдиссертационнойработыопубликованы в 6 научных работах, в том числе 3 статьи в журналах из перечняВАК РФ («Российский ветеринарный журнал» – 2 статьи, «Труды ВНИРО» - 1статья).8Личный вклад автора.
Автор лично участвовал на всех этапах научныхисследований: в получении исходных данных при постановке экспериментов,обследованииестественнобольныхрыбиинтерпретацииполученныхрезультатов.В двух опытах работа проводилась совместно со специалистами другихпрофилей: вирусологами, специалистами по электронной микроскопии. Один изтрёх опытов и все патоморфологические исследования автором выполненысамостоятельно.Привыездахврыбоводныехозяйстваонпринималнепосредственное участие в обследовании и оценке эпизоотической ситуации,собирал патматериал для лабораторных исследований.Научные данные лично автором проанализированы и обобщены врезультатах собственных исследований, заключении и выводах.Благодарности.
Автор выражает благодарность научному руководителюГрищенко Л.И. за всестороннюю помощь, профессору кафедры радиобиологиивирусологии имени академиков А.Д. Белова и В.Н. Сюрина д.б.н., профессоруЯрыгиной Е.Н., к.в.н., зав. кафедрой общей патологии Илиешу В.Д. за постоянныеконсультации; сотрудникам лабораторий: здоровья гидробионтов и биофизикиГНУ«ВНИИВВиМ»,сотрудникамцентраколлективногопользованияэлектронной микроскопии ФГБУН «Института биологии внутренних вод им.
И.Д.Папанина РАН» за помощь и поддержку в отдельных этапах работы.Объём и структура диссертации. Диссертация состоит из следующихразделов: введение, обзор литературы, результаты собственных исследований,заключение, список литературы, приложения.Она изложена на 123 страницах текста и включает 13 таблиц, 65 рисунков.Список использованной литературы состоит из 212 источников, из них 193иностранных.92 Обзор литературы2.1 Таксономия и общая характеристика герпесвирусов рыб.В настоящее время все герпесвирусы входят в порядок Herpesvirales,которыйобъединяеттрисемейства:Alloherpesviridae,HerpesviridaeиMalacoherpesviridae. Cемейство Herpesviridae разделяется на три подсемейства:Alphaherpesvirinae, Betaherpesvirinae и Gammaherpesvirinae, включающих в себявсегерпесвирусырептилий,птицимлекопитающих.ВсемействеAlloherpesviridae выделены все герпесвирусы рыб и лягушек, асемействоMalacoherpesviridae представлено двумя видами герпесвирусов -устрицы иморского ушка.
В семейство Alloherpesviridae входят четыре рода: Batrachovirus,Cyprinivirus, Ictalurivirus, Salmonivirus. В целом современная классификациягерпесвирусов представлена ниже [102].Порядок HerpesviralesСемейство HerpesviridaeПодсемейство AlphaherpesvirinaeПодсемейство BetaherpesvirinaeПодсемейство GammaherpesvirinaeСемейство AlloherpesviridaeРод BatrachovirusВид Ranid Herpesvirus 1(герпесвирус лягушек 1)Вид Ranid Herpesvirus 2 (герпесвирус лягушек 2)Род CyprinivirusВид Anguillid herpesvirus 1(герпесвирус угревых 1)Вид Cyprinid herpesvirus 1 (герпесвирус карповых 1)Вид Cyprinid herpesvirus 2 (герпесвирус карповых 2)Вид Cyprinid herpesvirus 3 (герпесвирус карповых 3)Род IctalurivirusВид Acipenserid herpesvirus 2 (герпесвирус осетровых 2)Вид Ictalurid herpesvirus 1 (герпесвирус икталуровых 1)10Вид Ictalurid herpesvirus 2 (герпесвирус икталуровых 2)Род SalmonivirusВид Salmonid herpesvirus 1 (герпесвирус лососёвых 1)Вид Salmonid herpesvirus 2 (герпесвирус лососёвых 2)Вид Salmonid herpesvirus 3 (герпесвирус лососёвых 3)Семейство MalacoherpesviridaeРод AurivirusВид Haliotid herpesvirus 1 (герпесвирус морского ушка 1)Род OstreavirusВид Ostreid herpesvirus 1 (герпесвирус устриц 1)Кнастоящемувременинеопределеннымостаётсятаксономическоеположение герпесвируса осетровых 1 (Acipenserid herpesvirus 1), он не внесён всписок Международного комитета по таксономии вирусов [102] и герпесвируслососёвых 4 (Salmonid herpesvirus 4) [82].Герпесвирусы являются одними из крупнейших и сложнейшихпоструктуре вирусов.
Геном герпесвирусного вириона(~200-250 нм в диаметре)содержитдвухцепочечнуюДНК,упакованнуювнутриикосаэдральногонуклеокапсида (капсид ~ 100 нм в диаметре), который окружён белковымтегументом, окутанным липидной мембраной (рис.1) [2, 212]. Минимальныйисследованный геном рыб у Ictalurid herpesvirus 1 содержит 76 генов,максимальный у Cyprinid herpesvirus 3 – 155 [44, 82].Цикл репликации герпесвирусов рыб лучше всего описан на примеревирусов семейства Herpesviridae [82,144].
Гликопротеины оболочки вирионаприкрепляются к клеточным рецепторам, далее мембрана клетки и оболочкавириона сливаются, затем нуклеокапсид с тегументом проникает в цитоплазму.После чего, нуклеокапсид посредством микротрубочек транспортируется кядерной поре,стыкуется с ней, и геном проникает в ядро. Потом в ядрепроисходит транскрипция генов и репликация генома (экспрессия генов). Пустыекапсиды формируются в ядре, далее в них загружается ДНК.
Вновь образованныенуклеокапсиды почкуются через ядерную мембрану, проникая в перинуклеарное11пространство и далее в цитоплазму, где происходит окончательное созреваниевириона, при котором незрелые вирионы почкуются в везикулы, образующиеся вкомплексеГольджинуклеокапсидыисодержащиевирусныегликопротеины,затемприобретают тегумент и оболочку.
После транспортировки кклеточной поверхности везикулы и плазматическая мембрана сливаются и изклетки высвобождается зрелый вирион.Рис. 1 – Строение вириона герпесвирусаДля герпесвирусов рыб характерна высокая специфичность к определённымвидам рыб – хозяевам, что указывает на длительное совместное эволюционноеразвитие и хорошую приспособленность друг к другу. Примеры высокойпатогенности герпесвирусов являются следствием нарушения равновесия вотношениях паразит – хозяин из-за интенсивной экономической деятельностичеловека [48].Как правило, острое течение герпесвирусной инфекции у рыб с высокойсмертностью наблюдаются при первичном инфицировании, при этом в случаеусловного выздоровления рыб вирус переходит в латентное состояние прикотором возможны рецидивы болезни, со значительно меньшей летальностью.При этом первичная инфекция в естественном хозяине может вызывать и лёгкуюформу заболевания, но при оптимальной температуре для репродукции вируса и12давлении стресс–факторов некоторые аллогерпесвирусы могут приводить ксерьёзной эпизоотии с высокой заболеваемостью и смертностью [82].
Признанныевиды [102] герпесвирусов рыб, вызываемые ими патологии и культуры клеток,используемые для выделения вирусов представлены в таблице 1.Таблица 1- Наиболее значимые для аквакультуры виды герпесвирусов рыбНазваниевируса(аббревиатура)IctaluridHV1(IcHV1,ССV)IctaluridHV1(IcHV2,IcmHV)Культурыклеток,ЦПЭ,Вид рыбы-хозяинаСсылкиоптимальнаятемператураКанальныйсом, Геморрагии, некроз ССO,142,Ictalurus punctatusкишечника, почек, синцитии,2020печени.Высокая 30 Ссмертность молодиЧёрный сом-кошка, Геморрагии, некроз EPC,BF-2,109,Ictalurus melasпочек.Высокая cинцитии,113,смертность рыб всех 250С168,возрастов188ПатологическиеизмененияAnguillidЯпонский угорь,Геморрагии кожи,herpesvirus1A.japonica, плавников.(AngHV1,HVA) ЕвропейскийСмертность до 10%.угорь, A.AnguillaSalmonidРадужная форель, ПатизмененияHerpesvirus 1,Oncorhynchusвыражены слабо.(SalHV1, HPV, mykissSHV)SalmonidСима, O. masou,Геморрагии, некрозHerpesvirus2,Кижуч, O.
Kisutch,почек,печени,Нерка, O. nerka,папиломатоз.(SalHV2,Кета,O.keta,Смертность молодиOncorhynchusmasouvirus, Радужная форель, до 80%OncorhynchusOMV)mykissSalmonidОзёрныйголец, Геморрагииглаз,Herpesvirus 3, Salvelinusкожи. Гиперплазия(SalHV3,namaycushкожного эпителия.EpizooticСмертность молодиEpitheliotropicдо 100%Disease virus,EEDV)EK-1, EO-2,синцитии,округлениеклеток,250СRTG-2,CHSE-214,синцитии100С.CHSE-214,RTG-2,синцитии,округлениеклеток, 150СВкультуреклетокнерепродуцируется33,122,17196,97,203,204100,120,184,20964,127,13713Продолжение таблицы 1КультурыПатологическиеклеток, ЦПЭ,Вид рыбы-хозяинаСсылкиизменияоптимальнаятемпература27,Cyprinid HV 1 ОбыкновенныйГеморрагии,EPC,FHM,65,(CyHV1 СHV)карп,Cyprinus папилломы.вакуолизация94,carpioСмертность мальков округление173,до 90%клеток,15020 СCyprinid HV2 Золотаярыбка, НекрозFHM,EPC,44,(GFHNV,гемопоэтичксойKF-1,117,Carassius auratus,HVHN)тканипочек,печени,округление,132,Серебристыйвакуолизация,172,карась, Carassius кишечника,0селезёнки.15-20 СgibelioСмертность до 100%рыб всех возрастовНазваниевируса(аббревиатура)Cyprinid(KHV)Acipenseridherpesvirus(AciHV1,WSHV-1)Acipenseridherpesvirus(AciHV2,WSHV-2)HV3 ОбыкновенныйСлияние жаберныхкарп, карп кои, лепестков,некрозCyprinus carpioгемопоэтическойткани почек, печени,кишечникаБелыйосётр, Гиперплазия, некроз1 Acipenserэпидермиса.Смертность мальковtransmontanus(1-3 гр) до 35%Белыйосётр, Гиперплазия2 Acipenserкожного эпителия,transmontanus,геморрагии,Тупорылый осётр, бледностьAcipenserвнутренних органов.brevirostrum,Смертность молодиСибирский осётр, сибирского осетраAcipenser baeriдо 100 %KF-1,CCB,CFC,вакуолизация,200С21,28,63,210WSSK-1,синцитий,150С74,88,166WSS-2,WSSK-1,SSO-2,округлениеклеток,разрушениемонослоя,150С18,40,57,68,1982.2 Болезни рыб, вызваемые предположительно герпесвирусами.Большое количество герпесвирусов рыб не удалось изолировать в культуреклеток.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
