Диссертация (1151601), страница 3
Текст из файла (страница 3)
Обнаружить возбудителя вирусной инфекции в таких случаях возможнотолько с помощью электронно–микроскопический исследований поражённыхтканей (таб. 2).14Таблица 2- Герпесвирусы рыб, обнаруженные только с помощьюэлектронной микроскопииНазвание вирусаВид рыбы - хозяинаEsocidHV1 обыкновенная щука, Esox Lucius(EsHV1)Pleuronectid HV1 Тюрбо, Scopthalamus maximus(PlHV)Golden ide HVПатологическиеизменениягиперплазияэпидермиса-||-Язь, Leuciscus ide20537,167,185139,183-||-Тихоокеанскаятреска,GadusmacrocephalusSheatfish HV (SHV) Обыкновенный сом,Silurus glanisRainbow smelt HV Азиатскаякорюшка,OsmerusmordaxEuropean Smelt HV Европейская корюшка, OsmeruserelanusSmooth dogfish HV Американскаякуньяакула,Mustelus canisAngelfish HVСкалярия высокая, PterophyllumaltumRed striped rockfish Морской окунь, Sebastes prorigerHVPacific cod HVСсылкигиперплазия,папилломатозгиперплазия,папилломатоз140,141182карцинома148гиперплазия,папилломатозгиперплазия,папилломатозгеморрагии кожигеморрагии,некрозпечени2513014391В Канаде при исследовании кожных поражений обыкновенной щуки, Esoxголубовато–беловатогоJuciusцвета,шероховатыхнаощупь,выявилигиперплазированный эпидермис, сильно гипертрофированные отдельные клетки,увеличенные ядра с типичными для герпесвируса капсидами диаметром 100 нм[205].
В Великобритании и Дании, в крупных эпителиальных клетках кожи и жабрТюрбо,Scopthalamus maximusв эпидермисе кожи были найдены вирусныечастицы аналогичные по морфологии герпесвирусам [167]. У больных рыбнаблюдали апатию, истощение, асцит, иногда выпадение прямой кишки [185].При электронно-микроскопических исследованиях гиперплазированногоэпителия кожиголовного, туловищного отдела и плавников больных язей,15Leuciscus ide обнаружены герпесвирусоподобные частицы. Поражения выгляделив виде узелков с булавовидную головку. В клетках наблюдали увеличенные ядра,с краевым стоянием хроматина и нуклеокапсиды 90-113нм.
в диаметре, вцитоплазме зрелые вирионы достигали 160-180 нм. [139,183].В гипертрофированных клетках гиперплазированного эпидермиса иопухолях тихоокеанской трески, Gadus macrocephalus выявлены частицы сходныес вирусами герпеса [140, 141], аналогичные частицы найдены в папилломахобыкновенного сома, Silurus glanis [182]. У Европейской корюшки, Osmeruserelanus в папилломах кожиотмечали герпесвирусоподобные нуклеокапсиды100нм.
и вирионы 200-350 нм. в диаметре [25, 115].У азиатской корюшки, Osmerus mordax в ядрах клеток опухолей спризнакамикарциномынаблюдалигранулированныйхроматин,которыйпредположительно является вирусным ДНК. [148].Впервые герпесвирусоподобные частицы обнаружены у вида хрящевых рыб– американской куньей акулы, Mustelus canis в узелках кожи округлой илиовальной формы от 1 мм до 1 см. В поражённой ткани отмечали дегенерациюклеточного эпидермиса и акантолиз [130].Нуклеокапсидыдиаметром100нм.поморфологиианалогичныегерпесвирусным наблюдали у скалярий, Pterophyllum altum, при этом у рыботмечали нарушение координации движения, иногда спиралевидное плавание,зависание у поверхности воды, кровоизлияния в коже, бледность жабр,увеличенные печень и селезёнку [143].В Канаде при исследовании кожи и внутренних органов больных морскихокуней, Sebastes proriger выявляли вирусные капсиды 100нм в диаметре стельцами включениями типа Каудри.
Патологоморфологические изменениявключали: множественные кровоизлияния на кожи и в печени, многоядерныесинцитии гепатоцитов и мультифокальный некроз гепатоцитов [91].162.3 Герпесвирусные болезни рыб:2.3.1 Распространение, течение и патоморфологические изменения пригерпесвирусных болезнях лососёвых рыбВ настоящее время в литературных источниках имеются данные о четырёхвидах герпесвирусов лососёвых, из них три признаны международным комитетомпо таксономии вирусов [101]. Выявлены герпесвирусы в США, Японии, Европе,России.
Восприимчивыми видами являются: радужная форель, стальноголовыйлосось, атлантический лосось, чавыча, кета, нерка, кижуч, озёрный голец.Наиболееострогерпесвирусныеболезнипротекаютумолоди,кумулятивная гибель которых может при SalHVD2 и SalHVD3 достигать 100%[184, 138]. При SalHVD1 и SalHVD4 смертность наблюдается из-за большейвосприимчивости заражённых рыб к вторичным инфекциям [38]. Для всехгерпесвирусовлососёвыхтемпературах от 5 до 15характерна0высокаярепродукцияпринизкихС, в зависимости от вида вируса. Клиническиепроявления и патогенез отличаются при разных герпесвирусных инфекцияхлососёвых, при этом общим является преимущественное поражение кожи, кромеSalHVD1, при которой основным органом мишенью отмечается.Герпесвирусная болезнь лососёвых, возбудитель -герпесвируслососёвых 1 типа. Впервые Herpesvirus salmonis (HPV) выявлен в 1971-75 гг.
унерестящейся радужной форели Оncorhynchus mykiss в США в штате Вашингтон[203, 204]. Через 10 лет в Калифорнии у стальноголового лосося был выделенSteelhead herpesvirus (SHV) [60, 97], который также как и HPV отнесён к 1 типувида Herpesvirus salmonis [58], отнесённый позднее к роду Salmonivrus [102]. УSalHV1 как и других членов семейства Alloherpesviridae узкий круг хозяев [49].Восприимчивы к вирусу помимо радужной форели и стальноголового лососячавыча, семга. Речная форель и кижуч не восприимчивы [60]. HPV выделен изяичников и семенной жидкости радужной форели. Наличие вируса в яичниках исеменной жидкости указывает на опасность при вертикальной передачи.Предполагается также горизонтальная (через воду) передача инфекции [59].Тяжесть болезни уменьшается с возрастом.17Диаметр капсида 90-95 нм. икосаэдрической формы, вирион- 230 нм [96,97].
Особенность вируса в репликации вируса при температуре 10 0С и ниже.Синцитии образуются даже при 00С [96]. Вирус размножается только в клеточныхлиниях лосося или родужной форели RTG-2, CHSE-214 [97]. В клетках тканевыхкультур наблюдаются внутриядерные включения типа Каудри [60] и образованиесинцития. Репликация наблюдалась при 5-100С. При 15С размножение вирусазамедлено, при более высокой температуре репликация прекращалась [97].Явные клинические признаки наблюдались только в экспериментах послеинъекции вируса малькам форели. На 16 сутки наблюдали первые признаки мукоидные нити из анального отверстия, на 21 день пучеглазие и увеличенноебрюшко, на 25 день первая гибель.
У больных рыб наблюдались отказ от корма,вялость, нарушение координации движения, некоторые мальки лежали на боку ина спине. Пигментация у некоторых мальков была аномально тёмная, а жабрыбледные. В области глаз кровоизлияния, экзофтальм. Внутренние органыпогибающих рыб были бледными и дряблыми. В брюшной полости наблюдаласьасцитная жидкость, у некоторых она была студенистая. Печень пятнистая, почкибледные, передний отдел ЖКТ (желудок и двенадцатиперстная кишка) лишёнпищи [203].Гистопатологические изменения выражались в вакуолизации цитоплазмыклеток печени,десквамации эпителиальных клеток кожи, бледных пятнах,отёчности, гипертрофии и кровоизлияниях в жабрах некоторых образцов [203].Мышечные волокна сердца с утратой поперечно-полосатой исчерченности.
Вголовном мозге от незначительного до умеренного отёк. Признаков патизмененийв репродуктивных органах не наблюдалось. В переднем отделе кишечникапатизменений не выявлено, а в заднем – явно выражены: десквамация, некрозслизистой. В селезёнке – отёк. В печени наибольшие патизменения: отёк, некроз,кровоизлияния. В гепатоцитах вакуолизация цитоплазмы и диффузный некроз,дилатация синусоидов.
Тяжесть изменений в почках увеличивалась от переднегоотдела к заднему. Преимущественно в заднем отделе в просвете канальцевсерозный экссудат, обломки клеток. Клубочки слегка отёчны. В поджелудочной18железе наблюдалась синцитий образование. В некоторых случаях синцитиисостояли из 20-30 ядер. В скелетных мышцах у некоторых рыб кровоизлияние инекроз. В крови 10-13% незрелых эритроцитов[96].При введении вируса парентерально, обширные дегенеративные измененияи значительные количества вируса в почках, печени, и кишечнике показывают чтоинфекция носит генерализованный и системных характер [203].Для постановки диагноза применяется реакция нейтрализации, ПЦР [59].Герпесвирусная болезньлососевых,возбудитель –герпесвируслососёвых 2 типа.
Впервые SalHV2 описан Sano T (1976). В 1978 г. вирусвыделен из овариальной жидкости Симы, Оncorhynchus Masou (OMV) в Японии[59, 178, 184]. В дальнейшем герпесвирусы выделяли от других видов лососёвыхрыб: NeVTA, [20,174, 179]; YTV, [20, 175, 179]; OKV, [20, 126]; CSTV илиCOTV, [169], CHV[125]; RKV [187]; RHV, [169]. При этом все штаммы имеютсходные с ОMV молекулярные, генетические и патогенные свойства, что даётоснование относить их к одному виду Salmonid Herpesvirus 2 [24].Болезнь (OMVD) имеет две формы: острую, диссеминирующую –первичная инфекция и опухолевую -рецидивирующую.