Автореферат (1151600)
Текст из файла
На правах рукописиЕлеев Эльдар ЛеонидовичПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ У ОСЕТРОВЫХ РЫБ ПРИЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ И СПОНТАННОЙ ГЕРПЕСВИРУСНОЙИНФЕКЦИИ06.02.01 Диагностика болезней и терапия животных,патология, онкология и морфология животныхАВТОРЕФЕРАТдиссертации на соискание ученой степеникандидата биологических наукМосква – 2018РаботавыполненавФедеральномгосударственномбюджетномобразовательном учреждении высшего образования «Московская государственнаяакадемия ветеринарной медицины и биотехнологии – МВА имени К.И. Скрябина»Научный руководитель:Грищенко Леонид Ивановичдоктор ветеринарных наук, профессорОфициальные оппоненты:Капустин Роман Филипповичдоктор биологических наук, профессоркафедры морфологии и физиологииФГБОУВО«Белгородскийгосударственнй аграрный университетимени В.Я.
Горина»Казарникова Анна Владимировнадокторбиологическихнаук,и.о.заведующей лаборатории ихтиологииФГБУН «Федеральный исследовательныйцентр Южный научный центр Российскойакадемии наук»Ведущая организация:Федеральное государственное бюджетноеучреждение «Федеральный центр охраныздоровья животных» (ФГБУ «ВНИИЗЖ»)Защита состоится «19» июня 2018 г. в___на заседании диссертационного совета Д220.042.02 при ФГБОУ ВО МГАВМиБ – МВА имени К.И. Скрябина по адресу:109472, г.
Москва, улица Академика Скрябина, д. 23. Тел: 8(495)377-93-83.С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ФГБОУ ВО «МГАВМиБ– МВА имени К.И. Скрябина» по адресу:109472, г. Москва, улица АкадемикаСкрябина, д. 23. и на сайте: www.mgavm.ruАвтореферат разослан «__»___________2018 г. и размещён на сайте ФГБОУ ВОМГАВМиБ – МВА имени К.И. Скрябина: http://www.mgavm.ru и на сайте ВАК приМинистерстве образования и науки РФ: http://vak.ed.gov.ruУченый секретарьдиссертационного совета Д 220.042.02,кандидат ветеринарных наук, доцентАбрамов Павел Николаевич1.ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫАктуальность темы.
Осетроводство является важной отраслью мировойаквакультуры. При этом, как и при культивировании других видов рыб, важнымилимитирующими факторами развития осетровых хозяйств являются болезни, изкоторых большую опасность представляют вирусные инфекции (Winton, J. R., 2016).В настоящее время у осетров выделено около 10 видов вирусов, входящих всемейства Adenoviridae, Papovaviridae, Iridoviridae и Alloherpesviridae.
Почти все ониобнаружены в Северной Америке, главным образом в Канаде и США, а также вЕвропе (LaPatra S.E. et al., 2014; Hanson, L. et al., 2011, 2016; Hedrick, R.P. et al., 1990,1991; Yu-ping Hua, Di Wang, 2005; Watson, L.R. et al., 1995).В России до недавнего времени инфекционным болезням, особенно вирусныминфекциям осетровых рыб, уделялось мало внимания. Литературные данныепоказывают, что преимущественно изучались незаразные, инвазионные болезни ибактериальные инфекции (Акимова Н.В.
и др., 2004; Казарникова А.В., 2007;Микряков В.Р. и др., 2009; Наумова А.М. и др., 2012; Bauer, O.N., Voronin V.N., 2001;Galeotti M. et al., 2015). Только в 2006 г., после выделения герпесвируса отсибирского осетра (Acipenser baerii) в одном из хозяйств Европейской части РФ,появились первые научные работы на данную тему (Щелкунов А.И., Щелкунов И.С.,2010; Щелкунов И.С.
и др. 2007). В течение последних лет изучены молекулярногенетические,физико-химическиеибиологическиесвойствавыделенногогерпесвируса (Калабекова Ф.С., 2012; Прокаева И.Б., 2012; Shchelkunov I.S. et al.,2009;Shchelkunov I.S., 2010). Он отнесен к роду Ictalurivirus семействаAlloherpesviridae порядка Herpesvirales. Наиболее хорошо он репродуцируется вперевиваемых культурах клеток сибирского осетра SSO-2 и белого осетра WSS-2 притемпературе 15оС. Установлено, что данный вирус обладает тропизмом к эпителиюобщего (кожного) покрова и в наибольших количествах накапливается в слизи.Степень разработанности теми. В зарубежной литературе описаны восновном клинические признаки и патологоанатомическиеизменения пригерпесвирусных инфекциях американских осетровых рыб, а также имеются краткиесообщения о патогистологических изменениях (общего) кожного покрова уамериканских белого и тупорылого осетров (Acipenser transmontanus, Acipenser3brevirostrum) (LaPatra S.E.
et al., 2014; Watson, L.R. et al. 1995). В тоже время, пригерпесвирусной инфекции сибирского осетра и его гибридов патоморфологическиеизменения практически не изучены, а сведения о патогистологических изменениях влитературе отсутствуют,что препятствует расшифровкепатогенеза, раскрытиюсущности данной болезни и определению ее нозологической принадлежности.Цель и задачи исследований. Цель работы - установить патоморфологическиеизменения и патоморфогенез при экспериментальной и спонтанной герпесвируснойинфекции осетровых рыб.Для достижения цели были поставлены следующие задачи:изучить патоморфологические изменения при герпесвирусной инфекциисибирского осетра, вызванной штаммом SK 1/0406 и изолятом SIz6/0311 вэкспериментальных условиях;изучить патоморфологические изменения при герпесвирусной инфекциигибрида русского и сибирского осетров, вызванной штаммом SK 1/0406 вэкспериментальных условиях;провести сравнительную оценку патогенного действия штамма SK1/0406 и изолята SIz6/0311 при экспериментальном заражении сибирского осетра иего гибрида с русским осетром;изучить патоморфологические изменения при спонтанномтечениигерпесвирусной инфекции осетровых рыб в сравнении с её проявлением вэкспериментальных условиях;раскрыть основные стороны патогенеза болезни и установить критериидля разработки ее диагностики.Научнаяхарактеристикамикротруктурныеновизнаисследований.Впервыеклинико-морфологическойизмененияворганахданакартины,принаиболееподробноестественномполнаяизученытечениииэкспериментальном воспроизведении герпесвирусной инфекции сибирского осетра иего гибрида с русским осетром, раскрыты основные стороны патоморфогенезаболезни.
Установлено, что изученные изоляты герпесвируса, выделенные от больныхосетров из разных регионов, обладают аналогичными патогенными свойствами,вызывают у естественно больных и экспериментально зараженных рыб сходныепатологоморфологические изменения. Герпесвирусная инфекция сибирского осетра4вызывает тяжелые дистрофические и некротические изменения не только общего(кожного) покрова, но и внутренних органов: печени, почек, кишечника, чтопозволяет рассматривать ее как системную (генерализованную) форму болезни.Теоретическая и практическая значимость работы.Полученные результаты комплексных патоморфологических исследованийвносят вклад в сравнительную патологию герпесвирусных инфекций животныхразных систематических групп: рыб разных таксонов, а также высших позвоночныхживотных.Научно обосновано и экспериментально подтверждено положение о том, чтогерпесвирусную инфекцию сибирского осетра следует считать самостоятельнойнозологической единицей – «герпесвирусная болезнь сибирского осетра», этопозволяет включить её в национальный перечень опасных болезней животных.Установлены характерные клинические и патоморфологические признаки болезни:десквамативный дерматит, очаговая гиперплазия эпидермиса, стабильное появлениеузелковых утолщений кожного покрова в виде бляшек на разных участках тела иплавниках, пятнистые кровоизлияния в жучках, некротический распад эпидермиса иобразование мелких язв, белковая дистрофия и фокальный некроз паренхимы печени,гиалиново-капельная дистрофия эпителия мочевых канальцев, катаральный энтеритспиральной кишки и др.
Они являются базовыми для постановки предварительногодиагноза.Окончательнуюдиагностикугерпесвируснойболезниследуетосуществлять комплексно с обязательным выделением вируса и его идентификациисуществующими методами.Полученныеврезультатеисследованийматериалыиспользуютсяв«Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии –МВА имени К.И. Скрябина» при проведении практических занятий и чтении лекцийпо дисциплинам: «Болезни рыб» и «Вирусология».Методология и методы исследования. Для достижения цели и поставленныхзадач использованы общепринятые методические приёмы, позволяющие получитьдостоверные результаты.
В работе применяли современные вирусологические(постановка биопробы, вирусовыделение, расчёт титра вируса), гистологические,электронно-микроскопические методы исследований.5Положения, выносимые на защиту:1.Течение,клиническиепризнаки,патолого-анатомическиеимикроструктурные изменения при экспериментальной герпесвирусной инфекциисибирского осетра.2.Патоморфологическиеизмененияприестественномтечениигерпесвирусной инфекции.3.Системное патогенное действие герпесвируса на организм сеголетковсибирского осетра и его гибрида с русским осетром.4.Результаты комплексных исследований в диагностике и расшифровкепатоморфогенеза герпесвирусной болезни осетровых рыб.Апробация работыОсновные положения выполненной работы доложены: на Международнойучебно-методической и научно-практической конференции «Актуальные проблемыветеринарии, зоотехнии и биотехнологии» (МГАВМиБ имени К.И.
Скрябина,Москва, 2014 г.), IV Международной конференции «Проблемы иммунологии,патологии, охраны здоровья рыб и других гидробионтов» (Борок – Москва, 2015 г.).Объём и структура диссертации. Диссертация состоит из следующихразделов: введение, обзор литературы, результаты собственных исследований,заключение, список литературы, приложения.Она изложена на 121 страницах текста и включает 13 таблиц, 65 рисунков.Список использованной литературы состоит из 212 источников, из них 193иностранных.Благодарности.Автор выражает благодарность научному руководителюГрищенко Л.И.
за всестороннюю помощь, профессору кафедры радиобиологиивирусологии имени академиков А.Д. Белова и В.Н. Сюрина д.б.н., профессоруЯрыгиной Е.Н., к.в.н., зав. кафедрой общей патологии Илиешу В.Д. за постоянныеконсультации; сотрудникам лабораторий: здоровья гидробионтов и биофизики ГНУ«ВНИИВВиМ», сотрудникам центра коллективного пользования электронноймикроскопии ФГБУН «Института биологии внутренних вод им.
И.Д. Папанина РАН»за помощь и поддержку в отдельных этапах работы.2.СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ2.1 Материалы и методы6Работа выполнена в 2011 – 2016 гг. на кафедре мелкого животноводстваМГАВМиБ – МВА имени К.И. Скрябина и частично на базе лаборатории здоровьягидробионтов ГНУ ВНИИВВиМ РАСХН и ФГБУН ИБВВ им. И.Д. Папанина РАНвпорядке творческого сотрудничества. Эксперименты проводили в аквариальнойГНУ ВНИИВВиМ по единой схеме (рис.1).Объекты исследованияГибрид русского исибирского осетровСибирский осётрОпыт 2Опыт 1Контрольнаягруппа (n=6)Опытная группа(n=20)Заражение(штамм SK1/0406)Контрольнаягруппа (n=10)Опыт 3Естественнобольныерыбы (n=100)Опытнаягруппа (n=40)Заражение (изолятSIz6/0311), опыт 2Заражение(штаммSK1/0406), опыт 3Ежедневное наблюдение, регистрация симптомов и патизмененийОтбор больных рыб для патологоанатомического вскрытия ификсации патматериалаМетоды исследованийОпыт 1Опыт 2Патоморфологические исследованияОпыт 3Патоморфологические исследованияВирусологические исследованияВирусологические исследованияБактериологические исследованияБактериологические исследованияЭлектронно-микроскопические исследованияРис.
1. Схема проведения исследованийМатериалдляпатоморфологическихисследованийбылсобранотэкспериментально заражённых и естественно больных герпесвирусной инфекциейсеголетоксибирскогоосетраиегогибридасрусскимосетром.Дляэкспериментального воспроизведения герпесвирусной болезни поставлено 3 варианта7опытов. Опыт 1 поставлен нами самостоятельно с проведением всего комплексаисследований:экспериментальных,вирусологических,патоморфологических,бактериологических, электронно – микроскопических, гидрохимических.
Характеристики
Тип файла PDF
PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.
Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.