Диссертация (1151526), страница 8
Текст из файла (страница 8)
Это связано стем,чтодревесинаобладаетгигроскопичностьюинекоторымиантибактериальными свойствами (Fries et al., 2005). Хотя есть мнение, что самаподстилка не оказывает существенного влияния на микрофлору кишечника, аважную роль играет микрофлора корма, воды и окружающей среды. Этоподтверждает тот факт, что не было достоверной разницы живой массы прииспользовании различных подстилочных материалов (Aktan, Sagdic, 2004).Полученныеданныесвидетельствуюотом,чтозакислениеподстилочного материала вызывало снижения уровня синтеза аммиака и числааммонифицирующих бактерий, таких как Proteus spp., Pseudomonas spp.и E.coli.Выращиваниецыплятназакисленнойподстилкеснижалоколичествокишечных Campylobacter spp.
в слепых кишках, Clostridium perfringens,Enterococcus spp. и Lactobacillus spp. в подвздошной кишке без негативныхпоследствий на рост и здоровье цыплят (Line, 2002; Garrido et al., 2004).Также по данным (Torok et al., 2011) выявлено, что состав микробногосообщества подвздошной кишки у цыплят, выращенных на различныхрационах, колебался в зависимости от его состава. Так у цыплят, выращенныхна пшеничном рационе, наблюдалось на 8-10% больше разновидностейбактерий, чем у таковых на сорго. Связанные с ростом цыплят бактериипреимущественно относились к филотипу Firmicutes, а также Bacterioides иProteobacteria,родамEnterobacteriaceae,ClostridialesLachnopriraceae,иLactobacillales,Enterococcaceae.Средисемействамлактобациллдоминировали Lactobacillus salivarius, Lactobacillus aviaries, Lactobacilluscrispatus.Обнаруживалиськлостридии,40синтезирующиепропионаты(Сlostridium leptum) и бутираты (Clostridium coccoides), и Clostridiumlactatifermentis, синтезирующий ацетат (Vanden Abbele et al., 2010).
В то жевремявсодержимомGallibacteriumanatis,слепыхспособныйкишокцыплят-бройлероввызыватьсистемныеобнаруженыинфекционныезаболевания птиц, подобно патогенным штамма E.сoli (Bjorsen et al., 2003).Данные метагеномного анализа (Torok et al., 2011) показали, чтоскармливание антибиотика авиламицина бройлерам оказывало влияние набактериальные сообщества слепых кишок. Количество Subdoligranulum spp.увеличивалось по сравнению с контрольной группой, кроме того обнаруженыразличия в сообществах лактобацилл.
У птицы опытной группы в содержимомкишечника преобладали L.reuteri и L. crispatusв то время как в контрольнойгруппе большинство лактобацилл относились к L. johnsoni и L.salivarius.Авиламицин способствовал снижению бактериального разнообразия слепыхкишок, уменьшая количество как патогенов (Klebsiella spp., Enterobacteriaceae),так и полезных бактерий (Ruminococcaceae, Bacteria).Интересным фактом является то, что бактерии способны «общаться» другс другом, используя химические сигнальные молекулы. Это явление позволяетмикрофлореорганизмаизменятьплотностьпопуляции,концентрациюпитательных веществ и координировать экспрессию гена всего сообщества вответ на изменения в условиях биологической ниши (Schauder, Bassler, 2001).Большинство грамотрицательных бактерий используют N- ациклосеринлактон(AHL) в качестве сигнала о контролировании численности популяции.Подобный luxR белок ответственен за узнавание аутоиндуктора AHL, что вдальнейшем активизирует транскрипцию генов-мишеней.
В целом, каждаябактериальнаяклеткавпопуляциипроизводитAHL,возрастающийпропорционально с плотностью популяции. Выше пороговой концентрациигомолог luxR связывает AHL и активирует транскрипцию целевых генов(Michaeletal.,2001).Множествобактериальныхразновидностейрегулировались AHL, включая передачу коньюгативной плазмиды, синтез41белка, цитотоксинов, антибиотиков, формирование биопленки и подвижности.Однако, Escherichia coli, Salmonella enterica и Klebsiella spp.
не синтезируютAHL, но имеют sdiA гомолог. Функциями вирулентности управляет лишьтранскрипционный фактор, поэтому факт «общения» данных патогенов недоказан. Но у симбионтных бактерий, таких как Lactоbacillus и Bacillus cereus,были обнаружены luxS гомологи, регулирующие транскрипцию генов E.coli0157, при этом уйдя от их токсичности (Auger et al., 2006; Leeber et al., 2007).2.1.4. Заключение по обзору литературыВ заключение хотелось бы отметить, что до 2008 года в России весьанализ микрофлоры желудочно-кишечного тракта цыплят-бройлеров былоснован на методах классической бактериологии (Георгиевский, 1990; Зон,1992). Ранее было отмечено, что такие методы имеют много недостатков, что непозволяет объективно сделать выводы о структуре микробного сообществаисследуемой пробы, что является проблемой в медицине, ветеринарии,почвоведении (Лаптев, 2012; Арсенюк и др., 2013).
По этой причине внастоящий момент необходимо использовать новый подход. Развитиеметагеномных методов позволяет сделать заключение о составе микробныхсообществ, минуя стадию культивирования. Одним из наиболее перспективныхна сегодняшний день является T-RFLP (Terminal restriction fragment lengthpolymorphism) – молекулярно-биологический метод для изучения структурымикробной экосистемы. Данный метод является быстрым и воспроизводимым,позволяет проводить качественное и количественное сравнение микробныхсообществ по наличию или отсутствию определенных пиков на T-RFLPграммах и дает возможность осуществить идентификацию микроорганизмов.На основе таких данных можно проводить коррекцию рационов длядальнейшего улучшения состояния здоровья и повышения продуктивностиптицы.422.2.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ2.2.1. Методика проведения научно-хозяйственных опытовДля достижения поставленных задач в 2013-2015 гг. в отделе кормленияФГБНУ Всероссийский научно-исследовательский и технологический институтптицеводства (ФГБНУ ВНИТИП), в виварии ФГУП «ЗагорскоеВНИТИП»ЭПХи на базе лаборатории молекулярно-генетических исследованийООО «Биотроф+»было проведено 3 научно-практических опыта и однапроизводственная проверка на цыплятах-бройлерах кросса «Cobb 500», всего на12 группах (945 гол.).В период опытов цыплят выращивали в клеточных батареях типа Р-15 ссуточного до 36-дневного возраста.
Опытные и контрольные группыкомплектовали в суточном возрасте цыплятами-аналогами по живой массе по70 голов в каждой группе и по 35 цыплят в одной клетке. Технологическиепараметры выращивания соответствовали рекомендациям ВНИТИП, 1999 г.(Ресурсосберегающая технология производства бройлеров, 1999). Доступптицы к корму и воде был свободным. Для кормления птиц опытных иконтрольных групп применяли полнорационные комбикорма в виде россыпи спитательностью согласно рекомендациям по работе с кроссом «Cobb 500»(Cobb broiler management guide, 2010). Параметры микроклимата, плотностьпосадки, фронт кормления и поения во всех группах были одинаковыми.Целью нашего исследования являлось изучение состава микрофлорыжелудочно-кишечного тракта цыплят-бройлеров в возрастной динамике взависимости от состава комбикорма, наличия в нем кормового антибиотика ипробиотика.В качестве антибиотика использовался препарат Стафак-110 (PhibroAnimal Health Corporation, CША).
Он обладает бактериостатическим, а ввысоких концентрациях – бактерицидным действием в отношении большинстваграмположительныхинекоторыхграмотрицательных43бактерий.Припероральномвведениидействующеевещество–вирджиниамицинневсасывается в желудочно-кишечном тракте и не подвергается воздействиюпищеварительных ферментов, поэтому создается его высокая концентрация,что способствует длительному антимикробному действию в желудочнокишечном тракте.
Вирджиниамицин не накапливается в органах и тканях, изорганизма выводится в неизменном виде с фекалиями.В качестве пробиотика использовался Целлобактерин – Т (ООО«Биотроф+», Россия) – препарат комплексного действия, созданный на основеассоциации микроорганизмов, выделенных из рубца жвачных. Содержитцеллюлозолитические и молочнокислые бактерии и обладает свойствамипробиотикапрофилактическогоназначенияисвойствамиферментногопрепарата. Бактерии, входящие в состав ассоциации, образуют ферменты,способные гидролизировать некрахмалистые полисахариды – ксиланазы,целлюлазы, пектиназы и бета-глюканазы.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
