Диссертация (1151313), страница 24
Текст из файла (страница 24)
Была проведена серияуглублённых экспериментов на пробах крови объёмом 5 мл (воздействие разными частотамимодуляции с шагом 2 Гц и экспозиции с шагом 15 с, обсчёт 10 мазков на каждую точку), пока небыло точно установлено, что отличие от остальной массы животных достоверно. Впоследствииоказалось, что обе кобылы жерёбые (срок не более месяца) — но нового хозяина заводчик обэтом не предупредил. Главная обнаруженная особенность — повышенная агрегация присохранении целостности клеток. По-видимому, это может быть связано с изменением вязкостикрови жерёбых животных на ранних сроках и, безусловно, общим изменением химическогосостава крови.Физиологические особенности воздействия ультразвука на клетки кровижерёбых кобылУдалось выявить некоторые особенности в ответе клеток крови на действие амплитудномодулированного УЗ терапевтической интенсивности 0.05–0.2 Вт/см2.
Ниже приведены примерызарегистрированных цитоморфологических эффектов.0.05 Вт/см2.10 Гц, время 15–30 с: сохранны только сегментоядерные нейтрофилы, почти отсутствуютлимфоциты; лейкоциты и тромбоциты в группах и слепках, много лейкоцитов с лизисом ядраи цитоплазмы. 45 с: слишком хорошо видна зернистость гранулоцитов. Большие группытромбоцитов.12 Гц, 45 с: единичные лимфоциты, лейкоциты в группах с лизированым ядроми цитоплазмой, тромбоцитов нет. Лейкопения, лейкоциты в группах, деформация ядер.14 Гц, 15–30 с: лейкоциты в группах, у лейкоцитов лизированы ЦПМ и ядро, нет границядра и ЦПМ.
45 с: лейкоциты в больших группах, агрегация клеток.16 Гц, 20–30 с: группами и одиночно лежащие клетки с признаками деформации и лизисаядра и цитоплазмы; 40 с — лейкопения.20 Гц, 20 с: лейкоциты в группах, изменение формы и границ ядер, тромбоциты в группах.30 с: одиночно лежащие клетки с признаками деформации и лизиса ядра и цитоплазмы.
45 с:группами лежащие клетки с признаками деформации и лизиса ядра и цитоплазмы.11030 Гц, 20 с: лейкоциты относительно сохранны, можно различить вид, но деформированыили лизированы ядра, встречаются группами по 2–5 клеток. 40–60 с: лизис лейкоцитовтотальный, лейкоциты в агломератах.40 Гц, 20–30 с: нет сохранных лейкоцитов.
40 с: «гантели» эритроцитов, лейкоцитовв мазках очень мало, у единичных клеток признаки лизиса.60–80 Гц, 20–40 с: в мазках крови особенностей нет.90 Гц, 15 с: лейкоциты почти отсутствуют. 45 с: тромбоциты в группах, «гантели». 60 с:мелкие сгустки крови в пробах при облучении.100 Гц, 15–45 с: лейкограмма без особенностей. 60 с: «гантели» эритроцитов.150 Гц, 15–60 с: лейкограмма без особенностей; 60 с: мелкие сгустки крови в пробах приоблучении.200 Гц, начиная с 50-секундной обработки: «гантели» эритроцитов. Лейкограмма безособенностей.250–400 Гц, 15–45 с: лейкограмма без особенностей. 300 Гц, 40 с: микроагрегациялейкоцитов.500 Гц, 15 с: группы лейкоцитов. 30 с: очень большие группы лейкоцитов, «тени»эритроцитов.
45 с: гиперагрегация лейкоцитов.600–750 Гц, 15–50 с: без особенностей.800 Гц, 20 с: разрыв ядер и ЦПМ; клетки невозможно идентифицировать.900–1000 Гц, 15–45 с: мазки крови без особенностей.1100 Гц, 30 с: агрегация лимфоцитов. Очень большие группы.1200 Гц, 15–30 с: мазки крови без особенностей.1400 Гц, 15–30 с: изменений нет.10 000 Гц, 30 с: упорядоченное расположение эритроцитов.
Картина схожа с поведениемклеток крови в СЭП.100 000 Гц, 30 с: «соты» эритроцитов, остальные клетки без видимых изменений, но«ведут себя» как в СЭП.0.2 Вт/см2.20–50 Гц, 10–30 с: лизис лейкоцитов. 30–60 с: «гантели» эритроцитов.50–58 Гц, 15–30 с: особенностей нет.60 Гц, начиная с 25 с обработки: «гантели» эритроцитов. Лейкоциты без особенностей.200 Гц, 45 с: «гантели» эритроцитов.800 Гц, 25 с: красивые фигуры из эритроцитов: «соты», «тяжи».1111000 Гц, 15–30 с: без особенностей.Физиологический и цитоморфологический эффект ультразвуковой волны наклетки крови лошадейОпыт по действию амплитудно-модулированного УЗ на клетки жерёбых кобыл показал,что физиологический и биофизический эффекты воздействия несколько отличаются отостальных случаев. Так, интенсивность 0.05 Вт/см2, 10 Гц, время 15–30 с у жерёбых направленновоздействует на лимфоциты.
В остальном направление действия было таким же: лизис ядра,цитоплазмы и нарушение целостности ЦПМ всех лейкоцитов.При интенсивности 0.05 Вт/см2, 800 Гц при совпадении временно́й экспозиции (20 с),направление воздействия совпадало, но, по-видимому, результат наступал раньше, так как объёмкрови, облучаемой УЗ, в случае жерёбых кобыл был в 2 раза меньше. А при воздействиис параметрами 0.2 Вт/см2, 1000 Гц, 15–30 с, на те же 5 мл крови жерёбых кобыл никакихэффектов вообще не последовало, тогда как у прочих лошадей почти половина клеток былализирована уже при 30-секундной обработке 10 мл крови: чтобы не потерять возможныхминимальных изменений в пределах лейкограмм, было решено увеличить объём крови в даннойсерии опытов.
Без ущерба для здоровья животных такой объём крови можно было получитьтолько от лошадей.Выявленные характерные признаки воздействия модулированного УЗ на клетки кровилошадей 7–8 лет даны в таблице 25.Таблица 25. Действие модулированного УЗ на клетки крови лошадей 7–8 лет (объём крови 10 мл)I,ν,t, с ПСМЛЭБПримечаниеВт/см2ГцКонтроль, ± 0.26.1 60.4 2.3 30.6 3.0 1.0—Много тромбоцитов, не должны краситься этой0.0510180 732114721краской, а прокрашены.Все клетки в мазке.
Лейкоциты в «слепках»,разрушение ЦП, нет границ клеток, порвана ЦПМ.300 211620—2Ядра вне клеток, в «мути» нет ЦПМ. Нарушениецелостности ЦПМ.Большинство клеток не идентифицируемы. Разрыв80020 —7291— —ядер и ЦПМ. Наиболее сохранны лимфоциты.40 —18478— — 70% всех клеток не подлежат идентификации.90 ——1733— — Деформация ядер и ЦПМ. 50 клеток в мазке.Дегенеративныеизменениясегментоядерных0.21020–22–301511 нейтрофилов.
«Слепки». Ядра без признаков лизиса.7065Анизоцитоз, «гантели».Начиная с 40 с — разрушение ядер. Сегментоядерные20–1–нейтрофилы дегенеративно изменены. В группах608112—6613клеток, с лимфоцитами. Лейкоциты в «слепках».Лизис.75870101124 Все стадии разрушений лейкоцитов.112I,Вт/см2ν,Гцt, с90180520459010000.41030604020902040304020402040502040606070204020908020409040609010060ПСМЛЭБПримечаниеВсего 41 клетка.
Все лейкоциты лизированы. Измененыядра и ЦПМ.Дегенеративныелейкоциты,сохраннымалые814—20— —лимфоциты. Все клетки в мазке.25 клеток можно идентифицировать: 90% клеток2311612в мазке изменено. Разрушены даже ядра.Очень много дегенеративных клеток с разрушенными25151—ядрами и ЦПМ. Расположены группами и единично.До 40% всех лейкоцитов лизированы. Наиболее32166415сохранены лимфоциты.Идентифицировать можно только лимфоциты.
Разрушены ЦПМ.После 30 с было: единичные разрывы ядерлимфоцитов. У остальных ядра и ЦПМ практически—464482—без изменения. разрушено примерно 50% лимфоцитов.Взрыв ядер.—397513— Изменение ядер у всех видов от деформации до взрыва.Хорошосохраненазернистостьэозинофилов;36722431деформация большого количества клеток.50%клетокразрушеныи неподдаются5359501— идентификации.Наибольшиеизмененияв лимфоцитах — до 30%.Изменения 20–40% клеток, от деформации ядер и ЦПМ—6013621до разрыва ядер. Наиболее выражено у лимфоцитов.247348— — деформация и разрушение лейкоцитов 40%.«Гантели».
Только 42 клетки. Изменены 40%:—19122— — деформация и лизис ядер. Деформация и агрегациясегментоядерных нейтрофилов.90% клеток деформированы и разрушены. Из оставшихся определяемы только лимфоциты.Деформация ядер. «Гантели». Очень крупные тромбоциты.22146021 70% клеток изменены, не подлежат идентификации.80% клеток изменены. Самые сохранные малые—29269— —лимфоциты.Лейкопения. 80% клеток изменены и не идентифицируемы. Различимы только малыелимфоциты до 19 клеток на весь мазок.Изменены все виды клеток.
Деформация ядер.—47350— —Разрежение.—39358— — 50% клеток не подлежат идентификации.Изменено до 50% лейкоцитов. У лимфоцитов разная4251159—1степень разрушения.50% не идентифицируемы. Остальное — деформация—24—76— —клеток и ядер.50% лейкоцитов изменены, разрушены или сильно2554372—деформированы.Очень крупные лимфоциты. Почти у всех клеток139753— — деформированы ядра и ЦПМ. Разрушена ЦПМ толькоу лимфоцитов (10%).30% клеток не дифференцируемы.