Диссертация (1151313), страница 20
Текст из файла (страница 20)
При низкой интенсивности 0.01–0.1 Вт/см2обнаруживали по 4–8 клеток в ассоциациях. При более высоких дозах УЗ наблюдали скоплениеиз множества клеток, вплоть до сгустков. Под действием стоячих волн при интенсивности 0.05–0.4 Вт/см2 из лейкоцитов выходил практически важный метаболит ИФН [307]. Подавлениесвечения бактерий A. fischeri вызывало действие УЗ интенсивностью выше 0.7 Вт/см2, а ростакультуры клеток MDBK — 0.2 Вт/см2. Под действием УЗ интенсивности 0.7 Вт/см2 с ростомэкспозиции регистрировали разрушение эозинофилов и базофилов, а также агрегациюсегментоядерных нейтрофилов.
Результаты воздействия могут свидетельствовать о направлениивлияния УЗ на ЦПМ. Отличие в выявленных диапазонах, спектрах и длительностях воздействиядля достижения одинаковых эффектов в бактериальных и животных клетках обусловлено, понашему мнению, структурой, составом и разной толщиной ЦПМ.Здесь и далее в лейкограммах: Б — базофилы, Л — лимфоциты, М — моноциты, Н — нейтрофилы: П —палочкоядерные, С — сегментоядерные; Э — эозинофилы, Ю — юные.286Физиологические особенности воздействия непрерывного УЗ на мембраны клетоки клетки в целом на фотографиях мазков крови лошадей (рисунок 20).Некоторые примеры цитоморфологических эффектов:0.05 Вт/см2, 40–50 с.
Лейкограмма без особенностей, но от 5% (обработка 40–45 с) до 20%(50 с) лейкоцитов с изменённой ЦПМ. Лизис ЦПМ после 60 с обработки. После 75 с инсонациинаблюдается лейкопения;0.2 Вт/см2, 15–45 с. Лейкограмма без особенностей, но происходит изменение объёмацитоплазмы лимфоцитов по сравнению с контролем. 0.2 Вт/см2, 60 с. У 20% сегментоядерныхнейтрофилов и эозинофилов лизис ЦПМ. Остальные виды лейкоцитов без особенностей.Изменения лейкограмм в пределах референтного ряда;0.4 Вт/см2, С 15 (рисунок 20а) до 45 с — разная степень изменения в ядрах лимфоцитови объёма их цитоплазмы 30 с (рисунок 20б). Лейкограмма без особенностей. Начало разрушениялейкоцитов;0.7 Вт/см2, с 15–20 с. (рисунок 20в) — начало изменений в ядрах сегментоядерныхнейтрофилах и лимфоцитах; агрегация.1.0 Вт/см2,20 с.ИзменениепроницаемостиЦПМэритроцитови тромбоцитов,разрушение ЦПМ лейкоцитов.
30–40 с. Агрегация тромбоцитов лизис лейкоцитов (рисунки 20ги д). 60 с. Тромбоциты в огромных группах. Сохранны только лимфоциты, но 90% из них безцитоплазмы. Других лейкоцитов в мазке нет. Только в крови лошади под действиемнепрерывногоУЗрегистрировалиизмененияэритроцитов.Так,послеоблученияинтенсивностью 1.0 Вт/см2 более 30 с обнаружены включения в клетки, агрегация.
При этомпроисходили дегенеративные изменения лейкоцитов.Рисунок 20а. Мазок крови лошади. 0.4 Вт/см2, 15 с. Лимфоцит и, возможно, сегментоядерный нейтрофил.8720б. Мазок крови лошади. 0.4 Вт/см2,непрерывный УЗ, 30 с. Сегментоядерныйнейтрофил (вверху) и три лимфоцитас признаками клеточного лизиса и деструкции.20в. Мазок крови лошади. 0.7 Вт/см2, 18 с. Изменение ядерлимфоцитов и сегментоядерных нейтрофилов, агрегациятромбоцитов.20г.
Мазок крови лошади. 1.0 Вт/см2, непрерывный УЗ,30 с. Агрегация клеток. 1. Тромбоциты. 2. Лимфоцитв окружении эритроцитов.20д. Мазок крови лошади. 1.0 Вт/см2,непрерывный УЗ, 40 с. Группы тромбоцитови лизированные лейкоциты.В таблице 11 приводятся результаты взаимодействия клеток крови лошадей возраста 6–8лет с непрерывным УЗ интенсивностью 1.0 Вт/см2. Указанный режим за 10 с мало изменялклетки, тогда как 30-секундная обработка приводила к неожиданным результатам: наблюдали«вакуолизацию» эритроцитов, клетки как бы «вскипали» изнутри. По сравнению с контролемпрослеживаетсясегментоядерных)лимфоцитов.тенденцияк постепенномуи увеличениюабсолютногоуменьшениюнейтрофилов(в основномколичестваагранулоцитов:моноцитов,88Таблица 11.
Результаты действия непрерывного УЗ интенсивностью 1.0 Вт/см2 на лейкоциты лошадей in vitro(M ± m) в зависимости от времени воздействияВремяэкспозиции, сНормаКонтроль, ± 0.21030Э(p > 0.05)Б(p > 0.05)М (p < 0.05)Л (p < 0.05)2–63.02.8 ± 1.00–2(деформация)0–11.01.0 ± 0.52–42.37.4 ± 0.20–1 < 0.2 >8.3 ± 0.3Нейтрофилы25–4430.639 ± 2П(p > 0.05)3–66.14 ± 2 < 3.6 >С(p < 0.05)45–6260.445 ± 247 ± 32–3 < 1.9 >40 ± 2При увеличении времени экспозиции до 1 мин и более направленность измененийлейкограммы сохранялась.
Рост количества агранулоцитов после УЗ воздействия становился ещёболее существенным при обработке образцов крови с различной частотой модуляции(§ 9.2. Результаты изучения действия амплитудно-модулированного ультразвука на клетки кровилошадей на странице 109).§ 8.4. Действие ультразвука минимальной терапевтической интенсивностина лейкоциты здоровых и больных животныхЦелью данного этапа работы было изучение клеточного ответа на действие УЗминимальной из всех применяемых терапевтических интенсивностей и выявление зависимостидоза — эффект.
В опытах участвовали по 4 группы здоровых собак и кошек разного пола,возраста и породы, количество особей в экспериментальных группах — от 7 до 10. Кровьживотных озвучивали с SATA интенсивностью 0.05 Вт/см2 от 15 с до 35 с; несущая частота0.88 МГц, бегущая УЗ волна, режим непрерывный.Результаты изменения процентного соотношения лейкоцитов разного вида в крови собаки кошек разных возрастных групп после облучения приведены в таблицах 12, 13.Таблица 12. Изменение лейкограммы здоровых собак после УЗ обработки интенсивностью 0.05 Вт/см2 (M ± m,p < 0.05)I= 0.05 Вт/см2;I= 0.05 Вт/см2;Контроль, ± 0.2t= 15 сt= 30 с1 гр. 2 гр.
3 гр. 4 гр. 1 гр.2 гр.3 гр.4 гр.1 гр.2 гр.3 гр.4 гр.4.32.94.40.92.41.63.70.7Э4.03.06.01.0± 1.7± 0.6± 1.0± 0.6± 0.8± 0.7± 1.4± 0.74.32.14.61.84.95.44.71.6М5.13.14.01.0± 0.7± 0.8± 0.5± 1.0± 0.7± 0.5± 1.4± 0.70.380.430.670.300.500.431.00Б0.31.001.10± 0.02 ± 0.04 ± 0.05 ± 0.02 ± 0.02 ± 0.03 ± 0.0224.128.646.050.038455255Л23.3 27.2 42.3 41.2± 1.0± 1.3± 1.3± 1.2±4±4±6±5Н П7.12.13.16.36.31.62.45.35.62.42.66.289С61.564.145.249.1± 0.761.0± 1.2± 0.564.4± 1.4± 0.542.1± 1.7± 0.742±2± 0.848±4± 0.541±5± 0.836±4± 1.035±4Таблица 13. Изменение лейкограммы здоровых кошек после УЗ обработки интенсивностью 0.05 Вт/см2 (M ± m,p < 0.05)I= 0.05 Вт/см2;I= 0.05 Вт/см2;Контроль, ± 0.2t= 15 сt= 30 с1 гр.
2 гр. 3 гр. 4 гр. 1 гр.2 гр.3 гр.4 гр.1 гр.2 гр.3 гр.4 гр.3.33.14.722.81.73.72Э4.03.06.03.0± 0.5± 0.9± 1.4±1± 0.9± 0.7± 1.4±13.721.624.63.34.74.8М3.03.01.01.0± 1.4±1± 0.5±1± 0.6± 0.5± 0.7± 1.20.500.470.430.300.430.43Б0.51.00.31.000± 0.02 ± 0.06 ± 0.02 ± 0.04 ± 0.05± 0.0347.548.745.0404950.14764Л45.0 47.0 42.0 41.0± 1.8± 1.9± 1.5±3±2± 1.6±3±25.532.56.42.32.8П6.02.03.06.04–60± 0.5±2± 0.5± 1.0± 0.5± 0.2Н3841.5435036404030С 42.0 44.0 45.0 48.0±4± 1.5±2±2±2±2±2±2На фоне увеличения количества агранулоцитов после инсонации интенсивностью0.05 Вт/см2 в течение 30 с регистрировали постепенное увеличение процентного составагранулоцитов.
При этом у базофилов четвёртой группы наблюдали деформацию и измененияпроницаемости ЦПМ (по данным теста с трипановым синим). Таким образом, указанныепараметры отражают пороговое биологическое воздействие непрерывного УЗ на клетки крови.ПриобработкекровиздоровыхживотныхУЗминимальнойтерапевтическойинтенсивности 0.05 Вт/см² от 5 с до 30 с лейкограмма меняется незначительно.
В таблицах 12, 13приведены пределы крайних колебаний числа лейкоцитов каждого вида внутри одной группыживотных. Чтобы не потерять качественные изменения в лейкограммах больных животных,в таблицах 14–16 даны результаты, полученные индивидуально для отдельных особей. В кровибольных кошек, собак и лошадей было заметно значительное уменьшение числа лейкоцитовв поле зрения мазков уже после 15-секундного воздействия (таблица 14) или резкое изменениепроцентного соотношения в лейкограмме (кошки № 3 и 4; лошадь № 2). Повышение временивоздействия до 20–30 с влекло за собой появление повреждённых клеток, частичную их гибель.Дальнейшее увеличение экспозиции (45–60 с) приводило к «съёживанию» клеток, появлениюклеточных фрагментов, участков из оформленных белковых масс или нетипируемых клеток,лизису клеток, скоплению голоядерных элементов (таблицы 14–16).
У здоровых животных такиеизменения начинали регистрировать лишь при УЗ интенсивности, превышающей 0.2 Вт/см²,и времени экспозиции не менее 20 с.90№особиТаблица 14. Примеры диапазонов изменений лейкограмм больных кошек после обработки крови УЗинтенсивностью 0.05 Вт/см2 (M ± m, p < 0.05) в зависимости от времени обработки—123Время (с)ЭБМЛНормаКонтроль 115 с30 с (в мазке 17–20 клеток)60 с (4 клетки в мазке)Контроль 215 с30 с (67–70 клеток в мазке)60 с (16–19 клеток в мазке)Контроль 315 с30 с60 сКонтроль 415 с30 с60 с (13–15 клеток в мазке)Контроль 515 с30 с (17–21 клеток в мазке)60 с (14–20 клеток в мазке)2–64.1 ± 0.23.0 ± 0.20–12.0 ± 0.22.0 ± 0.51–56.3 ± 0.25.0 ± 0.210005.4 ± 0.24.5 ± 0.20–10НейтрофилыПС36–5320.1 ± 1.514.8 ± 0.21–64.0 ± 0.220 ± 240–4764 ± 356 ± 24–51–28–92–3003–402.1 ± 0.204.6 ± 0.33.0 ± 0.227 ± 219 ± 28.3 ± 0.24.1 ± 0.253 ± 351 ± 3000–1020–227–82–33–442–456–704.0 ± 0.2 12.9 ± 0.523 ± 26.0 ± 0.354 ± 201.8 ± 0.27.1 ± 0.310.8 ± 0.513.6 ± 0.2 67 ± 301.9 ± 0.25.6 ± 0.27.8 ± 0.220 ± 264 ± 301.7 ± 0.23.5 ± 0.214.3 ± 0.42.0 ± 0.278 ± 42.0 ± 0.2 3.9 ± 0.2 10.1 ± 0.336 ± 28.5 ± 0.540 ± 2403.7 ± 0.27.0 ± 0.230 ± 216.6 ± 1.5 43 ± 206.1 ± 0.2 16.1 ± 0.522 ± 213.7 ± 1.0 44 ± 20007–91–23–52.0 ± 0.2 4.0 ± 0.24.0 ± 0.222.4 ± 0.214.3 ± 0.2 44 ± 352.0 ± 0.503.0 ± 0.212.9 ± 0.522 ± 260 ± 30–100–12–30–115–160002–41–211–14Примечание: Кошка 1: 11 лет.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
