Диссертация (1151292), страница 37
Текст из файла (страница 37)
Морфологические (морфофункциональные)2. Репродуктивные.3. Генетические (тестирование на наличие генетических аномалий).4. Микробиологические.На рис. 81 представлен разработанный нами алгоритм оценки качества половых клеток быков-производителей, позволяющий исключать из оборота243неполноценный генетический материал крупного рогатого скота.Рис. 81. Алгоритм оценки качества генетического материалабыков-производителейАлгоритм анализа морфологических параметров.Морфологические параметры позволяют установить соотношение междупроцентом нормальных в структурном отношении форм и фертильностью, гдеморфологически нормальный сперматозоид принадлежит к субпопуляции поло-244вых клеток самца, преобладающих в эндоцервикальной слизи и способных коплодотворению.Последовательность оценки морфологических параметров гамет заключается:а) в выявлении аномальных форм сперматозоидов – дефекты головки, шейкии жгутика сперматозоида (рис.
82).Рис. 82. Схематическое изображение основных патологических форм сперматозоидов (по данным руководства ВОЗ, 2016)a-f – дефекты головки (a - коническая, b - грушевидная, c - круглая, маленькаябез или с акросомой, d - аморфная, e - с вакуолями , f - с маленькой акросомальной областью); g-j – дефекты шейки и средней части (g - скрученная шейка, h асимметричное прикрепление средней части, i - утолщенная средняя часть, j истонченная средняя часть); k-m – дефекты хвоста (k - короткий хвост, l - сломанный хвост, m - скрученный хвост); n – цитоплазматическая капля занимаетболее 1/3 пространства головки.Если аномальных форм сперматозоидов более 18%, такая сперма не соответствует ГОСТу и подлежат выбраковке из племенного ядра.245б) в обнаружении целостности акросомы сперматозоида (исследование наинтактность акросомы).
Интактность акросомы (измененный аппарат Гольджи,который содержит ферменты класса гидролаз для растворения оболочки яйцеклетки при оплодотворении) обеспечивает пенетрацию сперматозоидами оболочек ооцита. Для определения (в норме не менее 60%) целостности акросомы рекомендуем использовать усовершенствованный нами способ окрашивания сперматозоидов; в определении индекса фрагментации ДНК (маркер апоптоза), играющего важную роль в регуляции фертильности (с пороговым значением неболее 30%).
Для исследования структуры хроматина целесообразно использовать усовершенствованный нами метод окрашивания ДНК флюрохромом – акридиновым оранжевым.в) исследование репродуктивных параметров половых клеток включает использование органолептических и микроскопических методов для определениявоспроизводительного потенциала спермы быков.Органолептические исследования направлены на оценку внешнего вида,объема и рН эякулята, анализ подвижности и жизнедеятельности гамет (количество живых и мёртвых спермиев в пробе) и оценке концентрации клеток в объёме.г) дифференциация и идентификация половых клеток по морфофункциональным признакам с учётом данных световой, фазово-контрастной, сканирующей электронной и флюоресцентной микроскопии.д) генетического исследования гамет на предмет содержания в ДНК аномальных генов, приводящих к снижению фертильности у быков и развитиюнаследственных заболеваний у молодняка таких как: брахиспинальный синдром(BY), дефицит холестерина (CDH), дефицит XI фактора свертывания крови(FXID), комплексный порок позвоночника (CVM), дефицит адгезии лейкоцитов(BLAD), дефицит уридин-монофосфат синтетазы (DUMPS), цитруллинемия(CIT).
При положительном результате хотя бы по одной из данных патологий,животное исключат из племенного ядра, а сперму выбраковывают.е) микробиологический анализ половых клеток быков-производителей, которое246состоит из выделения из спермы бактерий и грибов, и их идентификации классическими микробиологическими методами с помощью применения массспектрометрии и АПИ-систем.
При наличии патогенных и условно-патогенныхмикроорганизмов сперму выброковывают.Предложенный алгоритм комплексного подхода к оценке гаметам быковпроизводителей на основании изучения морфофункциональных, генетических,микробиологических и репродуктивных параметров спермы с использованиемновых и усовершенствованных методов оценки её качества, позволит предотвратить ввоз на территорию РФ и применение для искусственного осеменения некачественного генетического материала крупного рогатого скота и обеспечитьбиологическую и продовольственную безопасность нашей страны.247ГЛАВА 6.
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙВо исполнение Указа Президента РФ от 21 июля 2016 г. № 350 «О мерах пореализации государственной научно-технической политики в интересах развития сельского хозяйства», а также в соответствии с утвержденной научнотехнической программой развития сельского хозяйства на 2017-2025 годы, посозданию и внедрению технологий производства племенного материала, разработка современных методов контроля его качества (Приложение 1, 2). Нами выполнены исследования, направленные на разработку комплексного методологического подхода к оценке качества гамет быков-производителей по морфофункциональным, микробиологический, генетическим и репродуктивным параметрам. (Приложение 3)В настоящее время наблюдается активный рост экспорта/импорта спермысельскохозяйственных производителей на территорию Российской Федерации.Достаточно долгое время наша страна была закрыта для массового ввоза импортного генетического материала, поэтому с первых дней проведения международного обмена спермой встал вопрос о её санитарном контроле с целью предупреждения завоза в страну возбудителей инфекционных болезней.В годы массового ввоза импортного племенного материала Ветеринарныетребования, на основании которых формировались требования экспорта, былиотменены.
Постановлением Правительства РФ от 13.11.2010 г. № 906 «О внесении изменений в постановление Правительства РФ от 01.12.2009 №982 «Обутверждении единого перечня продукции, подлежащей обязательной сертификации, и единого перечня продукции, подтверждение соответствия которойосуществляется в форме принятий декларации о соответствии» сперма сельскохозяйственных животных была исключена из перечня продукции, подлежащейобязательному подтверждению соответствия, а также методические указания поветеринарно-санитарному контролю качества спермы быков-производителейбыли отменены приказом Минсельхоза РФ №71от 28.04.2006.Поскольку в России маточное поголовье и быков-производителей практиче-248ски не исследуют на носительство аномальных генов, специфической микрофлоры, а также животные не подвержены тестированию на современные биологические показатели при искусственном осеменении, то уже не секрет, что более25 лет в страну направляется поток спермопродукции, эмбрионов в основномчерез частные компании, проходя только «бумажный» контроль, насыщая рынокпродукцией сомнительного качества.
Исходя из этого, категорически недопустимо исследовать импортную спермопродукцию в упрощенном варианте с точки зрения ветеринарной безопасности страны.Европейские страны криоконсервируют сперму от своих быков только дляплеменных нужд страны, они не закупают генетический материал у американских поставщиков. Ветеринарные службы этих стран не устраивает факт вакцинирования американского скота от ИРТ, что запрещено в Европе (они либо закупают непривитых быков, либо закупают эмбрионы, проводят осеменение, получают от них потомство чистое и не привитое, то есть они всеми способами ограничивают свой рынок от недоброкачественной продукции.Достаточно войти на информационные ресурсы Министерства сельскогохозяйства, где размещена информация о том, что многие страны демонстрируютосознанное стремление к ужесточению ветеринарно-санитарных требований,предъявляемых к генетическому материалу при экспорте/импорте.
Генетическийматериал обязательно исследуют на ряд инфекционных патологий, список которых утверждается ветеринарной службой данной страны, он постоянно актуализируется, активно рассылается во все племенные центры, причем, при внесенииинформации по генетическим аберрациям, биологическим отклонениям и инфекционным агентам указывают, что список аномалий будет постоянно дополняться по мере поступления сведений о протестированной новой патологии.Обеспечение безопасности государства является приоритетной задачей, поставленной перед всеми эшелонами власти нашего государства. Ключевым моментом этой работы является обеспечение населения страны продуктами питания в необходимых объемах, определенных Доктриной Продовольственной безопасности и важнейшим фактором решения этой проблемы является наличие в249государстве генетических ресурсов для производства продуктов питания.
В отраслях по производству продукции животноводства практически отсутствуетсобственный племенной материал в яичном и мясном птицеводстве, а также всвиноводстве.Полная зависимость от импортного генетического материала - результатразрушения отечественной селекционной базы и утраты значительных наработок в области генетики в Российской науке.Усугубляет ситуацию и то, что в последние годы на территории страныувеличилось число зарегистрированных организаций, распространяющих семябыков-производителей, полученное за рубежом.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
