Диссертация (1150042), страница 17
Текст из файла (страница 17)
Знаком «*» отмечены статистически значимые изменения между двумя группами (p = 0,019)Рисунок 30 – Изменения концентраций ЭЖК в плазме крови. Знаком «*» отмечены статистически значимые изменения между двумя группами (p = 0,031)Суммарные концентрации ЭЖК имеют тенденцию к увеличению после приемапищи при воздействии мельдония, при этом разница между фоновой и контрольной группами статистически значима.83В настоящей работе выявлено, что добровольцев, участвовавших в исследовании,можно разделить на две группы, исходя из данных по соотношению концентраций ω-6 и ω3 полиненасыщенных ЖК в крови.
В первой группе этот показатель составил 5,1 (3,6; 7,2),а во второй – 14,3 (8,4; 22,0), различия между группами статистически значимы (p < 0,0001).Такое разделение оказалось необходимым, так как при приеме мельдония в первой группеизменение индекса отсутствовало, а во второй происходило его снижение после приемапищи. Этот факт отражен наглядно на рисунке 31. Стоит отметить, что корреляция междусуммарной концентрацией СЖК и соотношением концентраций ω-6 и ω-3 – отсутствует(коэффициент корреляции Пирсона меньше критического значения).Рисунок 31 – Изменение соотношения концентраций ω-6 и ω-3 полиненасыщенных свободных ЖК в крови.
Знаком «*» отмечены статистически значимые изменения междудвумя группами (p = 0,045)Выявлено, что однократное употребление мельдония препятствует повышению индекса ω-6/ω-3 после приема пищи, разница составляет 38 %. Установлено, что снижениеиндекса происходит за счет уменьшения концентрации ω-6 полиненасыщенных ЖК, в товремя как концентрации ω-3 остаются неизменными. Выявленные воздействия мельдонияна метаболизм ЖК суммированы в таблице 24.Отсутствие естественного увеличения концентраций СЖК и ЭЖК в плазме кровипосле приема пищи может свидетельствовать об активации гликолиза, и преимущественном использовании глюкозы в качестве энергетического субстрата, что приводит к замедлению процессов липолиза и транспорта липидов.
Положительным влиянием мельдония на84метаболизм можно назвать снижение соотношения ω-6/ω-3 полиненасыщенных ЖК, чтоможет свидетельствовать о снижении рисков середчно-сосудистых заболеваний.Таблица 24 – Краткое описание выявленных воздействий мельдония на метаболизм ЖКСубстраты/Возможный механизмЭффектметаболитыОтсутствует естественноеувеличение концентрацийСвободные ЖКпослеприемапищи.Преимущественное использованиеСуммарная концентрацияглюкозы в качестве энергетичеснижена на 37 %.ского субстрата приводит к замедОтсутствует естественноелению процессов липолиза и трансувеличение концентрацийпорта липидовЭтерифицированныепослеприемапищи.ЖКСуммарная концентрацияснижена на 34 %.Отношение концен- Снижает концентрации ω-6траций ω-6 к ω-3 по- ПНЖК.
Индекс ω-6/ω-3 снилиненасыщеннымжен после приема пищи на Не ясен.свободным жирным 38%.кислотамОпределение индексов активности десатураз, а также отношение ω-6/ω-3 позволилов полной мере оценить влияние фармпрепарата на организм человека. Разработанная методика определения ЖК может быть использована для оценки воздействия препаратов на метаболизм ЖК.3.8 Исследование энергетического метаболизма крыс при действии фторацетатаДействие ФА на организм является довольно изученным материалом, однако всестороннее исследование изменений, происходящих при отравлениях, позволят в полной мерепонять механизмы воздействия отравляющего вещества.Помимо ЖК, в плазме крыс после интоксикации были определены уровни цитрата,глюкозы, лактата, а также аминокислот.Общее исследование плазмы крови показало, что уровень цитрата в плазме повышается в два раза уже через час после отравления, и это единственный показатель плазмыкрови крыс, который оставался повышенным в течение всего периода проведения исследований.
В ходе исследований не было обнаружено отклонений в уровне глюкозы в плазмекрови во все сроки после отравления крыс ФА в дозе ½ЛД50, но в печени наблюдаетсяповышение уровня глюкозы почти в 3 раза, в сердце – в 2 раза, в мозге – в 2-3 раза [167].Таким образом, локальное нарушение утилизации глюкозы в органах не отражается на системном уровне глюкозы, который, следовательно, не может служить надежным критериеминтоксикации ФА и степени тяжести тканевой гипоксии. Другой источник углеводов, гли-85коген, резко сокращается в печени и мозге крыс в первые часы после отравления, но восстанавливается через сутки. Уровень лактата достоверно снижается при интоксикации ФАв сердце и мозге крыс через 3 и 6 часов, в печени через 3 часа, и лишь в почках уровеньлактата не меняется.
В плазме крови крыс уровень лактата снижался в первые часы послеотравления.Повышение концентрации некоторых аминокислот в плазме крови крыс через 3 часапосле отравления ФА свидетельствует об усилении распада белка в скелетных мышцах. Поданным других исследователей, концентрация глутамина в плазме артериальной крови увеличивается в два раза в течение 1-3 часов при остром ацидозе [213], главным образом вследствие усиленного выхода глутамина из мышечной ткани [214]. Однако при хроническомметаболическом ацидозе уровень глутамина в плазме артериальной крови понижается до70% от нормы [215].
В экспериментах наблюдали некоторое снижение уровня глутамата изначительное снижение глутамина в плазме крови крыс, что может свидетельствовать о невысокой степени ацидоза, постепенном его развитии, невысокой активности АТФ-зависимой глутаминсинтазы скелетных мышц и быстрой утилизации имеющегося и появляющегося глутамина эндотелием сосудов и почками.Исследования жирно-кислотного состава плазмы крови крыс показали, что через 3часа после отравления ФА концентрации ТГ и СЖК в плазме крови крыс изменились в противоположных направлениях: уменьшение ТГ и увеличение СЖК, вплоть до 75% от уровняконтроля. Через 24 ч уровень ТГ оставался пониженным, а уровень СЖК снизился несколько ниже уровня контроля.
С помощью ГХ-МС мы проанализировали изменения кноцентраций 36 ЖК и выявили существенные изменения 7 из них: додекановой (C12:0), пальмитолеиновой (C16:1n7), пальмитиновой (C16:0), линолевой (C18:2n6c), олеиновой(C18:1n9c), элаидиновой (C18:1n9t) и цис-4,7,10,13,16,19-докозагексаеновой кислоты(C22:6n3). В таблице 25 представлены изменения содержания триглицеридов и СЖК послеострой интоксикации натриевой солью фтор ацетата у крыс, пероральная доза составила 2мг кг-1 (1/2LD50).Снижение уровня ТГ объясняется резким снижением потребления пищи вследствиеугнетения ЦНС, а также обусловлено усилением активности липопротеинлипазы эндотелияза счет инсулина, выброс которого может усиливаться в результате повышения уровняглюкозы в тканях и нарастающего доминирования парасимпатической регуляции приинтоксикации ФА [216].86Таблица 25 - Изменение содержания триглицеридов и СЖК после острой интоксикациифторацетатом у крыс, пероральная доза составила 2 мг/кг (1/2LD50) [167]ТриглицеридыСуммарная концентрация СЖКГруппаmMuMКонтроль1,62 ± 0,24100,6 ± 13,63ч0,96 ± 0,11174,6 ± 9,4624 ч0,98 ± 0,1382,4 ± 16,8В более поздние сроки достоверное снижение СЖК свидетельствует об усиленномих использовании в качестве энергетического субстрата – утилизация, очевидно, неполная,но важно получение восстановительных эквивалентов в реакциях КоА-зависимого окисления ЖК.При интоксикации ФА в тканях экспериментальных животных главными энергетическими источниками являются лактат, глутамат и глутамин.
Глюкоза и СЖК не являютсяэнергетическими субстратами в первые часы после отравления, но могут быть утилизированы в более позднем периоде. На рисунке 32 приведена иллюстрация изменения индексаактивности элонгазы и Δ5-десатуразы после введения крысам дозы эквивалетной ½LD50ФА. Выявлено нарушение, а именно снижение биосинтеза и метаболизма ЖК.***Рисунок 32 – Индекс активности элонгазы (слева) и Δ5-десатуразы (справа) после введения ½DL50 ФА.В результате можно заключить, что исследование влияния ФА на профили ЖК позволило получить новые сведения о механизме действия токсиканта, входящего в группу т.н.метаболических ядов, к которым относится значительная часть препаратов, используемых,в том числе, в качестве химиотерапии при онкологических заболеваниях. Полезным оказалось определение и общего количество СЖК, а также изменение концентрации индивидуальных кислот, что позволило определить активность элонгазы и Δ5-десатуразы.873.9.
Изменения профилей жирных кислот тканей печени и головного мозга крыс прихроническом ингаляционном воздействии малых доз алифатических углеводородовХроническое воздействие углеводородов приводит к целому ряду нарушений деятельности различных систем организма, в частности оно приводит к атрофии тестикул, энцефалопатии, влияет на печень и почки животных и человека. Несмотря на имеющиеся многочисленные сведения о влиянии УВ на морфофункциональные и клинико-биохимическиепоказатели, механизмы возникновения патологий нуждаются в уточнении.
Хотя возникновение нейропатии обычно связывают с накоплением нейрофиламентов, точный механизмвозникновения этого процесса неизвестен. В работе [217] впервые предпринята попыткапротеомного исследования токсического действия 2,5-гександиона: выявлено уменьшениеэкспрессии белков, обеспечивающих физическую целостность аксонов, редокс-баланс,фолдинг. В то же время, повышается экспрессия белков, отвечающих за энергетическийобмен.Ранее в НИИ ГПЭЧ было впервые исследовано хроническое ингаляционное воздействие низких доз алифатических углеводородов на метаболический профиль плазмы кровилабораторных животных с использованием сочетания ГХ-МС и ВЭЖХ-МС высокого разрешения [218].
Выявлены маркеры нарушения биосинтеза полиаминов, метаболизма желчных кислот, функции почек, нарушения цикла мочевины, и снижения синтеза триглицеридов и глицерофосфолипидов, что свидетельствует о снижении функциональной активностипечени. Между тем в плазме крови не были выявлены метаболические маркеры воздействияна нервную систему, поэтому было решено провести дополнительное исследование с цельюполучения новых сведений о возможном механизме токсического действия низких доз УВна головной мозг и печень крыс, в частности о воздействии УВ на состав липидов в этихорганах.
Для решения этой задачи необходимо было оптимизировать разработанную двухстадийную методику для количественного определения ЖК в образцах гомогенатов органов и тканей.Существующие методы определения липидного профиля гомогенатов органов и тканей можно разделить на две категории: с использованием ГХ-МС и ВЭЖХ-МС высокогоразрешения.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
