Диссертация (1150042), страница 20
Текст из файла (страница 20)
Возможно, этот эффект объясняется следствием снижения синтетической функциипечени под воздействием токсичных соединений.Основным преимуществом разработанного способа определения СЖК и ЭЖК в гомогенатах органов и тканей является точный количественный анализ, по сравнению с нецелевыми методами, и высокая чувствительность, позволяющая определять даже минорныеЖК. Несмотря на простоту и отсутствие стадии выделения липидных фракций, данная методика позволяет проводить профилирование, определять СЖК и ЭЖК, вычислять различные количественные индексы и параметры (ω-6/ω-3 и пр.), и, таким образом, выявлять токсическое действие химических соединений на органы лабораторных животных.
Использо100вание разработанной методики определения жирнокислотного состава органов и тканей лабораторных животных позволит внести существенный вклад в практику регламентирования вредных химических соединений.В результате выполнения работы создана аналитическая методика, позволяющаяпроводить профилирование жирнокислотного состава различных биологических объектов,которая позволяет решать практические задачи в рамках токсикологических экспериментов,в частности, производить оценку нарушений механизмов синтеза ЖК, оценивать вероятность развития сердечно-сосудистых заболеваний, а также степень поражения мембран клеток печени и других органов.
Результаты работы позволили получить новые сведения о влиянии токсичных химических соединений на метаболизм липидов и выйти на новый уровеньоценки рисков, связанных с воздействием различных токсичных химических соединений.Работа позволила усовершенствовать методологическую основу доклинических и клинических исследований в ФГУП «НИИ ГПЭЧ» ФМБА России, а также гигиенического регламентирования вредных химических веществ. Методика может быть использована в центрахпрофпатологии, медико-биологических НИИ, центрах Роспотребнадзора и токсикологических лабораториях.ВЫВОДЫ1.Двухстадийнаяхроматомасс-спектрометрическаяметодикасовместногоколичественного определения свободных и этерифицированных ЖК в плазме крови людейи лабораторных животных на принципах экстрактивного алкилирования позволяетпроводить определение 32 ЖК, включая полиненасыщенные, и обеспечивает пределыобнаружения не менее 0,02 мкг/мл, относительную ошибку определения не выше 15 %, приэтом мягкие условия подготовки проб исключают побочные реакции переэтерификации,окисления и гидролиза аналитов.2.Установлено, что условия хранения образцов плазмы крови влияют на содержание в нейСЖК и ЭЖК.
Охарактеризованы оптимальные условия хранения биологических образцовперед анализом, не влияющие на исходный состав ЖК, а именно: не более 14 дней взамороженном виде при температуре -20 °С без повторного замораживания.3.Показано, что гомогенаты органов и тканей можно использовать в качестве образцовдля определения СЖК и ЭЖК без введения дополнительных стадий разделения и очисткив предложенную двухстадийную схему.4.Внедрение разработанной схемы в лабораторно-клиническую диагностику пригигиеническом регламентировании вредных химических веществ позволило установитьранее неизвестные аспекты токсического действия фосфорорганических соединений,алифатических углеводородов и фторуксусной кислоты на организм животных.101СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ1.
Крылов А.И., Хлебникова Н.С., Полуяктова С.К. // Журн анал хим. - 1991. - Т. 46. - №12.- С. 2428-24352.УколовА.И.,ОрловаТ.И.,СавельеваЕ.И.,РадиловА.С.Хроматомасс-спектрометрическое определение свободных жирных кислот в плазме крови и моче сиспользованием экстрактивного алкилирования // Журнал аналитической химии, 2015, Т.70, № 9, С. 968-975.3.
Орлова Т.И., Уколов А.И., Савельева Е.И., Радилов А.С. Определение свободных иэтерифицированных жирных кислот в плазме крови методом газовой хроматоматографии смасс-селективным детектированием // Аналитика и контроль, 2015, Т. 19, № 2, С. 183-188.4. Уколов А.И., Орлова Т.И., Радилов А.С. Влияние биологической матрицы и условийхранения на определение жирных кислот плазмы крови методом ГХ-МС // Вестн. СанктПетерб.
гос. ун-та. 2015. Сер. 4. В печати.5. Электронный ресурс http://lipidlibrary.aocs.org/lipids/fa_branc/file.pdf от 04.07.20156. Электронный ресурс http://biochemistry.ru/biohimija_severina/B5873Part58-371.7. Электронныйресурсhttp://intranet.tdmu.edu.ua/data/kafedra/internal/chemistry/clas-ses_stud/ru/stomat/ptn/1/биоорганическая%20химия/03.%20классификация%20липидов.%20фосфолипиды.htm8. Bicalha B., David F., Rumplel K., Kindtd E., Pat Sandra. Creating a fatty acid methyl esterdatabase for lipid profiling in a single drop of human blood using high resolution capillary gaschromatography and mass spectrometry //J of Chromatogr A.
- 2008. - V. 1211 - P. 120–128.9. Ashraf-Khorassani M., Isaac G., Rainville P., Fountain K., et al. Study of UltraHigh Performance Supercritical Fluid Chromatography to Measure Free Fatty Acids With Out Fatty Acid Ester Preparation // J of Chromatogr. - 2015. - V.997. - P. 45–55.10. Электронный ресурс http://dic.academic.ru/dic.nsf/ruwiki/80433 от 04.07.201511.
Van Meer G, Voelker DR, Feigenson GW. Membrance lipids: where they are and how theybehave// Nat Rev Mol Cell Biol. – 2008. - V.9(2). - P. 112–24.12. Stillwell W. An Introduction to Biological Membranes. 2013. Chapter 4 – Membrane Lipids:Fatty Acids. P. 43–5613.Электронный ресурс http://chem21.info/info/1350323/ от 04.07.201514. Тюкавкина Н. А., Бауков Ю. И., Зурабян С.Э. Биоорганическая химия.
- 2010. - 416 с.15. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия.1998 г.10216. Holman RT. Nutritional and metabolic interrelationships between fatty acids// Fed Proc. –1964. - V. 23. –P. 1062-106717.Электронныйресурсhttp://nenuda.ru/ионизирующего-излучения-на-процессы-перекисного-окисления.html18.электронныйресурсот04.07.2015https://ru.wikipe-dia.org/wiki/%C6%E8%F0%ED%FB%E5_%EA%E8%F1%EB%EE%F2%FB19. IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature (CBN) The Nomenclature of LipidsRecommendations, 1976 Eur.
J. Biochem. 79, 11-21(1977)20. Гладышев М.И. Незаменимые полиненасыщенные ЖК и их пищевые источники для человека. //Journal of Siberian Federal University. Biology. - 2012. - В. 4. - P. 352-386.21. Боровик Т.Э., Грибакин С.Г., Звонкова Н.Г., Скворцова В.А., Степанова Т.Н., ШмаковаС.Г..
Питание и развитие мозга: роль длинноцепочечных полиненасыщенных ЖК ФГБУ. //Научный центр здоровья детей РАМН, 2ГОУ ДПО Российская медицинская академияпоследипломного образования Росздрава. Москва. Питание здорового и больного ребенка.22. Kummerow F. A. The negative effects of hydrogenated trans fats and what to do about them.//Atherosclerosis. – 2012.
- V. 205(2). – P. 458-46523. Quehenberger O. et al. Lipidomics reveals a remarkable diversity of lipids in human plasma.// Journal of Lipid Research. - 2010. - V. 51. - P. 3299-3305.24. Кольман Я., К.- Г. Рем Наглядная БИОХИМИЯ Перевод с немецкого профессора, д-рабиол. наук Л.
В. Козлова, канд. биол. наук Е. С. Левиной и канд. хим. наук П. Д. Решетовапод редакцией канд. хим. наук П. Д. Решетова и канд. хим. наук Т. И. Соркиной Москва“Мир” 200025. Hertzel A. V., Thompson B.R., Wiczer B.M., Bernlohr D.A. Lipid metabolism in adiposetissue./ In Biochemistry of Lipids, Lipoproteins and Membranes. D. E. Vance and J. E. Vance.Amsterdam. - 2008. – P. 277–304.26. Funk C. D. Prostaglandins and leukotrienes: advances in eicosanoid biology. //Science. - 2001.- V. 294. - P. 1871 – 1875.27. Электронный ресурс от 10.07.2015http://biokhimija.ru/lekcii-po-biohimii/24-stroenieobmen-lipidov/133-fosfolipidy.html28. Электронный ресурс от 10.07.201 5http://www.xumuk.ru/biologhim/076.html29. Электронный ресурс http://lipidlibrary.aocs.org/Lipids/whatlip/file.pdf30.
Электронный ресурс http://themedicalbiochemistrypage.org/lipids.php31. Dowhan W., Bogdanov M., Mileykovskaya E. Lipoproteins and Membranes (Fifth Edition)//Biochemistry of Lipids. – 2008. - P. 1–37.10332. Электронный ресурс https://en.wikipedia.org/wiki/Sphingolipid от 10.07.201533. Северин Е.С. Биохимия. /Изд. ГЭОТАР-МЕД. 2003.34. Гладышев М.И. Незаменимые полиненасыщенные ЖК и их пищевые источники длячеловека.
//Journal of Siberian Federal University. Biology 4. - 2012. - V. 5 - P. 352-386.35. Warensjö E., Sundström J., Vessby B., Cederholm T., Risérus U. Markers of dietary fat qualityand fatty acid desaturation as predictors of total and cardiovascular mortality: a population-basedprospective study1–3.
2008. - V. 88. - P. 203-209.36. Jeyakumar S.M, Lopamudra P., Padmini S., Balakrishna N. et al. Fatty acid desaturation indexcorrelates with body mass and adiposity indices of obesity in Wistar NIN obese mutant rat strainsWNIN/Ob and WNIN/GR-Ob Nutrition. // Metabolism Nutrition & Metabolism. – 2009. - V. 6:2737.
Боровик Т.Э., Грибакин С.Г., Звонкова Н.Г., Скворцова В.А. и др. Питание и развитиемозга: роль длинноцепочечных полиненасыщенных ЖК ФГБУ Научный центр здоровья детей РАМН, 2ГОУ ДПО Российская медицинская академия последипломного образованияРосздрава, Москва. 2012.38.
Simopoulos AP. The importance of the omega-6/omega-3 fatty acid ratio in cardiovasculardisease and other chronic diseases.//Exp Biol Med (Maywood). - 2008. - V. 233. - P. 674–688.39. Harris W.S., Mozaffarian D., Rimm E. et al. Circulation. Omega-6 fatty acids and risk forcardiovascular disease: a science advisory from the American Heart Association Nutrition Subcommittee of the Council on Nutrition, Physical Activity, and Metabolism; Council on Cardiovascular Nursing; and Council on Epidemiology and Prevention.//Circulation. - 2009. - V.
119. - P.902–907.40. Williams C.D., Whitley B.M., Hoyo C. et al. A high ratio of dietary n-6/n-3 polyunsaturatedfatty acids is associated with increased risk of prostate cancer.// Nutr Res. – 2011. - V. 31(1) - P.18.41. Richard J. Deckelbaum. n-6 and n-3 Fatty acids and atherosclerosis: ratios or amounts?// Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. - 2010. - V.30 - P.
2325-2326.42. Chang C.L., Seo T., Matsuzaki M. et al. n-3 fatty acids reduce arterial LDL-cholesterol delivery and arterial lipoprotein lipase levels and lipase distribution.//Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2009. - V. 29. - P. 555–561.43. Seo T., Qi K., Chang C. et al. Saturated fat-rich diet enhances selective uptake of LDL cholesteryl esters in the arterial wall.// J Clin Invest. – 2005. - V. 115. - P. 2214–2222.44. Hegele R.A.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
