Диссертация (1145983), страница 28
Текст из файла (страница 28)
Тем не менее, обнаруженные ассоциации указывают на возможноеучастие белковых продуктов изученных генов в становлении гестоза, важны для пониманияпутейимеханизмовэтогоосложнениябеременности,атакжемогутобъяснитьпротиворечивость данных литературы. Кроме того, полученные результаты позволяютпредположить, что существуют как общие генетические факторы риска гестоза, так испецифические, предрасполагающие к определенным формам патологии. Эта гипотезаподнимает проблему нозологического единства гестоза.
Поскольку наибольший вклад вразвитие гестоза вносят именно специфические факторы, вероятно, что гестоз в какой-тостепени представляет собой совокупность различных патологических состояний со сходнымифенотипическимипроявлениями,ноимеющихразныепричинывозникновениянамолекулярно-генетическом уровне. С другой стороны вероятность гестоза повышается привзаимодействии специфических и общих факторов риска, следовательно, существует единаяпричина, предрасполагающая к гестозу.Нарядусбольшимчисломисследований,посвященныхпоискуассоциацийнуклеотидных вариаций с риском гестоза, в настоящее время идет накопление сведений о связигенетических факторов с данными лабораторных исследований [Мозговая, 2003; Павлова,2013].
Для установления возможного влияния изменений в последовательности исследуемыхгенов на особенности клинических проявлений гестоза данные генотипирования были113сопоставлены с результатами клинико-лабораторных исследований. Для большинства геновбыли обнаружены неслучайные ассоциацииих полиморфных сайтов с изменчивостьюклинических параметров у пациенток с гестозом (по критерию Краскела-Уоллиса или Fкритерий Фишера). К сожалению, практически во всех случаях интерквартильные (25-й и 75-йпроцентили) и 95%-е доверительные интервалы для исследуемых переменных пересекались,что свидетельствует об относительно слабой роли изученных генетических вариаций визменчивости клинических параметров.
Тем не менее, некоторые обнаруженные намиассоциации были найдены в работах других авторов.Так, выявленная нами ассоциация полиморфных сайтов генов FGB rs1800790, BKR2rs1799722 и ITGB3 rs5918 с уровнем сахара в крови в зависимости от генотипа (p<0,05) ранеебыла описана в нескольких работах [Wong et al., 2008; Alvim et al., 2012]. Механизм этих связейточно не установлен [Wong et al., 2008; Alvim et al., 2012]. Однако известно, что брадикининусиливает фосфорилирование субстрата инсулинового рецептора IRS1 и тем самым можетпринимать участие в регуляции уровня сахара в крови. Кроме того, брадикинин активируетNOS3, благодаря чему усиливается кровоток и увеличивается приток сахара к периферическимтканям [Alvim et al., 2012].В работе Карпенко М.
А. и др. (2007) показана ассоциация вариантов rs1800790 генаFGB - с ПТИ и показателями, отражающими функцию печени, rs5186 гена AGTR1 с уровнемфибриногена и фибринолитической активностью крови. В нескольких публикациях [Niemiec etal., 2008; Turgut et al., 2011] сообщается об ассоциации замены 704T>C гена AGT (rs699) споказателями метаболизма липидов.Помимоперечисленныхассоциаций,намивпервыебылиполученыданные,свидетельствующие о связи изменений в нуклеотидной последовательности генов FGBrs1800790, ITGB3 rs5918, ADRB2 rs1042713 и rs1042714 с показателями коагулограммы, геновAGT rs699 и BKR2 rs1799722 - с показателями водно-солевого обмена, гена NOS3 rs1800779 - споказателями дисфункции эндотелия, гена AGT rs699 - с оценкой по шкале Апгар уноворожденных, гена ADRB2 rs1042713 и rs1042714 - с биохимическими показателями,позволяющими оценить функциональное состояние печени (p<0,05).Заслуживают внимание результаты изучения полиморфных сайтов, варианты которыхпоказали связь с риском гестоза при анализе ассоциаций.Выявлена связь замены 807C>Т (rs1126643) гена ITGA2 с величиной САД в зависимостиот генотипа (p<0,05).
У гомозигот TT наблюдались более высокие значения САД по сравнениюс гомозиготами CC (p=0,0226) и гетерозиготами CT (p=0,0159), что соответствует результатам,полученным нами при анализе ассоциаций.114Анализ биохимических и клинических параметров у носителей разных генотипов PAI1показал ассоциацию rs1799768 (-675 5G>4G) с уровнем фактора Виллебранда в кровибеременных с гестозом (p<0,05). У пациенток с генотипами 5G4G гена PAI1 наблюдалось болеевысокое содержание фактора Виллебранда по сравнению с гомозиготами 5G5G (p=0,0170) и4G4G (p=0,0908), что согласуется с данными наших более ранних исследований [Мозговая,2003].Показано, что у носителей аллели A rs2368564 (83G>A) гена REN повышен уровеньтриглециридов крови по сравнению с гомозиготами по аллели G (p=0,0371), вследствие чего,вероятно, аллель A связана с повышенной вероятностью развития кардиоваскулярныхосложнений при беременности [Austin et al., 1998].Для rs11091046 гена AGTR2 (3123A>C) установлена ассоциация генотипов с уровнемобщей щелочной фосфатазы и концентрацией калия, а также с весом плаценты (p<0,05).
Убеременных с гестозом, гомозиготных и гетерозиготных по аллели C, отмечено повышениеуровня общей щелочной фосфатазы и калия по сравнению с гомозиготами AA (p=0,0034 иp=0,0225; p=0,0315 и p=0,0098). Вес плаценты был выше у пациенток с генотипами AC и CC посравнению с носителями генотипа AA (p=0,0337 и p=0,0061), что, по мнению некоторыхавторов, может являться фактором риска развития гестоза [Гайдуков и Аверина, 2011].Выявлена ассоциация генотипов rs5888 гена SCARB1 (1050C>T) с весом и ИМТноворожденных (p<0,05).
У пациенток с генотипом TT отмечались большие значения веса иИМТ новорожденного по сравнению с носителями двух других генотипов CC (p=0,0059 иp=0,0080) и CT (p=0,0431 и p=0,0551). Это согласуется с данными литературы об ассоциацииаллели T с метаболическим синдромом у детей [Juárez-Meavepeña et al., 2012].Также rs5888 SCARB1 (1050C>T) вместе с rs328 гена LPL (1595С>G) показалиассоциацию с уровнем антитромбина III (p<0,05). У носителей генотипов, содержащих аллели Trs5888 и С rs328, отмечено снижение концентрации антитромбина III в крови, что, вероятно,способствует активации свертывающей системы крови [Демьяненко и др., 2013] и, какследствие, развитию гестоза.Для пациенток с гестозом, гомозиготных по аллели C rs2695121 гена NR1H2, отмеченоснижение уровня альбумина в крови (p<0,05).
Уменьшение концентрации альбумина в кровивлечет за собой появление отеков, может служить основой развития синдрома эндогеннойинтоксикации и свидетельствует о прогрессировании гестоза [Мороз и др., 2005; Gojnic et al.,2004; Сидорова, 2007].Таким образом, полученные данные свидетельствуют о влиянии изменений внуклеотидной последовательности генов системы свертывания крови (FGB, ITGB3, ITGA2),регуляции АД (REN, AGT, AGTR1, AGTR2, BKR2 и ADRB2), дисфункции эндотелия (NOS3,115PAI1) и метаболизма липидов (NR1H2, SCARB1 и LPL) на вариабельность клиниколабораторных показателей при гестозе.В настоящей работе при оценке роли генетического полиморфизма в развитии гестозабыл использован системный подход: изучена ассоциация вариантов выбранных полиморфныхсайтов с гестозом в целом, с отдельными клиническими формами и патогенетическизначимыми признаками патологии, выполнен анализ совместного влияния вариантовполиморфных сайтов на риск развития гестоза в целом и его отдельных клинических форм.Проведенное исследование показало, что варианты полиморфных сайтов генов системысвертывания крови (F7, PAI1, ITGA2), регуляции АД (REN, AGT, AGTR2, ADRB2), дисфункцииэндотелия (MTHFR) и метаболизма липидов (APOA1, SCARB1 NR1H2, LPL), в той или инойстепени ассоциированы с риском гестоза у жителей Северо-Западного региона России.Выявлены генетические варианты, которые играют модифицирующую роль в изменчивостиклинико-лабораторных показателей у женщин с гестозом.
Найдены, как общие генетическиефакторы риска гестоза, так и специфические, предрасполагающие к патологии при комбинациис определенными фоновыми заболеваниями. Однако стоит отметить, что исследованиевыполнено на небольших группах, а многие ассоциации выявлены впервые, поэтомуполученные результаты нуждаются в верификации на независимых выборках. Тем не менее,существование генетических маркеров, ассоциированных с разными клинических формамигестоза, позволяет предположить отличия в молекулярных механизмах развития этих формпатологии, а также необходимости применения помимо общего комплекса терапевтическихмер, дифференцированного подхода к лечению и профилактике гестоза.
В целом результатыработысвидетельствуютоцелесообразностипроведениядальнейшихисследований,направленных на поиск генетических маркеров гестоза, учитывающих различные вариантытечения патологии, особенности анамнеза больных и другие факторы.В последние годы особый интерес в молекулярно-генетических исследованиях гестозауделяется изучению микроРНК.
С помощью технологии полногеномного секвенирования намибыл проведен анализ содержания микроРНК в плацентарной ткани женщин с гестозом (n=5) иженщин, чья беременность протекала без осложнений (n=6) (обсуждение результатовподготовлено в соответствии со статьей Vashukova et al., 2016).Нами были выявлены 22 микроРНК, содержание которых отличалось в образцахпациенток с гестозом по сравнению с женщинами без осложнений беременности. Гены 11-имикроРНК входили в состав кластера C19MC – одного из наиболее обширных кластеровмикроРНК в геноме человека, который охватывает область около 100 тыс.
п.о. на 19 хромосоме(19q13.41) и содержит 46 генов микроРНК [Morales-Prieto et al., 2013]. Биологическая функциякластера C19MC точно не известна. Гены микроРНК, входящие в состав этого кластера,116экспрессируются преимущественно в плаценте, и изменение их экспрессии ассоциировано сразличными осложнениями беременности, включая гестоз [Morales-Prieto et al., 2013; Chen andWang, 2013]. В нашем исследовании уровень всех 11-и микроРНК был повышен в плацентахпациенток с гестозом по сравнению с таковыми в группе сравнения. Для 8-и микроРНК – miR515-3p, miR-515-5p, miR-516a-5p, miR-518c, miR-518e, miR-519e*, miR-520a и miR-524 –повышение уровня в плаценте при гестозе ранее было показано другими авторами [Zhu et al.,2009; Ishibashi et al., 2012; Wang et al., 2012; Xu et al., 2014].
В то время как для 3-х микроРНК –miR-518a, miR-527, miR-518f – ассоциация с гестозом обнаружена впервые. Изменения вэкспрессии генов этих микроРНК могут быть связаны с явлением геномного импринтинга, вчастности с процессами метилирования ДНК. С двух сторон от кластера С19МС расположеныимпринтированные гены, продукты которых участвуют в регуляции эмбрионального развития иклеточной дифференцировки.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
