Диссертация (1145983), страница 29
Текст из файла (страница 29)
Установлено, что эти гены экспрессируются только с отцовскойхромосомы [Morales-Prieto et al., 2013]. При этом уровень их экспрессии зависит от статусаметилирования дистальных регуляторных CpG-богатых областей [Tsai et al., 2009]. Вполне,возможно, что повышение экспрессии микроРНК кластера C19MC в плаценте при гестоземожет быть связано с дефектами процессов метилирования ДНК при перепрограммированиигенома на самых ранних этапах беременности (на предимплантационной стадии или вгаметогенезе) [Pendina et al., 2011; Tang et al., 2015]. В связи с этим перспективнымпредставляется изучение особенностей метилирования регуляторных участков кластера C19MCпри гестозе.Гены остальных 11-и микроРНК, выявленных в нашем исследовании, расположены нахромосомах 1, 9, 11, 16, 17, 20 и X.
Изменение уровня 9-и микроРНК - miR-210, miR-195, miR223, miR-1, miR-34c, miR-193b, miR-let-7f, miR-31 и miR-98 - также было описано в другихисследованиях. Для 2-х микроРНК - miR-135b и miR-4532 - ранее не была зафиксирована связьс развитием гестоза.Обнаруженное повышение уровня miR-210 при гестозе наблюдали практически во всехисследованиях по анализу содержания микроРНК [Zhu et al., 2009; Ishibashi et al., 2012; Xu et al.,2014; Pineles et al., 2007; Enquobahrie et al., 2011; Luo et al., 2014]. Поскольку miR-210 являетсяодним из маркеров гипоксии [Zhu et al., 2009], повышенный уровень этой микроРНК можетсвидетельствовать о недостаточном кровоснабжении тканей плаценты.
В настоящее времяактивно проводятся исследования для выяснения функциональной роли miR-210 в патогенезегестоза. В экспериментах in vitro и in vivo показано, что мишенью miR-210 является мРНК генаэфрин А3 (EFNA3), подавление синтеза которого блокирует миграцию и инвазиютрофобластных клеток [Zhang et al., 2012]. miR-210 может приводить к ингибированию инвазиитрофобласта в связи с ее негативным влиянием на мРНК генов KCMF1 (модулирующий фактор117активности калиевых каналов 1 типа) [Luo et al., 2014] и ISCU (протеин, собирающийжелезосерный кластер в митохондриях) [Lee et al., 2011] (рисунок 19).Рисунок 19 – Предполагаемя роль микроРНК miR-210 и miR-518c в патогенезе гестоза[согласно Harapan and Andalas, 2015 и Harapan and Yeni, 2015 с модификациями]Примечания - EFNA3 - эфрин А3, KCMF1 - модулирующий фактор активности калиевых каналов 1типа, ISCU - протеин, собирающий железосерный кластер в митохондриях, HOXA9 – гомеобоксныйбелок A9, STAT6 – внутриклеточный активатор транскрипции, IL-4 - интерлейкин 4, HSD17B1 гидростероид (17ß) дегидрогеназа.Также отмечено, что под воздействием miR-210 снижается уровень экспрессии генагомеобоксного белка A9 HOXA9, играющего важную роль в процессах ангиогенеза [Zhang et al.,2012; Harapan and Andalas, 2015] (рисунок 19).
Интересно, что уровень мРНК гена HOXA9 ибелка HOXA9 понижен в образцах плацент женщин с гестозом [Zhang et al., 2012]. miR-210участвует в инактивации гена активатора транскрипции STAT6 системы JAK-STAT (JanusKinases — Signal Transducer and Activator of Transcription), что может приводить кингибированию синтеза противовоспалительного интерлейкина 4 и, как следствие, к развитиюсиндрома системного воспалительного ответа и дисфункции эндотелия, характерных длягестоза [Kopriva et al., 2013] (рисунок 19). Другой экспериментально подтвержденной мишеньюmiR-210 является мРНК гена фермента гидростероид (17ß) дегидрогеназы (HSD17B1),синтезируемой плацентой и ответственной за конверсию эстрона в 17-β-эстрадиол. Снижениеуровня 17-эстрадиола способствует повышению тонуса кровеносных сосудов и создаетпредпосылки для развития гипертензии [Harapan and Yeni, 2015] (рисунок 19).
КонцентрацияHSD17B1 в плазме крови на сроках беременности 20-23 и 27-30 недель значительно ниже уженщин с гестозом по сравнению женщинами без осложнений беременности [Ishibashi et al.,2012]. Необходимо отметить, что еще одна микроРНК miR-518c, содержание которой было118повышено в нашем исследовании, также способна негативно воздействовать на мРНК генаHSD17B1 [Ishibashi et al., 2012] (рисунок 19).Данные относительно изменения содержания miR-195 в плаценте при гестозепротиворечивы. Hu Y. et al.
(2009) выявили значимое накопление miR-195, в то время какдругие ученые из Китая [Zhu et al., 2009; Xu et al., 2014; Bai et al., 2012] обнаружили снижениеуровня этой микроРНК, что совпадает с результатами нашего исследования. В экспериментах invitro показано, что miR-195 способна подавлять синтез ACVR2A и тем самым улучшатьинвазивные способности клеток трофобласта [Bai et al., 2012]. Предполагается, что уменьшениеэкспрессии miR-195 может приводить к активации гена ACVR2A, и, как следствие, кингибированию инвазии трофобласта, нарушению ремоделирования спиральных маточныхартерий и развитию гестоза [Bai et al., 2012] (рисунок 20).Согласно базе miRDB (miRDB database system; http://mirdb.org/) мРНК гена ACVR2Aможет быть потенциальной мишенью и для miR-223. Нами обнаружено снижение уровня этоймикроРНК в плацентарной ткани женщин с гестозом по сравнению с женщинами безосложнений беременности, что согласуется с данными других авторов [Zhu et al., 2009; Ishibashiet al., 2012; Xu et al., 2014; 21, Choi et al., 2013; Yang et al., 2011; Weedon-Fekjær et al., 2014](рисунок 20).Для miR-1 обнаружено снижение уровня в плацентарной ткани при гестозе относительноконтроля.
Аналогичные результаты были получены и другими авторами [Zhu et al., 2009;Enquobahrie et al., 2011]. В работе Lim L. P. et al. (2005) показано, что miR-1 подавляет синтезодного из белков, вовлеченных в регуляцию процессов инвазии трофобласта, - тканевогоингибитора металлопротеиназы 3 типа TIMP3 [Xiang et al., 2013] (рисунок 20). В литературеимеются данные о повышенной экспрессии этого белка в плаценте у женщин с гестозом [Xianget al., 2013].Полученные данные относительно изменения содержания miR-31 согласуются сисследованием Ishibashi O.
et al. (2012). miR-31 может играть существенную роль в регуляцииклеточного ответа на гипоксию [Liu et al., 2010]. Так одной из мишеней miR-31 являетсятранскрипт гена FIH (factor-inhibiting hypoxia-inducible factor), кодирующего ингибиторгипоксия-индуцируемого фактора [Liu et al., 2010] (рисунок 20). miR-31 может быть вовлечена впатогенез гестоза и в связи с ее участием в регуляции активности гена интегрина β3тромбоцитов ITGB3 [Augoff et al., 2011]. Это предположение подтверждается тем, что уженщин, страдающих гестозом, значительно снижена экспрессия ITGB3 в тканях плаценты[Zhou et al., 1997].119Рисунок 20 – Предполагаемя роль микроРНК miR-195, miR-223, miR-1 и miR-31 в патогенезегестоза [согласно Harapan and Andalas, 2015 с модификациями]Примечания - FIH - ингибитор гипоксия-индуцируемого фактора альфа, HIF1-α - индуцируемыйгипоксией фактор альфа, VEGFA - сосудистый эндотелиальный фактор роста A, ACVR2A - рецепторактивина A 2-го типа, NODAL - фактор роста и дифференцировки, TIMP3 - тканевой ингибиторметаллопротеиназы 3 типа, MMP2 – матриксная металлопротеиназа 2.В нашем исследовании, как и в работах других авторов [Wang et al., 2012; Xu et al., 2014],выявлено уменьшение содержания miR-34c в плацентах при гестозе.
Эксперименты накультурах раковых клеток показали взаимосвязь между повышением уровня miR-34c иподавлением экспрессии гена PAI1 [Savarimuthu Francis et al., 2014] (рисунок 21). Считается,что повышенный уровень PAI1 (в результате полиморфизма rs1799768 (-675 5G>4G),повышенного содержания miR-34c и других причин), как уже упоминалось выше, может статьпричиной снижения степени инвазии трофобласта на ранних сроках беременности, ухудшенияматочно-плацентарного кровотока, отложения фибрина в сосудах матки и повышениясвертываемости крови, что способствует развитию гестоза [Зайнуллин и др., 2007].Согласно результатам нашего исследования гестоз ассоциирован с повышеннымсодержанием miR-193b. Некоторыми авторами также был выявлен повышенный уровень этоймикроРНК в плацентах женщин с гестозом по сравнению со здоровыми женщинами [Ishibashi etal., 2012; Xu et al., 2014].