Диссертация (1145791), страница 14
Текст из файла (страница 14)
мв - микроворсинки; мх - митохондрия; пж- пластинка желтка; ск – секреторная клетка, эпр шероховатый эндоплазматический ретикулюм; я - ядроЖСС.Основная масса желтка гомогенная электроноплотная, но имеются также гетерогенныенеинтернализованные пластинки и желточные включения с электронопрозрачными иэлектроноплотными компонентами (Рисунки 19 А, Б). В месте контакта цитоплазмы ЖСС сжелточными пластинками от них отсекаются сферические и продолговатые фрагменты желтка(Рисунок 19 В). В зоне лизиса желтка наряду с эллиптическими представлены вытянутые иизогнутые электроноплотные желточные включения. Здесь же могут находиться желточныевключения с электроноплотными и электронопрозрачными элементами и напоминающие«дактилоскопические отпечатки». Собранные в розетки частицы гликогена содержатсяпреимущественно в базальной области ЖСС (Рисунок 19 Г). Можно видеть мультивезикулярныетела и включения, окруженные фибриллярным материалом.
Ближе к апикальной поверхностиЖССприсутствуютгетерогенныевключения,содержащиеэлектроноплотныйиэлектронопрозрачный материал. У личинок с большим количеством желтка в ЖМ гетерогенныежелточные включения могут быть окружены концентрическими мембранами (Рисунок 19 Д). Вцелом размер желточных включений уменьшается в направлении апикальной поверхности,однако и в апикальной области ЖСС иногда встречаются относительно крупные включения(Рисунок 19 Е). Многообразие включений свидетельствует об интенсивно протекающихпроцессах переработки желтка и транспорта его метаболитов к тканям личинки. Во время59активной утилизации желтка ЖСС личинок данио-рерио предстает как сложно организованнаясистема, ультраструктурные элементы которой демонстрируют максимальную степень развития(Кондакова, Ефремов, 2013, 2014; Кондакова, 2014; Кондакова и др., 2016aг; Kondakova, Efremov,2014b; Kondakova et al., 2016).Рисунок 19.
- Ультраструктура ЖСС личинок данио-рерио в возрасте 4-5 сут. п/о. Поперечныесрезы. ТЭМ. (А) Гетерогенная пластинка желтка (5 сут. п/о). (Б) Гетерогенные желточныевключения в цитоплазме ЖСС (4 сут. п/о). (В) Интернализация желтка (5 сут п/о). От массыжелтка отсекаются округлые и продолговатые фрагменты. (Г) Желточные включения в форме«дактилоскопических отпечатков» (наконечник стрелки) и гликоген в цитоплазме ЖСС (5 сут.60п/о). (Д) Гетерогенное включение, окруженное системой мембран (4 сут.
п/о). (Е) Участок ЖСС(5 сут. п/о). Митохондрии, окруженные шЭПР, желточное включение вблизи от паикальнойповерхности с длинными микроворсинками. гп - гетерогенная пластинка; гв - гетерогенноежелточное включение; жв - желточное включение; мв - микроворсинки; мх - митохондрия; пж пластинка желтка; эпр – шероховатый эндоплазматический ретикулюм, я - ядро.
Масштаб: В, Д= 2 μm.4.2. Cyprinus carpioПередняя область ЖСС личинок карпа образует вырост, прилегающий к печени,поджелудочной железе и сердцу (Рисунок 20 А). Этот вырост содержит многочисленные ядра ижелток, в том числе включения, слабо красящиеся гематоксилином и эозином (Рисунок 20 Б).Выступающие дорсолатеральные области ЖСС частично “облегают” кишку.Рисунок 20. - Морфологические особенности ЖСС карпа(4 сут. п/о). (А - окраска железным гематоксилином поГейденгайну; Б - окраска гематоксилином Караччи сэритрозином).
Парасагиттальные срезы.(А) Выростпередней области ЖСС, контакт с печенью. (Б) Выростпередней области ЖСС. Слабо окрашенные включения имногочисленные полиморфные ядра. кк – клетка крови;пж - пластинка желтка; пч – печень, я - ядро ЖСС.Масштаб: А = 20 µm, Б = 10 µm.Толщина ЖСС карпа вдоль дорсо-вентральной и переднезадней оси неодинакова накаждой исследованной стадии и меняется в ходе развития. Дорсомедиальная (под кишкой)область ЖСС тоньше остальных его участков (Рисунок 21). Она особенно тонка в периодэндогенного питания и несколько увеличивается во время смешанного питания. ЖСС утолщается61в направлении спереди – назад.
В выступающих областях ЖСС также содержится множествоядер (Рисунок 21 А). В латеральной области ядра располагаются по одному, либо парами,тройками и небольшими группами (Рисунок 21 Б). В каудальной области можно видетьскопление ядер (Рисунок 22 А). В передней, задней и дорсальной областях ЖСС карпа имеютсямногочисленные слабо красящиеся включения (Рисунки 20 Б, 21 Б, 22 А).Рисунок 21. - Морфологические особенностиЖСС карпа (5 сут. п/о).
Поперечные срезы на двухуровнях вдоль переднезадней оси. Окраскагематоксилином Караччи с эритрозином. (А) Насрезе видно выступающую дорсолатеральнуюобласть ЖСС с группой ядер. Толщина ЖССминимальна в дорсомедиальной (под кишкой)области. (Б) Дорсолатеральные области ЖССувеличены. Наконечником стрелки показан тяжсоединительной ткани. к - кишка; пж - пластинкажелтка; пжж – поджелудочная железа; пп –плавательный пузырь, я - ядро ЖСС. Масштаб: А= 50 μm, Б = 20 µm.Ядра ЖСС карпа разнообразны по размеру и форме, которая может быть как округлой иэллиптической, так и очень сложной (Рисунок 22). Организация хроматина – сетчатая илигранулярная, причем во втором случае ядра окрашены интенсивнее. Встречаются ядра,соединенные между собой мостиками (Рисунок 22Б).
Длина ядер ЖСС у личинок в возрасте 4сут. п/о составляет 16,85±0,49 µm, тогда как длина ядер кишечного эпителия - 7,49±0,07 µm.Наибольшая отмеченная длина ядер - 34,13 µm.ЖСС карпа отделен от органов пищеварительной системы тонким слоем соединительнойткани, но нельзя исключить, что имеются области прямого контакта ЖСС и печени. Желточныйкомплекс прикрепляется к стенке тела тяжами соединительной ткани (Рисунок 21 Б).62У личинок карпа пикнотические ядра и апоптотические тельца появляются в каудальнойобласти ЖСС ещё при наличии желточной массы.
В каудальной области к ЖСС спикнотическими ядрами прилегают многочисленные клетки, каждая с крупной эозинофильнойвакуолью (Рисунок 23) (Кондакова и др., 2015, 2016aг; Kondakova et al., 2015, 2016).Рисунок 22. - Разнообразие форм и размеров ядер ЖСС карпа. (А, Г - окраска железнымгематоксилином по Гейденгайну; Б, В - окраска гематоксилином Караччи с эритрозином). (А)Задняя область ЖСС (4 сут. п/о). Парасагиттальный срез. Крупные ядра ЖСС и слабоокрашенные включения.
(Б) Светлые и темные, с сетчатой структурой хроматина ядра ЖССличинки (6 сут. п/о). Фронтальный срез. Наконечником стрелки показаны ядра ЖСС,63соединенные «мостиком». (В) Передняя область ЖСС со скоплением полиморфных ядер (5 сут.п/о). Фронтальный срез. (Г) Лопастные ядра ЖСС с заметными ядрышками (4 сут. п/о).Парасагиттальный срез. к - кишка; кс – кровеносный сосуд, мп - мышцы плавника, пж - пластинкажелтка; пч - печень; я - ядро ЖСС. Масштаб: А = 20 μm, Б, В, Г = 10 µm.Рисунок 23. - Морфологические признаки апоптоза в ЖСС карпа (5-6 сут. п/о). Окраскагематоксилином Караччи с эритрозином.Показаны апоптотические тельца, фагоциты,пикнотические ядра и морфологически не измененые ядра ЖСС.
В передней области желточногокомплекса данных особей имелся желток. (А) Поперечный срез (5 сут. п/о); (Б) Парасагиттальныйсрез (6 сут. п/о); (В) Фронтальный срез (6 сут. п/о). ат - апоптотическое тельце; к -кишка; пя пикнотические ядра ЖСС; ф - фагоцит; я - морфологически не измененное ядро ЖСС. Масштаб:20 µm.644.3. Misgurnus fossilisНа стадии 8 (поздняя высокая бластула) образование внутренней области ЖСС ещё незавершено. Некоторые клетки бластодермы сохраняют связь с ЖСС. ЖСС заканчивает своеобразование к стадии 9. Эпиболия начинается между стадиями 9 и 10, и на стадии 9+ мы уже ненаблюдали в ЖСС митотических фигур.
На стадиях периода гаструляции 11-18 толщинавнутренней области ЖСС сильно варьирует. На стадиях 11-16 ЖСС утолщен с дорсальнойстороны (Рисунки 24 А, 24 Б). На стадии 11 средняя толщина дорсальной, анимальной ивентральной областей ЖСС составляет 13.04 ± 0.4 μm, 11.36 ±0.58 μm и 5.79 ± 0.16 μmсоответственно. На стадии 16 средняя толщина дорсальной, анимальной и вентральной областейЖСС - 14.65 ± 0.28 μm, 16.75 ± 0.44 μm и 7.25 ± 0.14 μm.
Различия между дорсальным ивентральным участками статистически значимы.В ходе гаструляции ЖСС утолщен и в анимальной области яйца. Внутренняя поверхностьЖСС образует «протуберанцы» внутрь желтка, в которых можно видеть ядра (Рисунок 24 В).Кроме того, внутри желтка встречаются энергиды с крупными ядрами. Цитоплазма краевой зоны,как и внутренняя область ЖСС, содержит желточные включения, но в меньшем количестве.Желточные включения присутствуют в диплоидных клетках зародыша до стадий сегментациивключительно.Рисунок 24. - Продольные срезы гаструл обыкновенного вьюна. Неравномерная толщина ЖССвдоль дорсо-вентральной оси. Окраска железным гематоксилином по Гейденгайну.
(А) Стадия11. (Б, В) Стадия 16. ЖСС утолщен в анимальной и дорсальной (под зародышевым щитком)областях. Наконечники стрелок указывают на «протуберанцы» внутренней поверхности ЖСС.65На рисунке (В) они показаны крупно. зщ – зародышевый щиток, кб - клетки бластодермы, кз –краевая зона ЖСС, пж – пластинка желтка, я - ядро ЖСС. Масштаб: А, Б = 100μm, В = 20μm.Динамика изменения линейных размеров ядер ЖСС в ходе гаструляции и последующихстадий показана на диаграмме (Рисунок 25). Средняя длина ядер ЖСС на стадиях 10, 14 и 21составляет 12,05 ± 0,15 μm, 14,05 ± 0,21 μm и 16,87 ± 0,35 μm.
Средняя длина ядер глубинныхклеток на соответствующих стадиях 9.51 ± 0.07 μm, 9.24 ± 0.07 μm и 6.726 ± 0.07 μm. Организацияи многообразие форм ядер ЖСС обыкновенного вьюна представлены на рисунке 26. На стадияхбластулы и гаструлы ядра ЖСС преимущественно правильной формы. К стадии 11 (стадиязародышевого кольца) встречаются единичные гигантские ядра (Рисунок 26 А). Относительномногочисленны ядра с перетяжками (Рисунок 26 Д); ядра, соединенные мостиками, очень редки(Рисунки 26 В, 26 Г). Количество ядер, длина которых превышает 18 μm, возрастает к стадии 14.Ядра светлые, особенно в наружной части ЖМ, с сетчатой организацией хроматина (Рисунки 26Б, 26 В, 26 Д) но встречаются и более темные ядра с большим количеством гетерохроматиновыхгранул (Рисунки 26 А, 26 Г, 26 Е).% 100,0093,0090,0080,5080,0082,8377,9170,0060,00Средняя длина ядер ЖССна стадии 10: 12,05 ± 0,15 μmна стадии 14: 14,05 ± 0,21 μmна стадии 21: 16,87 ± 0,35 μmна стадии 40: 17,02 ± 0,55 μmстадия 1050,00стадия 1440,00стадия 21стадия 4030,0020,0019,5010,0018,6016,163,503,50 2,331,011,160,000-9,910-19,920-29,930-39,9Длина ядер ЖСС, μmРисунок 25.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
