Отзыв ведущей организации (1145688)

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла

отзыв ведущей организации о научно-практической ценности диссертации Колобова Алексея Александровича «Получение рекомбинантного антагониста рецептора интерлейкина 36 человека и изучение его физико-химических и биологических свойств», представленной на защиту по специальности 03.01.04 — биохимия Актуальность темы диссертационного исследования Диссертационная работа Колобова Алексея Александровича посвящена разработке методики получения рекомбннантного антагониста рецептора Интерлейкина-36 человека и исследованию его некоторых физико-химических и биологических свойств. Актуальность исследования определяется необходимостью поиска новых эффективных нетоксичных препаратов для лечения тяжелых форм псориаза. До 4',4 населения развитых стран больны псориазом.

При этом у одной пятой больных развиваются тяжелые формы псориаза. При этом воспаление захватывает более 10',о поверхности кожи, возможно образование пустул. Болезнь может поражать суставы, что приводит к развитию псориатического артрита. Возможно длительное повышение температуры, Развитие псориаза обусловлено развитием хронического воспаления, в развитие которого вовлечено множество различных цитокинов, таких как ФНОи, ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-17. На данный момент для терапии тяжелого псориаза применяют препараты, подавляющие активность этих медиаторов воспаления.

Все они, однако, являются системными иммуносупрессорами, поэтому их применение вызывает иммунодефицитные состояния. Таким образом, необходим поиск более специфичных лекарств для терапии псориаза, способных подавлять хроническое воспаление в коже, не подавляя при этом системного иммунитета. Данные, полученные в последние годы, говорят о важной роли в регуляции воспаления в коже цитокинов семейства Интерлейкина-36.

В это семейство входят три провоспалительных фактора (ИЛ-36 альфа, бета и гамма) и один противовоспалитьльный (антагонист рецептора Интерлейкина-36, ИЛ- 36РА). Они конкурируют за связывание с общим рецептором, регулируя таким Ф" образом интенсивность воспаления в коже. При этом ИЛ-36 являются местными регуляторами воспаления и действуют только в покровных эпителиях, в основном в коже. Было установлено, что развитие самой тяжелой формы псориаза (генерализованного пустулезного псориаза) ассоциировано с мутациями в гене, кодирующем ИЛ-36РА.

Поэтому для лечения этого и похожих по этиологии заболеваний логично применять экзогенный ИЛ-36РА. Учитывая, что ИЛ-36РА представляется перспективным средством для лечения заболеваний, тяжело излечимых в настоящее время, разработка метода получения рекомбинантного ИЛ36РА и исследование его некоторых физико- химических и биологических свойств представляются актуальными и значимыми для практического здравоохранения и для более глубокого понимания биохимии цитокинов семейства ИЛ-36. Научная новизна исследования, полученных результатов, выводов и рекомендаций„сформулированных в диссертации Научная новизна проведенного исследования не вызывает сомнений. Впервые исследованы такие пост-трансляционные модификации ИЛ-36РА как дезамидирование и окисление, установлены причины этих модификаций и влияние, которое они оказывают на биологическую активность ИЛ-36РА.

В соответствии с полученными данными оптимизированы условия получения ИЛ36РА, таким образом, чтобы избежать этих изменений. Впервые применена к ИЛ-36РА технология получения белков с отщепленным инициаторным остатком метионина, основанная на применении двух отдельных плазмидных векторов (с геном ИЛ-36РА и с геном метионинаминопептидазы кишечной палочки), совмещенных в одном штаммепродуценте.

Впервые разработана технология получения биологически активного рекомбинантного ИЛ-36РА в штамме-продуценте на основе кишечной палочки, технология его очистки, создана фармацевтическая субстанция на его основе. Получаемый ИЛ-36РА всесторонне характеризован. Научная новизна работы также определяется применением комплекса современных генно-инженерных„культуральных, хром атографических и биохимических методов исследования, адекватной статистической обработкой и оригинальностью полученных результатов.

Связь исследования с планамн соответсгвуюшнх отраслей науки и народного хозяйства Диссертационная работа Колобова А,А. выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский Государственный университет». Работа проводилась в рамках проекта по разработке перспективных подходов к терапии псориаза при поддержке гранта Министерства Образования и Науки РФ по программе <сРазвитие фармацевтической и медицинской промышленности Российской Федерации на период до 2020 года и дальнейшую перспективу».

Значимость полученных результатов для теории и практики Исследование, выполненное Колобовым А.А., несомненно, имеет научную и практическую значимость. Научная значимость работы определяется изучением пост-трансляционных модификаций ИЛ-36РА, которое углубляет понимание биохимии этого белка и связи его структуры и функции. Практическая значимость работы состоит в разработке технологии получения препарата для лечения псориаза, в особенности генерализованного пустулезного псориаза, на основе ИЛ-36РА. Разработанная технология получения рекомбинантного ИЛ-36РА, которая позволяет получать до 10 г очищенного белка за один цикл производства, может быть масштабирована для промышленного производства готовой лекарственной формы ИЛ-36РА.

Тот факт, что на данный момент доклинические исследования эффективности и безопасности разработанного препарата как лекарства от псориаза уже завершены, открывает дорогу для дальнейших клинических испытаний препарата на людях. В случае успешный клинических испытаний разработанный препарат может применяться для лечения тяжелого псориаза. Обоснованность и достоверность научных положений, выводов и заключений Диссертационное исследование Колобова А.А. характеризуется высоким методическим уровнем и комплексным подходом к решению поставленных задач, что и обеспечило успешное достижение цели работы.

Достоверность представленных данных подтверждается собранным автором фактическим материалом и использованием современных и высокочувствительных методов исследования и адекватных методов статистической обработки полученных результатов. В целом, используемые в диссертационной работе методические подходы, объем и методы исследования позволили автору выполнить поставленные в работе цель и задачи, Выводы диссертации обоснованы и являются логическим итогом результатов проведенных исследований. По материалам исследования опубликовано 9 печатных работ, в том числе 2 статьи в журналах, входящих в перечень изданий, рекомендованных ВАК, 1 заявка на патент РФ (Рег.

№ 2017103888 от Об.02.2017). Материалы исследования и основные положения диссертационной работы доложены и представлены на 5 международных и региональных научных конференциях. Рекомендации по использованию результатов и выводов диссертационной работы Логичным способом использования полученных результатов были бы организация крупномасштабного производства препарата для лечения псориаза на основе ИЛ-Збра и проведение первой фазы клинических испытаний препарата на людях.

Разработанная система козкспрессии генов метионинаминопептидазы и гена интереса в кишечной палочке может быть использована при разработке методик получения других белков с отшепленным инициаторным остатком метионина. Материалы диссертационной работы могут быть использованы в качестве учебного материала на лекциях и практических занятиях для студентов-биологов и биотехнологов. Содержание диссертации и ее завершенность Диссертация изложена на 169 страницах машинописного текста и состоит из следующих глав: «Введение», «Обзор литературы»„«Материалы и методы», «Результаты и их обсуждение», «Заключение», «Выводы».

Список литературы включает 178 источников. Работа иллюстрирована 58 рисунками, 5 таблицами и 1 приложением. Оформление диссертации соответствует требованиям ГОСТ 7.0.11-2011. Во введении автор обосновывает актуальность исследования, оценивает степень разработанности темы, формулирует цель работы и 4 задачи, раскрывает научную новизну и значимость полученных результатов и 5 положений, выносимых на защиту, дает информацию о достоверности и апробированности результатов, о личном участии в экспериментах структуре и объеме диссертации. В обзоре литературы автор описывает различные аспекты биологии Интерлейкинов-36, их роль в регуляции воспаления в коже и патогенезе псориаза. Материалы и методы исследования изложены подробно и в мере, достаточной для того, чтобы описанные в работе эксперименты смог корректно повторить сторонний исследователь.

Характеристики

Тип файла PDF

PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.

Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.

Список файлов диссертации