Главная » Просмотр файлов » Диссертация

Диссертация (1144724), страница 42

Файл №1144724 Диссертация (Молекулярно–генетические и клеточные механизмы дифференцировки симбиотического клубенька) 42 страницаДиссертация (1144724) страница 422019-06-29СтудИзба
Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 42)

(Rathbun et al., 2002) показали, чторайон3'-нетранслируемый(3'-UTR)мРНКгена,кодирующегоарабиногалактанпротеин-экстензин, у гороха крайне консервативен посравнению с таковым у ортологичного гена M. truncatula MtN12. При этом на3'-UTRмРНКнаходятсяMtN12многочисленныеUUGU-сайтыдлясвязывания белков семейства Pumilio (PUF), которые вовлечены вобеспечение полярности клеток, например, у почкующихся дрожжей(Puf6p/ASH1 мРНК; Puf3p/Mdm12p мРНК) (Gu et al., 2004; García-Rodríguez etal., 2007), но их роль в растительных клетках не установлена. PUF белкисвязываются в качестве мишени с 3’-UTR последовательностью мРНК,несущей UUGU мотив (Gerber et al., 2004). Перед выходом из ядра димеры изРНК и белка ассоциируются в большие рибонуклеопротеиновые комплексы,который у почкующихся дрожжей называется «локасомой», содержащейкомпонентыShe2p,She3p,Myo4p,подавляющиетрансляциюиспособствующие передвижению РНК вдоль поляризованного актиновогоцитоскелета в направлении предопределенного района клетки (Gu et al.,2004).

Можно прежположить, что PUF белки участвуют в поляризованномапикальном росте инфекционных нитей. Таким образом, у мутантов саномальнымразвитиеминфекционныхнитейвезикулы,несущиеарабиногалактанпротеин-экстензины, отклоняются в сторону межклеточногоматрикса, а не в сторону просвета инфекционных нитей.У одиночных и двойных мутантов по гену Pssym33 в некоторыхинфекционных нитях отсутствовала метка МАС265. В таких инфекционныхнитях наблюдались признаки деградации бактерий: появлялись каплиполиоксибутиратавцитоплазме,расширялосьпериплазматическоепространство и происходил лизис бактериальных клеток. Также у мутантаРезультаты и обсуждение267RisFixV (Pssym42) наблюдалось отсутствие метки МАС265 в части матриксанекоторых инфекционных нитей.Полученные результаты показывают важность механизма направленнойсекреции арабиногалактанпротеин-экстензинов в просвет инфекционной нитидля ее нормального функционирования.3.6.

Анализ роли пероксида водорода в реализации генетическойподпрограммы инфекции тканей клубенька ризобиями у горохаИспользованная в работе серия симбиотических мутантов гороха споследовательными нарушениями симбиогенеза является удобной модельюдля анализа роли различных соединений при развитии клубенька.В двухнедельных клубеньках исходной линии SGE пероксид водородаактивно откладывался в стенках инфекционных нитей, причем количествопреципитатов пергидроксида церия увеличивалось по мере их созревания(Рисунок 43А-Д).

Пероксид водорода также присутствовал в матриксеинфекционных капель (Рисунок 43Е). В стареющих клубеньках преципитатыпергидроксидацерияактивнонакапливалисьвокругдеградирующихбактероидов (Рисунок 43Ж), в стенках инфекционных нитей (Рисунок 43З) ивокруг бактерий в инфекционных каплях (Рисунок 43И).У мутанта SGEFix−-1 (Pssym40) преципитаты пергидроксида цериянакапливались в стенках инфекционных нитей при их созревании сходнымобразом с диким типом (Рисунок 44А, Б), вокруг бактерий в инфекционныхнитях (Рисунок 44В), а также вокруг ювенильных бактероидов (Рисунок 44Г,Д).

Активная аккумуляция преципитатов пергидроксида церия такженаблюдаласьвмежклеточномпространстве,соседствующими клетками (Рисунок 44Е).формируемом3-мяРезультаты и обсуждение268Рисунок 43. — Локализация пероксида водорода в симбиотическихклубеньках гороха дикого типа SGE(А-Д) последовательные стадии накопления пероксида водорода винфекционной нити от внутренней стенки инфекционной нити (А) через всютолщину стенки инфекционной нити (Г) с последующим отложением вматриксе инфекционной нити (Д). (Е) отложение пероксида водорода вматриксе инфекционной капли.

(Ж-И) отложение пероксида водорода встареющих инфицированных клетках: вокруг бактероидов (Ж), в стенке иматриксе инфекционной нити (З) и в матриксе инфекционной капли (И).Пероксид водорода откладывается в виде электронно-плотных преципитатовпергидроксида церия (показаны стрелками). ин — инфекционная нить, ик —инфекционная капля, син — стенка инфекционной нити, б — бактерия, дба— деградирующий бактероид. Масштабная линейка = 500нм.Результаты и обсуждение269Рисунок 44.

— Локализация пероксида водорода в симбиотическихклубеньках гороха мутанта SGEFix−-1 (Pssym40)(А-В) последовательные стадии накопления пероксида водорода винфекционной нити от внутренней стенки инфекционной нити (А) через всютолщину стенки инфекционной нити (Б) с последующим отложением вматриксе инфекционной нити и вокруг бактерий (В). (Г и Д) отложениепероксида водорода вокруг ювенильных дифференцирующихся бактероидов.(Е) отложение пероксида водорода в растительных клеточных стенках имежклеточном матриксе. Пероксид водорода откладывается в видеэлектронно-плотных преципитатов пергидроксида церия (показаныстрелками).

кс — клеточная стенка, мкп — межклеточное пространство, ин— инфекционная нить, син — стенка инфекционной нити, б — бактерия, юба— ювенильный бактероид. Масштабная линейка (Г) = 2 мкм, (А-В, Д и Е) =500 нм.Для мутанта SGEFix−-2 (Pssym33) была характерна аккумуляциякрупных преципитатов пергидроксида церия с наружной поверхности стенокутолщенных инфекционных нитей (Рисунок 45А), хотя отложение мелкихперципитатов также наблюдалось (Рисунок 45Б, В), в том числе и в толщестенки инфекционной нити (Рисунок 45В). Для данного мутанта характерноредкое формирование инфекционных капель, в которых наблюдалосьРезультаты и обсуждение270чрезмерное накопление пероксида водорода в матриксе и вокруг бактерий(Рисунок 45Г).Рисунок 45.

— Локализация пероксида водорода в симбиотическихклубеньках гороха мутанта SGEFix−-2 (Pssym33)(А) накопление пероксида водорода на внешней поверхности стенкиинфекционной нити и на растительной клеточной стенке в виде крупныхпреципитатов. (Б и В) отложение пероксида водорода на внешнейповерхности и в толще стенки инфекционной нити в виде мелкихпреципитатов (Б) и более крупных отложений (В). (Д) чрезмерноенакопление пероксида водорода в матриксе и вокруг бактерий винфекционной капле. Пероксид водорода откладывается в виде электронноплотных преципитатов пергидроксида церия (показаны стрелками).

кс —клеточная стенка, ин — инфекционная нить, ик — инфекционная капля, син— стенка инфекционной нити, б — бактерия. Масштабная линейка (А) = 2мкм, (Б-Г) = 500нм.При анализе клубеньков дикого типа сорта Finale также наблюдалосьактивноеотложениепреципитатовпергидроксидаинфекционных нитей при их созревании.цериявстенкахРезультаты и обсуждениеУмутантаRisFixV271(Pssym42)аккумуляцияпреципитатовпергидроксида церия наблюдалась в матриксе инфекционных нитей и капель(Рисунок 46А-В), а также в утолщенных стенках инфекционных нитей,заполненных каллозой (Рисунок 46Д), стенках инфицированных клеток(Рисунок 46Е) и вокруг преждевременно стареющих бактероидов (Рисунок46Д).Рисунок 46.

— Локализация пероксида водорода в симбиотическихклубеньках гороха мутанта RisFixV (Pssym42)(А, Б) последовательные стадии накопления пероксида водорода винфекционной нити от внутренней стенки инфекционной нити (А) спредпочтительным и чрезмерным отложением в матриксе инфекционнойнити (Б). (В) отложение пероксида водорода в матриксе инфекционнойкапли. (Г-Е) пероксид водорода в стенке инфекционной нити (Г) и клеточнойстенке (Е) с накоплением каллозы, а также вокруг стареющих бактероидов(Д). Пероксид водорода откладывается в виде электронно-плотныхпреципитатов пергидроксида церия (показаны стрелками). ин —инфекционная нить, ик — инфекционная капля, син — стенка инфекционнойнити, б — бактерия, ба — бактероид.

Масштабная линейка = 500нм.Результаты и обсуждение272Был проведен анализ пространственной локализации АФК на примерепероксида водорода в клубеньках гороха дикого типа, а также трех мутантов,формирующих неэффективные клубеньки с ярко выраженными защитнымиреакциями (см. раздел 3.11). Было показано, что в клубеньках гороха дикоготипа пероксид водорода был ассоциирован со стенками инфекционных нитейи клеточными стенками, матриксом инфекционных нитей и капель, в то жевремя он не детектировался в симбиосомах. В стареющих клубенькахнаблюдалась аккумуляция пероксида водорода вокруг деградирующихбактероидов, в стенке и матриксе инфекционной нити и матриксеинфекционной капли.

Аналогичное распределение пероксида водороданаблюдалось ранее в клубеньках люцерны, гороха, сои (Santos et al., 2001;Alesandrini et al., 2003; Rubio et al., 2004; Kopcińska, 2009). Отсутствиепероксида водорода в симбиосомах может быть связано с антиоксидантнойсистемой, функционирующей как в инфицированной клетке, так и всимбиосомах (Becana et al., 2010; Ribeiro et al., 2015).В то же время у всех проанализированных мутантов наблюдалисьаномалии в локализации пероксида водорода.

Для мутанта SGEFix−-1(Pssym40) было характерно присутствие пероксида водорода вокругювенильных бактероидов, для RisFixV (Pssym42) — вокруг преждевременностареющих бактероидов, у мутанта SGEFix−-2 (Pssym33) — вокругутолщенных стенок инфекционных нитей. Такое аномальное распределениепероксида, вероятно, связано с активацией в этих мутантах сильныхзащитных реакций (см.

Характеристики

Список файлов диссертации

Молекулярно–генетические и клеточные механизмы дифференцировки симбиотического клубенька
Свежие статьи
Популярно сейчас
А знаете ли Вы, что из года в год задания практически не меняются? Математика, преподаваемая в учебных заведениях, никак не менялась минимум 30 лет. Найдите нужный учебный материал на СтудИзбе!
Ответы на популярные вопросы
Да! Наши авторы собирают и выкладывают те работы, которые сдаются в Вашем учебном заведении ежегодно и уже проверены преподавателями.
Да! У нас любой человек может выложить любую учебную работу и зарабатывать на её продажах! Но каждый учебный материал публикуется только после тщательной проверки администрацией.
Вернём деньги! А если быть более точными, то автору даётся немного времени на исправление, а если не исправит или выйдет время, то вернём деньги в полном объёме!
Да! На равне с готовыми студенческими работами у нас продаются услуги. Цены на услуги видны сразу, то есть Вам нужно только указать параметры и сразу можно оплачивать.
Отзывы студентов
Ставлю 10/10
Все нравится, очень удобный сайт, помогает в учебе. Кроме этого, можно заработать самому, выставляя готовые учебные материалы на продажу здесь. Рейтинги и отзывы на преподавателей очень помогают сориентироваться в начале нового семестра. Спасибо за такую функцию. Ставлю максимальную оценку.
Лучшая платформа для успешной сдачи сессии
Познакомился со СтудИзбой благодаря своему другу, очень нравится интерфейс, количество доступных файлов, цена, в общем, все прекрасно. Даже сам продаю какие-то свои работы.
Студизба ван лав ❤
Очень офигенный сайт для студентов. Много полезных учебных материалов. Пользуюсь студизбой с октября 2021 года. Серьёзных нареканий нет. Хотелось бы, что бы ввели подписочную модель и сделали материалы дешевле 300 рублей в рамках подписки бесплатными.
Отличный сайт
Лично меня всё устраивает - и покупка, и продажа; и цены, и возможность предпросмотра куска файла, и обилие бесплатных файлов (в подборках по авторам, читай, ВУЗам и факультетам). Есть определённые баги, но всё решаемо, да и администраторы реагируют в течение суток.
Маленький отзыв о большом помощнике!
Студизба спасает в те моменты, когда сроки горят, а работ накопилось достаточно. Довольно удобный сайт с простой навигацией и огромным количеством материалов.
Студ. Изба как крупнейший сборник работ для студентов
Тут дофига бывает всего полезного. Печально, что бывают предметы по которым даже одного бесплатного решения нет, но это скорее вопрос к студентам. В остальном всё здорово.
Спасательный островок
Если уже не успеваешь разобраться или застрял на каком-то задание поможет тебе быстро и недорого решить твою проблему.
Всё и так отлично
Всё очень удобно. Особенно круто, что есть система бонусов и можно выводить остатки денег. Очень много качественных бесплатных файлов.
Отзыв о системе "Студизба"
Отличная платформа для распространения работ, востребованных студентами. Хорошо налаженная и качественная работа сайта, огромная база заданий и аудитория.
Отличный помощник
Отличный сайт с кучей полезных файлов, позволяющий найти много методичек / учебников / отзывов о вузах и преподователях.
Отлично помогает студентам в любой момент для решения трудных и незамедлительных задач
Хотелось бы больше конкретной информации о преподавателях. А так в принципе хороший сайт, всегда им пользуюсь и ни разу не было желания прекратить. Хороший сайт для помощи студентам, удобный и приятный интерфейс. Из недостатков можно выделить только отсутствия небольшого количества файлов.
Спасибо за шикарный сайт
Великолепный сайт на котором студент за не большие деньги может найти помощь с дз, проектами курсовыми, лабораторными, а также узнать отзывы на преподавателей и бесплатно скачать пособия.
Популярные преподаватели
Добавляйте материалы
и зарабатывайте!
Продажи идут автоматически
6418
Авторов
на СтудИзбе
307
Средний доход
с одного платного файла
Обучение Подробнее