Диссертация (1141412), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Но, несмотряна широкое применение их в народной медицине, в официнальной они не используются. Дляизучения возможности использования растений народной медицины в медицинской практикенеобходимы исследования по изучению их химического состава биологически активныхвеществ (БАВ), разработке показателей качества и методов стандартизации сырья. В связи сэтим фармакогностическое изучение кульбабы шершавоволосистой и кульбабы осеннейявляется актуальной задачей.Степеньразработанноститемыисследования.Фитохимическимизучениемнадземных и подземных органов кульбабы осенней и кульбабы шершавоволосистойзанимались отечественные и зарубежные ученые А.
Гроссгейм, С. Сапожников, С. Станков, J.Pyrek, С. Zidorn, T. Barzynski, S. Hooper, R. Chandler, O. Volker и M. Kapula. Ими былиобнаружены отдельные представители таких классов биологически активных веществ какфлавоноиды, фенолкарбоновые кислоты, сесквитерпены, витамины, тритерпены, каротиноиды,стероиды, жирные масла и углеводы. C. Zidorn и соавторы изучили противовоспалительную ицитотоксическую активность сесквитерпенов, выделенных из кульбабы шершавоволосистой.Несмотря на проведенные исследования, кульбаба осенняя и кульбаба шершавоволосистаяпродолжают оставаться малоизученными растениями, так как изучение различных классовбиологически активных соединений проводилось фрагментарно и не носило системныйхарактер.
Стандартизация сырья кульбабы не проводилась.Цель исследования. Целью настоящей работы явилось фармакогностическое изучениетравы кульбабы осенней и кульбабы шершавоволосистой, произрастающей на территорииЦентральной России, проведение стандартизации и диагностики сырья.Задачи исследования. Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:71.фитохимическое изучение кульбабы осенней и кульбабы шершавоволосистой;2.изучение фенольных соединений;3.выделение и изучение полисахаридных комплексов;4.проведениеморфолого-анатомическихисследованийкульбабыосеннейикульбабы шершавоволосистой;5.разработка методик определения содержания флавоноидов и полисахаридов;6.изучение динамики кумуляции флавоноидов и полисахаридов в зависимости отфазы вегетации для установления сроков заготовки сырья;7.проведение фармакологического скрининга;8.получение и стандартизация водных извлечений;9.разработка проекта нормативного документа «Кульбабы трава».Научная новизна.
Впервые изучен минеральный и аминокислотный состав травыкульбабы осенней и кульбабы шершавоволосистой. Аминокислотный состав растений родакульбаба представлен 15 аминокислотами, из которых 7 являются незаменимыми. В траверастенийустановлено15минеральныхэлементов.Длякаждоговидаопределеныпреобладающие аминокислоты и минеральные вещества.Методами бумажной, тонкослойной, газожидкостной и высокоэффективной жидкостнойхроматографии в сырье исследуемых видов идентифицировано 17 веществ фенольной природы,13 из которых установлены для данных видов впервые. Обнаружены кумарины: скополетин,умбеллиферон,дубильныхпроизводныекумарин;веществ:флавоноиды:галлокатехин,фенолкарбоновыхцинарозид,лютеолин,эпигаллокатехин,кислот:хлорогеновая,апигенин;эпикатехин,кофейная,производныеэпикатехингаллат;галловая,эллаговая,розмариновая, феруловая, п-кумаровая кислоты.Выделены и изучены полисахариды кульбабы осенней и кульбабы шершавоволосистой,которые представлены водорастворимыми полисахаридными комплексами (ВРПС), пектинами,гемицеллюлозамиАиБ.Проведеноизучениекачественногоиколичественногомоносахаридного состава полисахаридных фракций.
Изучены функциональные группыпектинов (свободные карбоксильные, метоксилированные карбоксильные и метоксильныегруппы).Методом ГЖХ изучены карбоновые кислоты, представленные органическими, жирнымии фенолкарбоновыми кислотами в сырье изучаемых видов. В траве растений установленоналичие 37 карбоновых кислот.Среди органических кислот преобладающими являются,яблочная, лимонная и левулиновая кислоты, среди жирных – линолевая, линоленовая ипальмитиновая кислоты, среди фенолкарбоновых кислот – п-оксибензойная, п-кумаровая иферуловая кислоты.8Проведено морфолого-анатомическое изучение травы кульбабы осенней и кульбабышершавоволосистой. Установлены морфологические и микродиагностические признаки дляопределения подлинности сырья.В ходе проведения скрининговых фармакологических исследований водных и водноспиртовых извлечений, а также полисахаридных комплексов травы кульбабы осенней икульбабы шершавоволосистой установлено наличие антиоксидантной, противовоспалительной,отхаркивающей и антибактериальной активностей.Теоретическая значимость работы.
Результаты проведенных исследований позволяютрасширить представления о химическом составе, морфолого-анатомических признаках ифармакологической активности травы кульбабы осенней и кульбабы шершавоволосистой.Практическая значимость результатов исследования. Установлены оптимальныеусловия экстрагирования из сырья флавоноидов и полисахаридов. Проведена стандартизациятравы кульбабы осенней и кульбабы шершавоволосистой по содержанию флавоноидов иполисахаридов.флавоноидовРазработанывпересчетеметодикинаспектрофотометрическогоцинарозидигравиметрическогоопределениясуммыопределениясуммыполисахаридов для изучаемых видов.
Методики валидированы по показателям линейности,правильности, воспроизводимости и повторяемости.Результаты изучения фармакологической активности травы кульбабы осенней икульбабы шершавоволосистой, являются базисом для последующего углубленного изучениявидов с целью их внедрения в медицинскую практику.Результаты диссертационного исследования используются в учебных, процессах, а такжевнедрены в практическую деятельность:- методика количественного определения суммы флавоноидов в траве кульбабы осенней(акт внедрения в научно-исследовательскую и учебную работу кафедры фармакогнозии иботаники КГМУ от 02.03.2015 г., акт внедрения в работу отдела контроля качества ООО Фирмы«Здоровье» от 17.03.2015 г.);- методика количественного определения суммы полисахаридов в траве кульбабыосенней(актвнедрениявнаучно-исследовательскуюиучебнуюработукафедрыфармакогнозии и ботаники КГМУ от 02.03.2015 г., акт внедрения в работу отдела контролякачества ООО Фирмы «Здоровье» от 19.02.2015 г.);На базе отдела контроля качества ООО Фирмы «Здоровье» проведена апробация проектанормативного документа «Кульбабы трава» (акт апробации от 16.07.2015 г).Методологияисследованияивключаетпоследовательностьметодыисследования.Методологиянаучнообоснованнуюидействий,включающуюфармакогностическогоцелесообразноорганизованнуюинформационно-исследовательский,9фитохимический,блоки.Встандартизационный,процессефармакогностическогомакроскопический,выполненияисследованияморфолого-анатомическийдиссертационнойиспользованымикроскопический,ифармакологическийработыхимические,фармакологический,припроведениифизико-химические,микробиологическийистатистические методы анализа.Основные положения, выносимые на защиту:•результатыфитохимическогоизучениякульбабыосеннейикульбабышершавоволосистой;•результаты изучения фенольных соединений;•результаты исследования полисахаридных комплексов;•результаты морфолого-анатомических исследований кульбабы осенней и кульбабышершавоволосистой, характеристики подлинности сырья;•результатыразработокметодикколичественногоопределенияфлавоноидовиполисахаридов, характеристики и нормы качества сырья;•результаты изучения динамики кумуляции флавоноидов и полисахаридов в зависимостиот фазы вегетации;•результаты фармакологического скрининга травы кульбабы осенней и кульбабышершавоволосистой.Степеньдостоверностирезультатов.Достоверностьполученныхрезультатовподтверждена проведением большого объема экспериментальных исследований и применениемсовременныхметодовисследования,позволяющих получать воспроизводимые и достоверные результаты.
Полученные результатыисследований статистически обработаны в соответствии с требованиями ГФ ХI издания припомощи программного обеспеченья Microsoft Excel 2013.Апробация работы. Основные положения диссертационной работы представлены на IIIМеждународной научно-практической конференции «Современные проблемы отечественноймедико-биологической и фармацевтической промышленности. Развитие инновационного икадровогопотенциалаПензенскойобласти»(г.Пенза,21-23ноября2013г.),XIIМеждународной конференции «Медико-социальная экология личности: состояниеиперспективы» (г.
Минск 11-12 апреля 2014 г.), 79-ой Всероссийской научной конференциистудентовимолодыхучёныхсмеждународнымучастием«Молодёжнаянаукаисовременность» (г. Курск, 16-17 апреля 2014 г.), 80-ой Всероссийской научной конференциистудентов и молодых ученых с международным участием, посвященная 80 -летию КГМУ«Молодежная наука и современность» (г. Курск, 15-16 апреля 2015 г.), международной научнопрактической конференции «Свободные радикалы в химии и жизни» (г. Минск, 25-26 июня102015 г.).Апробация работы проходила на межкафедральной научно-практической конференциикафедр фармацевтического и медико-биологического профиля КГМУ (23 октября 2015, г.Курск) и на кафедре фармакогнозии ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М.