Диссертация (1141404), страница 26
Текст из файла (страница 26)
8.1.3. Цитотоксические эффекты НГМ и разведений G. woronowii на культуреклеток Fet MSC.180Рис. 8.1.4. Цитотоксические эффекты НГМ и разведений G. nivalis на культуреклеток Fet MSC.На рис. 8.1.1-8.1.4 и таб. 8.1.1-8.1.2 представлены результаты исследованияцитотоксических эффектов двух видов подснежников на культурах клеток HeLa иFet MSC: чем ниже высота столбика гистограммы, тем более сильныйцитотоксический эффект оказывает образец настойки или её разведение.Влияние СО галантамина и ликорина на жизнеспособность клеток.Исследованные стандарты АА в концентрациях 1 и 0,5 мг/мл оказывают влияниена жизнеспособность клеток линий HeLa и Fet MSC.
Клетки HeLa и Fet MSCболее чувствительны к ликорину по отношению к галантамину. Галантаминпрактически не оказывает цитотоксических эффектов на клетки линии Fet MSC.Цитотоксические эффекты ликорина несколько более выражены на культуреопухолевых клеток линии HeLa, нежели на линии нормальных клеток Fet MSC.Установлено, что наиболее выраженной цитотоксической активностьюобладают сами настойки и их гомеопатические разведения D1, D2, С1 G.woronowii и G. nivalis. Таким образом, изученные образцы НГМ и разведенийгомеопатических двух видов подснежников оказывают цитотоксические эффектына опухолевые клетки HeLa и нормальные клетки Fet MSC. Цитостатические181эффекты более выражены у НГМ и разведений подснежника белоснежного,цитостатическая активность подснежника Воронова несколько ниже.
Наосновании полученных экспериментальных данных можно сделать заключение отом, что биологическая активность двух видов подснежников различается за счётразличного компонентного состава алкалоидов.ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 81. Исследованы цитотоксические эффекты НГМ подснежников Воронова ибелоснежного на культуре клеток HeLa и Fet MSC.2. Установлено, что наиболее высокая цитотоксическая активностьхарактерна для НГМ и гомеопатических разведений D1, D2, С1 подснежниковВоронова и белоснежного.3. На основе полученных данных можно сделать вывод о том, чтосуществуютразличиявуровняхцитотоксическойактивностиНГМигомеопатических разведений D1, D2, С1 подснежников Воронова и белоснежного.182ОБЩИЕ ВЫВОДЫ1.
Выполнено информационно-аналитическое изучение литературныхисточников, необходимых для выработки современных требований к качествуГомЛРС и НГМ двух видов подснежника. Показана актуальность созданияподходов к стандартизации ГомЛРС и НГМ G. woronowii и G nivalis,ориентированных на идентификацию и количественное определение маркерныхБАС с применением современных инструментальных физико-химическихметодов анализа, главный из которых ВЭЖХ с УФ- и МС- типом детектирования.2. В сравнительном аспекте изучено морфолого-анатомическое строениесвежих целых растений (луковиц, корней, листьев, цветков) G.
woronowii и Gnivalis. Установлены диагностические значимые признаки (строение луковиц,наличие воскового налета на листьях, строение крахмальных зерен, рафидоксалата кальция, устьичного аппарата, клеток эпидермиса, метрологическаяхарактеристика). Комплекс установленных признаков позволяет проводитьвидовую идентификацию ГомЛРС.3. С применением современных инструментальных физико-химическихметодов (ГХ-МС, ВЭЖХ-УФ, УЭЖХ-УФ-МС, ААС, РФА и др.) изученкачественный состав и определено содержание основных БАС ГомЛРС и НГМ G.woronowii и G nivalis: АА (галантаминового, тацеттинового, ликоринового,гемантаминового типов), флавоноидов (гликозидов кверцетина, кемпферола иизорамнетина), органических (яблочной, янтарной, щавелевой) и гидроксикоричных (нео-, крипто-, хлорогеновой) кислот, аминокислот, углеводов(свободных и связанных), установлен элементный состав.4.
Разработана и валидирована (по параметрам – специфичность,линейность, предел обнаружения и предел количественного определения,правильность, повторяемость, точность, стабильность и устойчивость) ВЭЖХ-УФметодика определения содержания АА в ГомЛРС и НГМ G. woronowii и G nivalisв пересчете на галантамин или ликорин, которая включена в проекты ФС.5. С использованием фармакопейных методик определены показателикачества ГомЛРС (влажность, органическая и минеральная примеси) и НГМ183(плотность, сухой остаток) G. woronowii и G. nivalis, установлены их нормы,разработаныхарактеристикиподлинности(внешниеимикроскопическиепризнаки, качественные реакции, ТСХ).6.
Исследованы цитотоксические эффекты НГМ подснежников Воронова ибелоснежного на культуре клеток HeLa и Fet MSC. Установлено, что наиболеевысокая цитотоксическая активность характерна для НГМ и гомеопатическихразведений D1, D2, С1.7. В соответствии с современными требованиями разработано и оформлено4 проекта фармакопейных статей: «Подснежник Воронова растения целые свежие– Galanthus woronowii planta tota recens», «Galanthus woronowii, Galanthus Настойка гомеопатическая матричная», «Подснежник белоснежный растенияцелые свежие – Galanthus nivalis planta tota recens», «Galanthus nivalis, Galanthus Настойка гомеопатическая матричная».Практические рекомендацииРезультаты исследования комплекса БАС подснежников представляютинтерес для научных работников, занимающихся изучением химического составарастительного сырья, а также разработкой и внедрением в практическое здравоохранение инновационных фитопрепаратов и нормативной документации.Разработанные методики целесообразно использовать в контрольно-аналитических лабораториях для идентификации и количественного определения БАС вГомЛРС и НГМ подснежников.Перспективы дальнейшей разработки темыДанные исследования могут служить основой для дальнейшего совершенствования методов оценки качества сырья подснежников и препаратов на ихоснове.
В будущем актуальным будет проведение доклинических и клиническихисследований с целью выявления эффективности и безопасности лекарственныхформ на основе подснежников.184СПИСОК СОКРАЩЕНИЙАА – амариллисовые алкалоидыБАС – биологически активные соединенияБХ – бумажная хроматографияВФС – временная фармакопейная статьяВЭЖХ – высокоэффективная жидкостная хроматографияГЖХ – газожидкостная хроматографияГКК – гидроксикоричные кислотыГФ – государственная фармакопеяГомЛРС – гомеопатическое лекарственное растительное сырьеГомЛП – гомеопатический лекарственный препаратГомЛС – гомеопатическое лекарственное средствоИК – инфракрасныйКЭ – каппилярный электрофорезЛП – лекарственный препаратЛС – лекарственное средствоМС – масс-спектрометрияМИ – молекулярный ионНД – нормативный документНГМ – настойка гомеопатическая матричнаяНФ – неподвижная фазаОК – органические кислотыПО – программное обеспечениеПСХ – полисахаридыПФ – подвижная фазаРСО – рабочий стандартный образецРФА – рентгенофлуоресцентный анализСО – стандартный образец185СФМ – спектрофотометрияТСХ – тонкослойная хроматографияТУ – технические условияУФ – ультрафиолетовый (спектр)ФС – фармакопейная статьяФСП – фармакопейная статья предприятияХП – хроматографическая пластинкаХЭ – химический элементЯМР – ядерно-магнитный резонансNS (negative scan) – режим регистрации негативных ионовPS (positive scan) – режим регистрации позитивных ионовRf – расстояние от линии старта до середины пятна, отнесенное к расстоянию отлинии старта до линии фронта растворителяRT (retention time) – время удерживания186ЛИТЕРАТУРА1.
Андреев, Н., Анчев, М., Кожухаров, Ст. и др. Определител на висшитерастения в България: (Плаунообразни, хвощообразни, папратообразни ицветни растения)/Под общата ред. на Ст. Кожухаров //София: Наука иизкуство. – 1992. – 787 с.2. Артюшенко, З.Т. Амариллисовые (Amaryllidaceae Jaume St.-Hilaire) СССР.Морфология, систематика и использование / З.Т. Артюшенко. – АН СССР.Ботан.
ин-т им. В.Л. Комарова. Л. : Наука, 1970. – С. 41-83.3. Асоева, Е.З. Разделение и изучение количественного состава алкалоидовподснежника Краснова / Е.З. Асоева, E.H. Вергейчик // Биол. науки. – 1967. –№ 7. – С. 98-101.4. Березов, Т.Т. Биологическая химия / Т.Т. Березов, Б.Ф. Коровкин – Москва:Медицина, 2004.5. Биологический энциклопедический словарь. Гл. ред. М. С. Гиляров – 2-е изд.,исправл. – М.: Сов. Энциклопедия, 1986. – 864 c.6. Боков,Д.О.Текущеесостояниеидальнейшиеперспективыфармакогностических исследований представителей подкласса Лилииды(Liliidae)/ Д.О. Боков, И.А.
Самылина// Инновации в медицине и фармации2014: материалы дистанционной научн.-практич. конф. студентов и молодыхученых( 11 ноября 2014 г.). Минск: БГМУ, 2014. – С. 503-507.7. Боков, Д.О. Использование современных физико-химических методов анализа(ВЭЖХ/МС/МС, спектрофотометрии) для идентификации и определениясодержаниябиологическиактивныхсоединенийвлекарственномрастительном сырье и препаратах на его основе / Д.О. Боков, И.А. Самылина //Сборник материалов Международной научно-практической конференции«Перспективы внедрения инновационных технологий в фармации». ОреховоЗуево(24-25 ноября 2014 г): МГОГИ, 2014.
– С.27-36.8. Боков, Д.О. Изучение, стандартизация препаратов на основе представителейAmaryllidaceae,перспективныхдляфармакологическойрегуляциинейродегенеративных заболеваний и мигрени / Д.О. Боков, И.А. Самылина//187Материалы финала общероссийского научно-практического мероприятия«Эстафета вузовской науки–2014» III молодежный медицинский форум«MedWAYS – перспективные научные направления–2014» (4-5 декабря 2014г).– М.: Изд-во Первого МГМУ им. И.М.
Сеченова, 2014. – С. 102.9. Боков, Д.О. Современные аспекты применения в гомеопатии некоторыхлекарственных растений (сем. Amaryllidaceae, Trilliaceae) средней полосыРоссии при лечении неврологических расстройств / Д.О. Боков, И.А. Самылина// Гомеопатический ежегодник. Сборник материалов XXV Московскоймеждународной гомеопатической конференции «Развитие гомеопатическогометода в современной медицине» (23 - 24 янв. 2015 г).– М.: Московскийгомеопатический центр, 2015. – С. 180-183.10.Боков, Д.О. Химический состав и применение в медицине подснежника / Д.О.Боков, И.А.
Самылина // Материалы III науч.-практ. конф. «Современныеаспектыиспользованиярастительногосырьяисырьяприродногопроисхождения (19 февраля 2015 г.). Сеченовский вестник. – 2015. – №1 (19). –С. 78-79.11.Боков, Д.О. Методические подходы к оценке безопасности гомеопатическихлекарственных средств на основе лекарственного растительного сырьяподснежников / Д.О. Боков, И.А.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
