Диссертация (1141379), страница 9
Текст из файла (страница 9)
Спектр поглощения 0,02% раствора сухого экстракта имбиряв 95% этиловом спирте.58Рисунок 3.11. Спектр поглощения 0,02% раствора сухого экстракта имбиряв 20% изопропиловом спирте.Рисунок 3.12. Спектр поглощения 0,02% раствора сухого экстракта имбиряв 40% изопропиловом спирте.Согласно данным рисунков в извлечении из экстракта была зафиксированаодна полоса поглощения при длине волны 281±2 нм, не изменяющаяся вразличных растворителях, что предполагает наличие фенольных соединений. Наосновании того, что фенольные соединения являются ароматическими и имеютмаксимумы поглощения в интервале длин волн от 270 до 290 нм, посчитали, чтоданный максимум поглощения соответствует гингеролам и шогаолам, что было впоследующем подтверждено результатами ВЭЖХ с масс-детектированием.По характеру прогиба максимума можно судить о растворимостифенольных соединений экстракта в используемых растворителях.
Наиболеевысокая растворимость наблюдалась в 50% этаноле и 40% изопропиловом спирте.59Спектр поглощения раствора в 40% изопропиловом спирте имеет наиболеехарактерный максимум поглощения, что позволяет использовать данныйрастворитель как для качественного анализа и количественного определения.При анализе абсорбции растворов экстракта в 40% изопропиловом спиртеустановлена линейная зависимость между концентрацией фенольных соединений(гингеролов и шогаолов) и оптической плотностью растворов в диапазонеконцентраций раствора экстракта от 4,3×10-5 до 30,1×10-5 г/мл, что видно изданных рис. 3.13.1,4D1,21y = 0,0304x + 0,0080,80,60,40,2005101520253035404550Концентрация, г/мл·10-5Рис. 3.13.
Зависимость оптической плотности (D) от концентрации сухогоэкстракта.3.4.3. Определение суммы фенольных соединений в пересчете на 6-гингеролметодом обратной броматометрииИзучаливозможностьиспользованиякакметодаколичественногоопределение фенольных соединений метода броматометрии (обратный способ).60После прибавления 4-5 мл хлороформа и титрования выделившегося йода0,1н раствором натрия тиосульфата наблюдается картина представленная нарисунке.3.14.Переходокраски вк.т.т.Рисунок 3.14.
Переход окраски в к.т.т.Параллельно проводят контрольный опыт.1 мл 0,1н раствора калия бромата соответствует 0,01472 г C17H26O4 (6гингерола).Содержание суммы фенольных соединений в пересчете на 6-гингерол впроцентах (Х) вычисляют по формуле:(к. .
(Na2S2O3) − . . (Na2S2O3)) ∙ ∙ ∙ 100,где Vк.o.(Na2S2O3) – объем натрия тиосульфата, пошедший на титрование=контрольного опыта, мл; Vo.o.(Na2S2O3) – объем натрия тиосульфата, пошедшийна титрование основного опыта, мл; k – поправочный коэффициент; T титриметрический фактор пересчета, г/мл; a – масса навески сухого экстрактаимбиря, отобранной для анализа, г.61Содержание суммы фенольных соединений в пересчете на 6-гингерол,полученноеметодомобратнойброматометриисоставило5,61±0,91%.Метрологические характеристики (по результатам 6 повторных определений)разработанной методики показаны в таблице 3.3, значение относительнойпогрешности не превышало 1,62%.Таблица 3.3.Метрологические характеристики метода обратной броматометрииfxs2sРt(P, f)х,%55,610,74630,86320,952,57060,911,623.4.4.
Определение содержания гингеролов и шогаолов методомвысокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ)Определение содержания гингеролов и шогаолов методом обращенофазовой ВЭЖХ проводили в режиме градиентного элюирования с УФспектрофотометрическим (длина волны 282 нм) и масс-спектрометрическимдетектированием по методике, описанной в руководстве «Методы анализаминорных биологически активных веществ пищи» [26, 9], модифицированнойнами для масс-спектрометрии.Хроматограмма сухого экстракта имбиря и стандартного образца 6гингерола представлены на рисунках 3.15. и 3.16.
соответственно.Идентификацию действующих веществ проводили путем сравненияспектров поглощения веществ в УФ области со спектром стандартного образца(6-гингерол, Sigma, номер по каталогу G1046-5MG) и по характеристическиммасс-спектрам.В результате проведенных исследований в СЭИЛ было идентифицировано6 фенольных соединений, поглощающих свет при 282 нм: 6-, 8-, 10-гингеролы и6-, 8-, 10-шогаолы.
Из них преобладает 6-гингерол (2,50±0,28%), а суммарноесодержание гингеролов и шогаолов составило 4,74±0,53%.62Рис. 3.15. Хроматограмма сухого экстракта имбиря.63Рис.3.16.Хроматограммастандартного64образца6-гингерола(0,156мг/мл).Выводы к главе 31. Проведен анализ химического состава сухого экстракта имбиря:обнаружены фенольные соединения, дубильные вещества, сапонины,отсутствуют аклкалоиды, флавоноиды, аминокислоты, аскорбиноваякислота.2. Изучена растворимость субстанции сухого экстракта имбиря в различныхрастворителях.3.
Проанализированы технологические характеристики субстанции сухогоэкстракта имбиря.4. Предложены методики идентификации фенольных соединений гингеролов и шогаолов методами тонкослойной хроматографии,спектрофотомерии и высокоэффективной жидкостной хроматографии.5. Разработаны методы количественного определения фенольныхсоединений в сухом экстракте имбиря.65ГЛАВА 4. РАЗРАБОТКА СОСТАВА ,ТЕХНОЛОГИИ ИИССЛЕДОВАНИЕ КАПСУЛ С СУХИМ ЭКСТРАКТОМ ИМБИРЯЛЕКАРСТВЕННОГО4.1. Изучение возможности применения солюбилизаторов дляповышения растворимости сухого экстракта имбиряДля повышения растворимости экстракта в работе использовалисолюбилизаторы: растворимый поливинилпирролидон Kollidon 25, матричныйполимер, состоящий из полиэтиленгликоля 6000,винилацетатаSoluplus,синтетическийвинилкапролактама исополимерэтиленоксидаипропиленоксида (полоксамер) Kolliphor P 188.По литературным данным растворимые марки коллидона способныулучшать растворимость фармацевтических субстанций в воде за счетобразования растворимых в воде комплексов и солюбилизации [1, 2, 3].Синтетический сополимер этиленоксида и пропиленоксида (полоксамер)KolliphorP188применяетсявфармацевтическойтехнологиикакувлажняющий агент, в качестве эмульгатора и солюбилизатора.
Kolliphor P188 рекомендуется для подготовки твердых дисперсий иулучшениярастворимости малорастворимых активных субстанций в твердых пероральныхлекарственных формах [104].Soluplus представляет собой матричный полимер, состоящий изполиэтиленгликоля 6000, винилкапролактама и винилацетата. Разработан длясолюбилизации плохо растворимых фармацевтических субстанций и подходитдля экструзии горячего расплава.
Однако, по данным компании Basf, его можнотакже применять в обычных процессах с целью использования егосолюбилизационных свойств [103].Растворы СЭИЛ и вспомогательных веществ солюбилизаторов вфосфатномбуфересрН7,5получаливразличныхсоотношенияхперемешиванием на магнитной мешалке в течение 1, 6 и 12 часов.66Количестворастворившегосяэкстрактаопределялипрямойспектрофотометрией на спектрофотометре Analytik Jena «Specord 250» в кювететолщиной слоя 1 см при длине волны 280 ± 2 нм.Чтобыудостоверитьсяотсутствиипоглощенияурастворовсолюбилизаторов в диазпазоне длин волн 230-290 нм и тем самым исключитьошибку при дальнейшем спектрофотометрическом определении фенольныхсоединений в разрабатываемых лекарственных формах, были сняты спектрыраствороввыбранныхвспомогательныхвеществврастворе0,1Нхлористоводородной кислоты pH 1,0 и фосфатном буферном растворе pH 7,5.Таблица 4.1.Спектры поглощения растворов солюбилизаторов.Раствор 0,1 Н хлористоводороднойФосфатный буферный раствор pHкислоты pH 1,0Soluplus7,5Концентрация 1,016*10-4 г/млКонцентрация 1,016*10-3 г/млКонцентрация 1,026*10-4 г/млKollidon 25Концентрация 1,02*10-3 г/мл67Kolliphor P 188Концентрация 1,008*10-3 г/млКонцентрация 1,016*10-4 г/млКак видно из данных таблицы 4.1 установлено отсутствие адсорбциирастворами вспомогательных веществ.Экспериментальные результаты изучения влияния солюбилизаторов нарастворимость СЭИЛ в фосфатном буфере с рН 7,5 приведены на рисунках 4.1– 4.3.
Принимая во внимание предположение о возможном протеканиипроцесса солюбилизации во времени, концентрацию растворившегося СЭИЛопределяли через 1 час, 6 часов и 12 часов от начала опыта.концентрация сухого экстракта имбиря,г/мл ·10-343,532,5Soluplus21,5Kollidon 251Kolliphor P1880,501/01/11/2,51/51/7,51/101/15соотношение сухого экстракта имбиря и солюбилизатора в раствореРис. 4.1 Зависимость растворимости соединений СЭИЛ в фосфатном буфере срН 7,5 от количества солюбилизаторов при растворении в течение 1 часа.68концентрация сухого экстракта имбиря,г/мл ·10-34,543,532,5Soluplus2Kollidon 251,5Kolliphor P18810,501/01/11/2,51/51/7,51/101/15соотношение сухого экстракта имбиря и солюбилизатора в раствореРис.4.2 Зависимость растворимости СЭИЛ в фосфатном буфере с рН 7,5 отколичества солюбилизаторов при растворении в течение 6 часов.концентрация сухого экстракта имбиря,г/мл ·10-34,543,532,5Soluplus2Kollidon 251,5Kolliphor P18810,501/01/11/2,51/51/7,51/101/15соотношение сухого экстракта имбиря и солюбилизатора в раствореРис.
4.3 Зависимость растворимости СЭИЛ в фосфатном буфере с рН 7,5 отколичества солюбилизаторов при растворении в течение 12 часов.Показано, что Kollidon 25 Kolliphor P 188 практически не влияют нарастворимость экстракта на начальных этапах эксперимента. Наилучшиерезультаты эти вещества показали при большом массовом соотношении СЭИЛ: солюбилизатора равном 1 : 15. В течение 12 часов эксперимента69растворимость СЭИЛ повышалась медленно, достигнув 125,4±2,8 % для смесейс Kollidon 25 и 139,2±3,3 % для Kolliphor P 188.Soluplus показал более высокую солюбилизирующую способность. Ужечерез 1 час при соотношении СЭИЛ : солюбилизатора равном 1 : 2,5растворимость экстракта увеличилась до 119,31± 3,2% и достигла 166,4± 3,7% втечение 12 часов.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
