Диссертация (1141211), страница 18
Текст из файла (страница 18)
Одним из главных участников образования активных метаболитовкислорода в нейтрофилах является НАДФ-оксидаза. В мембране нейтрофилапроисходитсборкаНАДФ-оксидазы,состоящейизмембранныхицитоплазматических компонентов. НАДФ-оксидаза катализирует восстановлениемолекулярногокислородадосупероксидногорадикала,которыйзатемпревращается в пероксид водорода и другие токсичные формы кислорода,например, гидропероксидный и гидроксильный радикалы [143].Установлено, что уровень продукции АФК напрямую зависит от активностиНАДФ-оксидазы [94].
Уменьшение активности данного фермента приводит кснижению биоцидности нейтрофилов. Существуют четыре изоформы НАДФоксидазы, оказывающие положительное и отрицательное влияние в зависимостиот количества и типа производимых активных форм кислорода. НАДФ-оксидазарегулируетвнутриклеточноеопределяетвозможность«регулируемых» активныхокислительно-восстановительноевыживанияилигибелисостояниеклеток.иПоколениеформ кислорода необходимо для протеканияокислительно-восстановительных реакций внутри клетки, в то время какпоколение «длительных» активных форм кислорода способствует их апоптозу[159].НАДФН-оксидазанейтрофиловсостоитизпятиглавныхбелков,собирающихся в клеточной мембране при стимуляции и определяющихоксидазную активность.
В покое три из них (р47phox, p67phox, p40phox)находятся в цитоплазме клеток, два (gp91 и р22) — связаны с клеточнымимембранами. Различные системы клеточных киназ — митоген-активированныепротеинкиназы (МАРК) (р38, р42/47 [ERK 1/2]), протеинкиназы С (РКС), р21активированная киназа (PAK), казеин-киназа, Akt (протеинкиназа В), киназа,активируемаяфосфатидиловойкислотойучаствуютвактивации(фосфорилировании) p47phox. В зависимости от стимула они вступают в контакт126друг с другом и с другими факторами клеточного гомеостаза, например с Са2+зависимымиканаламиифосфатидилинозитол-3-киназс[PI-3K]).фосфатидилинозитолами(продуктГлавнаяРКС.рольотводитсяВнейтрофилах присутствуют четыре изоформы РКС — α, β, δ и ζ, и все они в тойили иной мере включаются в фосфорилирование р47phox [183]. Как ужеобсуждалось ранее, существует приблизительно 25% нейтрофилов с угнетеннойфункцией протеинкиназы С.ПрианализегруппыбольныхСКВсвысокимфункциональнымпотенциалом нейтрофильных гранулоцитов установлено, что у пациентов сдлительностью заболевания менее 5 лет резерв продукции супероксид-анионавыше, чем в группе с длительностью заболевания более 5 лет, по даннымКАХЛлн 0,75 (0,5-1,0) > 0,4 (0,08-0,7), p<0,05.В начале воспаления пул циркулирующих нейтрофилов увеличивается, чтопредставляет собой реакцию на действие антигена.
Аутоиммунное поражение,характеризующееся гиперпродукцией широкого спектра органоспецифическихаутоантител к различным компонентам ядра и иммунных комплексов, вызываетиммуновоспалительное повреждение тканей и нарушение функции внутреннихорганов [51]. При длительном течении заболевания естественный иммунитеторганизма истощается,чтоприводиткснижениюобразованияклеток,участвующих в воспалении и уменьшению их активности.Можно предположить, что при длительном течении заболевания, а такжевысокой функциональной активности клеток в дебюте заболевания происходитистощение функциональных возможностей нейтрофилов и накопление такназываемых «старых» нейтрофилов.Напротив, при сравнении показателей нейтрофилов пациентов с СКВ сосредней функциональной активностью было обнаружено статистически значимоеповышение уровня супероксидного анион радикала по данным сХЛлн (2,4 (1,04,9)>0,55 (0,2-1,1), при p<0,05) и увеличение потенциала образования супероксиданиона по данным иХЛлн (1,0 (1,0-1,0)>0,3 (0,1-0,9), при p<0,05) в группепациентов с длительностью заболевания более 5 лет, в сравнение с контрольными127показателями.
Полученные результаты свидетельствуют о том, что клетки«работающие» в стабильных условиях, способны сохранить свою активность втечение более длительного периода [43]. Вероятно, при более детальномисследовании механизмов продукции АФК нейтрофилами могут быть выявленыаналогичные взаимосвязи.Кроме того, у пациентов со средней ФА нейтрофилов в обеих группах - сдлительностью заболевания менее 5 лет и более 5 лет, отмечается снижениеконцентрации метаболитов оксида азота в крови по сравнению с контролемNO3/NO2 1,25 (0,9-2,3)<3,6 (3,3-4,1), при p<0,05 и NO3/NO2 1,5 (0,9-2,3)<3,6 (3,34,1), при p<0,05, соответственно.Изменение уровня метаболитов NO (нитратов/нитритов) в биологическихжидкостях отмечены при многих заболеваниях, в том числе при СКВ и ССД.Высокая концентрация нитратов в плазме крови по механизму обратной связиугнетает продукцию эндогенного NO клетками периферической крови [103].Кроме того, в нашем исследовании снижение уровня метаболитов оксида азотабыло ассоциировано с повышением концентрации и потенциала образованиясупероксидного радикала.
Имеются данные, что супероксидный анион-радикалтормозит экспрессию и активность eNOS и способен связывать и инактивироватьNO,чтоограничиваетегораспространениеиспособствуетснижениюконцентрации оксида азота [110].При сравнении показателей кислородзависимого метаболизма нейтрофиловпри подостром течение заболевания регистрировалось достоверное повышениеуровня продукции супероксидного аниона (по данным сХЛлн 1,45 (0,55-2,5)>0,3(0,2-0,5), при p<0,05) и потенциала продукции супероксидного аниона (по даннымиХЛлн 1,0 (0,65-1,0)>0,1 (0,1-0,1), при p<0,05) у пациентов со средней степеньюкислородзависимого метаболизма в сравнении с низким уровнем. При этомстепень продукции супероксидного аниона так же была достоверно выше упациентов с высокой функциональной активностью, по данным сХЛлн 1,6 (1,61,6)>0,3 (0,2-0,5); p<0,05.128При подостром течении наблюдаются постепенное начало, более поздняягенерализация, волнообразность с развитием ремиссий и более благоприятнымпрогнозом.
При каждом обострении в патологический процесс вовлекаютсядругие органы и системы, в результате в течение 2 - 3 лет развивается характернаяполисиндромность с частым развитием люпус-нефрита и энцефалита. Имеютсяданные о статистически значимых различиях в количестве лимфоцитовразличных фенотипов у больных с острым, подострым и хроническим течениемСКВ. Данные различия затрагивали CD4 лимфоциты, содержание которых былонаименьшим при остром течении СКВ, а также содержание в крови ИЛ-6,снижающегося при подостром течении и ассоциированного с повышением уровняИЛ-8.
На настоящий момент в литературе отсутствуют данные о характереизменения функциональной активности нейтрофилов в зависимости от течениязаболевания, что требует дальнейших исследований в этом направлении [45].При хроническом течении заболевания в группе пациентов СКВ с низкойфункциональной активностью нейтрофилов имеется статистически значимоеснижение потенциала образования супероксидного анион-радикала по даннымиХЛлн в сравнении с группой контроля (0,1 (0,1-0,8)<0,3 (0,1-0,9), р<0,05).Снижение потенциала образования супероксидного анион-радикала вгруппе больных с низкой функциональной активностью нейтрофилов, вероятно,свидетельствует о том, что система фагоцитоза работает на пределе своихвозможностей [175].
С учетом того, что нейтрофилы этой группы изначальнодемонстрируют низкую степень биоцидности, можно предположить, что придлительном течении заболевания произойдет их функциональное истощение.При внутригрупповом статистическом сравнении нейтрофилы больныхСКВсхроническимтечениемзаболеванияисреднимуровнемкислородзависимого метаболизма демонстрируют повышение степени продукциисупероксидного аниона по данным сХЛлн 1,45 (0,6-2,5)>0,3 (0,2-0,5), при p<0,05 ипотенциала продукции супероксидного аниона по данным иХЛлн 1,0 (0,7-1,0)>0,1(0,1-0.1), при p<0,05, а также снижение количества метаболитов азота (NO3/NO21291,45 (0,9-2,4)<5,0 (2,8-5,4), при p<0,05 в сравнении с показателями группы снизкой функциональной активностью.Нейтрофилы со средней активностью представляют собой наиболеестабильные в функциональном отношении клетки, способные длительное времяне снижать свой флогогенный потенциал.
При длительном течении заболеванияполиморфно-ядерные лейкоциты реагируют не только на возбудителей болезней,но и на иммунные комплексы, которые образуются при хроническихвоспалительных процессах. Тогда нейтрофилы "ошибочно" выделяют такжеантибактериальные вещества, в том числе протеиназу-3 и эластазу, которыестимулируютаутоиммунныевоспалительныереакции[158].Повышениепотенциала образования супероксидного анион-радикала может быть связано сявлениями формирования феномена «замкнутого круга». В тоже время придлительнотекущемвоспалительномпроцессеснижаетсяспособностьнейтрофилов к синтезу миелопероксидазы, запускающей образование активныхформ кислорода.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
