Диссертация (1139725), страница 21
Текст из файла (страница 21)
nigra.166Биометрические характеристики анатомо-диагностических признаковплодов ореха грецкого и ореха чёрного представлены в таблице 49.Таблица 49 – Биометрические характеристики анатомо-диагностических признаков плодов Juglans regia и J. nigra (мкм)J. regiaПризнакJ. nigraдлинаширинадлинаширинаКлетки эпидермы20-3015-3020-3010-20Устьице30-3515-3025-3020-25Волосок простой90-11030-40120-18020-30––40-45––110-130Клетки мезофилла80-12040-6030-6070-110Каменистые клетки40-7030-4040-10030-40Волосок железистый с 4-клеточнойголовкой и 2-клеточной ножкойВолосок железистый с 4-клеточнойголовкой и 6-клеточной ножкойДиаметр желёзкиДиаметр друзножка 15-20,головка 30-40ножка 15-25,головка 30-45–70-9020-2515-20Таким образом, к анатомо-диагностическим признакам плодов Juglansnigra и J.
regia относятся строение трихом, наличие в мезофилле каменистыхклеток, крахмальных зёрен и друз оксалата кальция.6.2 Выделение фракций из лекарственного растительного сырья видоврода Juglans и их анализ6.2.1 Выделение фракций из листьев видов рода JuglansДля проведения фитохимического скрининга последовательно выделялифракции по схеме, описанной в главе 2 (рисунок 14) с использованием хлороформа (Х), этанола 95 % (Э-95), этанола 70 % (Э-70), этанола 40 % (Э-40) и воды (В). После удаления растворителя, полученные фракции высушивали ивзвешивали. Далее рассчитывали процентное содержание относительно суммарной массы (рисунок 66).167Рисунок 66 – Фракции листьев ореха грецкого, ореха серого и ореха чёрного(% от суммарной массы)Как следует из полученных данных, листья ореха грецкого и ореха серогодостаточно близки по фракционному составу.Для идентификации основных групп БАВ получали раствор каждойфракции по следующей методике: около 0,1 г фракции помещали в мернуюколбу вместимостью 25 мл, добавляли соответствующий растворитель, растворяли при перемешивании, доводили до метки и перемешивали.
Полученныерастворы анализировали с помощью: качественных реакций, перечисленных в п. 2.2.3, ТСХ в смесях растворителей петролейный эфир – диэтиловый эфир(10 : 3,5), хлороформ – метанол (8 : 2), хлороформ – муравьиная кислота – вода (6 : 3 : 1), этилацетат – муравьиная кислота – вода (10 : 2 : 3)[25, 31], спектрофотометрии.Результаты качественного анализа представлены в таблице 50.168Таблица 50 – Основные группы БАВ фракций, выделенных из ЛРС видов родаJuglansЛистьяJ. regia L.ФракцииХДубильные вещества, сапонины, флавоноиды, нафтохиноныЭ-70Алкалоиды, дубильные вещества, сапонины, флавоноиды, нафтохиноны, фенолкарбоновые кислотыДубильные вещества, сапонины, флавоноиды, нафтохиноныВДубильные вещества, полисахариды, сапонины, флавоноидыХКаротиноиды, хлорофиллЭ-95Э-70Э-40J.
cinerea L.Каротиноиды, хлорофилл, нафтохиноныЭ-95Э-40J. nigra L.Группы БАВАлкалоиды, дубильные вещества, сапонины, флавоноиды, нафтохиноныАлкалоиды, дубильные вещества, флавоноиды, нафтохиноны, фенолкарбоновые кислотыДубильные вещества, сапонины, флавоноиды, нафтохиноныВДубильные вещества, полисахариды, флавоноидыХКаротиноиды, хлорофиллЭ-95Дубильные вещества, сапонины, флавоноиды, нафтохиноныЭ-70Дубильные вещества, флавоноиды, нафтохиноны, фенолкарбоновыекислотыДубильные вещества, сапонины, флавоноиды, нафтохиноныЭ-40ВДубильные вещества, полисахариды, флавоноидыКак следует из данных, представленных в таблице 50, интерес для дальнейшего изучения представляют фенольные соединения, особенно нафтохиноны.6.2.2 Выделение фракций из плодов видов рода JuglansЛРС для анализа измельчали до размера частиц, проходящих сквозь ситос размером отверстий 2 мм (высушенное) или 5 мм (свежее), тщательно перемешивали для достижения однородности проб.169Для подбора условий пробоподготовки и дальнейшего сравнительногоанализа проводили фракционирование по схеме, учитывающей особенностиэкстракции БАВ из свежего и высушенного ЛРС (рисунок 67).Рисунок 67 – Схема получения извлечений из плодов ореха грецкого и орехачёрного свежих и высушенныхПолученные извлечения высушивали и взвешивали.
Результаты представлены на рисунке 68.%5040Плоды ореха грецкогосвежие30Плоды ореха чёрногосвежие20Плоды ореха грецкоговысушенные10Плоды ореха чёрноговысушенные0СХВРисунок 68 – Фракции плодов ореха грецкого и ореха чёрного свежих и высушенных (% от общей суммы БАВ)170Как следует из полученных данных, наибольший выход фракций получениз высушенных плодов.Для проведения фитохимического скрининга плодов ореха грецкого иореха чёрного высушенных последовательно выделяли фракции по схеме, описанной в главе 2 (рисунок 14) с использованием хлороформа (Х), этанола 95 %(Э-95), этанола 70 % (Э-70), этанола 40 % (Э-40) и воды (В). Соотношениефракций представлено на рисунке 69.%4030Плоды орехагрецкого20Плоды орехачёрного100ХЭ-95Э-70Э-40ВРисунок 69 – Фракции плодов ореха грецкого и ореха чёрного высушенных(% от общей суммы БАВ)Для идентификации основных групп БАВ получали раствор каждойфракции по следующей методике: около 0,1 г фракции помещали в мернуюколбу вместимостью 25 мл, добавляли соответствующий растворитель, растворяли при перемешивании, доводили до метки и перемешивали.
Полученныерастворы анализировали с помощью: качественных реакций, перечисленных в п. 2.2.3, ТСХ в смесях растворителей петролейный эфир – диэтиловый эфир(10 : 3,5), хлороформ – метанол (8 : 2), хлороформ – муравьиная кислота – вода (6 : 3 : 1), этилацетат – муравьиная кислота – вода (10 : 2 : 3), спектрофотометрии.171Установлено, что качественный состав основных групп БАВ плодов ореха грецкого и ореха чёрного не зависит от способа консервации.
Результатыанализа представлены в таблицах 51 и 52.Таблица 51 – Результаты качественного анализа фракций, выделенных из свежих плодов JuglansПлоды ФракцииJ. nigraJ. regiaГруппы БАВСАлкалоиды, дубильные вещества, сапонины, флавоноиды, нафтохиноныХКаротиноиды, хлорофилл, нафтохиноныВДубильные вещества, полисахариды, флавоноидыСАлкалоиды, дубильные вещества, сапонины, флавоноиды, нафтохиноныХКаротиноиды, хлорофилл, нафтохиноныВДубильные вещества, полисахариды, флавоноидыТаблица 52 – Результаты качественного анализа фракций, выделенных из высушенных плодов JuglansПлоды ФракцииХJ.
nigraJ. regiaГруппы БАВКаротиноиды, хлорофилл, нафтохиноныЭ-95Алкалоиды, дубильные вещества, сапонины, флавоноиды, нафтохиноныЭ-70Алкалоиды, дубильные вещества, сапонины, флавоноиды, нафтохиноныЭ-40Дубильные вещества, флавоноиды, нафтохиноныВДубильные вещества, полисахариды, флавоноидыХКаротиноиды, хлорофилл, нафтохиноныЭ-95Алкалоиды, дубильные вещества, сапонины, флавоноиды, нафтохиноныЭ-70Алкалоиды, дубильные вещества, сапонины, флавоноиды, нафтохиноныЭ-40Дубильные вещества, флавоноиды, нафтохиноныВДубильные вещества, полисахариды, флавоноидыКак следует из данных, представленных в таблицах 51 и 52, качественныйсостав основных групп БАВ по фракциям в плодах J. nigra и J.
regia одинаков.1726.3 Анализ нафтохинонов в лекарственном растительном сырье видоврода JuglansТак как нафтохиноны являются окрашенными соединениями, способными изменять цвет под воздействием растворов щелочей, то целесообразно обнаруживать эту группу БАВ в извлечениях из ЛРС с помощью качественныхреакций и ТСХ с детекцией парами аммиака.Испытуемые растворы получали по следующей методике.Методика: около 2,0 г (точная навеска) измельченного до размера частиц2 мм ЛРС помещали в коническую колбу, прибавляли 100 мл спирта этилового20 % и перемешивали на магнитной мешалке в течение 1 ч. Затем фильтроваличерез бумажный фильтр «красная лента», декантируя извлечение с ЛРС.
Операцию повторяли еще 2 раза в тех же условиях. Фильтрат упаривали на роторном испарителе под вакуумом при температуре 85-90 °C до достижения объемаоколо 20 мл. Остаток с помощью 20 мл воды количественно переносили в коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляли 10 мл растворажелеза (III) хлорида 1 %, 40 мл кислоты хлористоводородной разведенной8,3 %, присоединяли обратный холодильник и нагревали на водяной бане притемпературе 60 °C в течение 1 часа. Смесь охлаждали, затем с помощью 20 млводы количественно переносили в делительную воронку вместимостью 250 мли экстрагировали порциями по 40 мл эфира диэтилового в течение 2 мин трижды. Эфирные извлечения последовательно фильтровали через бумажныйфильтр «белая лента» с 2 г натрия сульфата безводного в сухую колбу.
Эфирное извлечение упаривали на роторном испарителе под вакуумом температуре40 °C досуха, остаток растворяли в 15 мл этанола 95 % и переносили с помощью 5 мл того же растворителя количественно в мерную колбу вместимостью25 мл. Объем раствора доводили этанолом 95 % до метки и перемешивали (испытуемый раствор).Раствор СО юглона готовили следующим образом: около 0,01 г (точнаянавеска) юглона помещали в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяли в15 мл спирта 95 %, затем объем доводили тем же спиртом до метки и переме-173шивали.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
