Диссертация (1139725), страница 17
Текст из файла (страница 17)
Трихомы трёх типов: 1) крупные эмергенцеподобные одноклеточные простые волоски с бородавчатой кутикулой; 2) простые одноклеточные конусовидные волоски; 3) головчатые волоски с двух-трёх-клеточной ножкой и одноклеточной головкой (рисунок 47).А: 1 – основание эмергенцеподобного волоска, 2 – простые одноклеточные волоски, 3 – простой одноклеточный и головчатый волоски.Б: 1 – основание эмергенцеподобного волоска, 2 – головчатый волосок, 3 – простой одноклеточный и головчатый волоски.В: 1 – основание эмергенцеподобного волоска, 2 – эмергенцеподобные и простые одноклеточные волоски, 3 – простой одноклеточные волоски.Цена деления микролинейки 0,01 мм.Рисунок 47 – Трихомы листьев Onosma armeniaca (А), O. caucasica (Б),O. sericea (В)128Основным отличием видов рода Onosma является строение основанияэмергенцеподобного волоска.Лист видов рода Onosma на поперечном срезе имеет классическое дорзовентральное строение.
Эпидерма представляет собой плотный слой клеток ипокрыта толстой кутикулой. Механическая ткань представлена колленхимой,которая расположена в области главной жилки, как под верхней, так и поднижней эпидермой. Проводящая система представлена одним крупным дорзальным коллатеральным пучком. В клетках паренхимы в области главнойжилки встречаются клетки с красным содержимым. Также красное содержимоепросматривается в клетках флоэмы проводящего пучка главной жилки.Стебли изучаемых видов рода Onosma на поперечном срезе имеют округлую форму. Покровная ткань – эпидерма, под ней расположена пластинчатаяколленхима, состоящая из 1-2 непрерывных слоёв клеток (рисунок 48). Паренхима коры представлена крупными изодиаметрическими клетками.
Проводящая система стебля непучкового типа. По типу стели этот тип стебля относитсяк сифоностели. Флоэма занимает небольшой объем. Ксилема представлена сосудами, трахеидами и лигнифицированной паренхимой. Сердцевина паренхимымолодых стеблей представлена живыми клетками округлой формы, в более старых образуется полость. Эпидерма стебля представлена вытянутыми клеткамипрямоугольной формы с прямыми стенками. Устьичный аппарат анизоцитноготипа. Имеются в большом количестве трихомы, характерные для листа.Эпидерма венчика представлена тонкостенными клетками округлой(оносма армянская) и прямоугольной формы (оносма кавказская и оносма шелковистая). В нижней части имеются многочисленные простые одноклеточныеволоски.
Чашечка опушена простыми одноклеточными волосками. Пыльцевыезёрна яйцевидной формы (рисунок 49).Биометрические характеристики микродиагностических признаков травывидов рода Onosma представлены в таблице 34.1291 – поперечный срез стебля, 2 – паренхима коры, 3 – флоэма,4 – ксилема (окраска флороглюцином и кислотой серной концентрированной), 5 – паренхимаЦена деления микролинейки 0,01 мм.Рисунок 48 – Строение стебля на поперечном срезе Onosma armeniaca (А),O. caucasica (Б), O. sericea (В)1301 – чашечка, 2 – эпидерма венчика, 3 – пыльцаЦена деления микролинейки 0,01 мм.Рисунок 49 – Микропрепарат цветка O. armeniaca (А), O.
caucasica (Б),O. sericea (В)Таблица 34 – Биометрические характеристики микродиагностических признаков травы видов рода Onosma (мкм)ПризнакКлетки верхнейэпидермыКлетки нижнейэпидермыВолоски простыеконусовидныеВолоскиэмергенцеподобныеУстьицаКлетки с краснымсодержимымO. armeniacaO.
caucasicaдлинаширинадлинаширинаЛистO. sericeaдлинаширина30-10020-5040-5030-4030-5030-4030-7020-5030-5030-4030-4020-30100-35030-50200-40020-30160-18010-151000-265080-150800-170050-60480-86020-4030-4020-2530-4020-2525-3020-25+++131ПризнакКлетки эпидермыКлетки колленхимыДиаметр трахейДиаметр сосудовДиаметр клетоксердцевиныКлетки эпидермыПыльцаВолоски простыеодноклеточныеВолоски железистыеO. armeniacaO. caucasicaдлинаширинадлинаширинаСтебель30-4030-4030-4030-4030-6015-2030-5030-5010-3010-3030-4040-6090-160O.
sericeaдлинаширина20-4030-5020-4020-4010-2020-7070-12030-70Цветок15-2060-13015-2015-2030-6015-2070-14015-2030-7015-20120-22030-4070-27020-30170-46020-25--20-4010-15--35-6015-20Как следует из данных, представленных в таблице 34, наибольшее отличие в размерах имеют эмергенцеподобные волоски.Корни представителей рода Onosma в верхней части главного корня имеют каудекс (рисунок 50).Рисунок 50 – Корни Onosma sericea WilldСравнительное описание внешних признаков корней видов рода Onosmaпредставлено в таблице 35.132Таблица 35 – Внешние признаки корней видов рода OnosmaПризнакO.
armeniacaO. caucasicaO. sericeaЦельное и измельчённое ЛРСФормаПоверхностьКорни конической или цилиндрической формы, изогнутые, иногда слегкаразветвлённые, не очищенными от опробковевшего слоя или их кусочкиразличной формы, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 5 ммпродольно морщинистая, пробка местами отслаиваетсяИзломзернистыйДлина, см10 - 154 - 114 - 12Толщина, см0,5 - 1,50,3 - 0,50,5 - 2,0светло-коричневыйсветло-коричневыйсеро-коричневыйЦветснаружиЦвет наизломесветло-жёлтыйЗапахслабыйслабыйслабыйВкуснейтральныйнейтральныйнейтральныйПорошокЦвет смесиРазмерчастицсеро-коричневогосветло-коричневогосветло-коричневого цветацветасосветлоцветасосветло- со светло-жёлтыми вкражёлтымивкраплежёлтыми вкраплениями пленияминиямипроходящий сквозь сито с отверстиями размером 2 ммЗапахслабыйслабыйслабыйВкуснейтральныйнейтральныйнейтральныйНа поперечном срезе корни видов рода Onosma круглой формы, имеютбеспучковую структуру, характерную для вторичного строения.
Покровнаяткань – перидерма. Пробка отслаивающаяся, состоит из 2-10 рядов клеток.Клетки паренхимы крупные, овальные или прямоугольные, бесцветные. Клеткирасположены несколькими слоями, между ними имеются небольшие межклетники. Клетки флоэмы четырёх-пяти-угольные, мелкие, плотно расположенные.Проводящая система беспучкового типа, флоэма представлена мелкими ситовидными элементами, ксилема – сосудами и трахеидами. Сосуды сосредоточены ближе к центральной зоне поперечного среза.1335.2 Скрининг лекарственного растительного сырья сем. Boraginaceae наналичие нафтохиноновКачественный анализ ЛРС сем. Boraginaceae на наличие нафтохиноновпроводили по разработанной нами методике: около 1,0 г (точная навеска) измельчённого до размера частиц 2 мм ЛРС помещали в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляли 15 мл хлороформа, присоединяли обратный холодильник и нагревали 15 минут на водяной бане при температуре 60 °C, затемохлаждали, извлечение фильтровали через бумажный фильтр «красная лента» вмерную колбу вместимостью 50 мл.
Фильтр с частицами ЛРС возвращали вколбу со шлифом, прибавляли 15 мл хлороформа и операцию повторяли ещёдважды. Извлечение в мерной колбе доводили хлороформом до метки и перемешивали (испытуемый раствор).В делительную воронку объёмом 125 мл помещали 5 мл испытуемогораствора, имеющего красный цвет различной степени интенсивности, прибавляли 10 мл раствора гидроксида натрия 5 %, встряхивали в течение 5 минут,наблюдали обесцвечивание хлороформного слоя, и окрашивание водного в синий цвет, что свидетельствовало о наличии шиконина и его эфиров.Нафтохиноны способны возгоняться при нагревании измельчённого ЛРС,поэтому для экспресс-анализа ЛРС использовали реакцию микросублимации,проводимую по следующей методике: около 0,2 г ЛРС, измельчённого до размера частиц 2 мм, помещали в фарфоровый тигель и нагревали на электрической плитке.
Сублимат конденсировался на стенках тигля в виде мелких капелькрасного цвета (шиконин). При перенесении капель сублимата в пробирку идобавлении раствора натрия гидроксида 5 % образовывалась натриевая соль,имеющая ярко-синюю окраску.Результаты скрининга на наличие нафтохинонов заготовленных образцовЛРС представлены в таблице 36.134Таблица 36 – Результаты скрининга на наличие нафтохинонов ЛРСсем. BoraginaceaeЛРСEchium plantagineumEchium russicumEchium vulgareOnosma armeniacaOnosma caucasicaOnosma sericeaНаличие нафтохиноновкорни+трава–корни+трава–корни+трава–корни+трава±корни+трава±корни+трава±Примечание: нафтохиноны присутствуют (+), отсутствуют (–), следы (±).Как следует из данных, представленных в таблице, интерес для дальнейшего исследования представляют корни Echium, трава и корни Onosma.5.3 Качественный анализ нафтохинонов в корнях сем.
BoraginaceaeКроме скрининга проводили качественный анализ нафтохинонов в ЛРСметодом ТСХ. Наносили микрошприцем по 0,02 мл хлороформного извлеченияи раствора СО шиконина на линию старта хроматографической пластинки,подсушивали на воздухе, помещали в камеру, предварительно насыщенную парами смеси 1 (петролейный эфир – диэтиловый эфир 10 : 3,5) или смеси 2 (гексан – ацетон 20 : 1). Шиконин и его эфиры идентифицировали в виде зоны адсорбции розового, красного или красно-фиолетового цвета, меняющей окраскуна синюю при обработке парами аммиака.135Хроматографирование проводили с использованием СО шиконина, рассчитывая величины факторов удерживания (Rf).
Результаты детектированиянафтохинонов представлены в таблице 37.Таблица 37 – Качественный анализ нафтохинонов в корнях родов Echium иOnosma сем. BoraginaceaeКорниRf в смесиОкраска12без обработкипосле обработкипарами аммиакаE. plantagineum0,80,6розоваяголубаяE. russicum0,10,20,40,60,10,20,40,5краснаякраснаякраснаякраснаясиняясиняясиняясиняяE. vulgare0,10,1розоваяголубаяO. armeniaca0,20,2розоваяголубаяO. caucasica0,20,2розоваяголубаяO. sericea0,40,4розоваяголубаяШиконин СО0,20,2краснаясиняяКак следует из данных, представленных в таблице, во всех исследуемыхобразцах корней видов рода Echium наибольшим числом производных шиконина отличаются корни синяка русского.5.4 Количественное определение суммы нафтохинонов в корняхсем.
BoraginaceaeС помощью разработанной методики спектрофотометрического определения суммы нафтохинонов в пересчёте на шиконин проанализированы образцы корней видов родов Echium и Onosma. При образовании слишком интенсивной окраски испытуемого раствора использовали десятикратное разведение. Результаты эксперимента представлены в таблице 38.136Таблица 38 – Содержание суммы нафтохинонов в пересчёте на шиконин в образцах ЛРС родов Echium и Onosma сем.
BoraginaceaeКорниE. plantagineumE. russicumE. vulgareO. armeniacaO. caucasicaO. sericeaХi, %0,059; 0,062;0,057; 0,056;0,058; 0,0591,38; 1,41; 1,42;1,41; 1,43; 1,490,21; 0,20; 0,20;0,20; 0,19; 0,240,1; 0,09; 0,1; 0,1;0,1; 0,10,15; 0,14; 0,15;0,15; 0,14; 0,140,11; 0,12; 0,12;0,12; 0,11; 0,12fxs210-550,0600,080,0009 952,570,0022 3,7451,4213,00,0359 952,570,03850,205,60,0075 952,570,0079 3,9250,101,70,0041 952,570,0043 4,3650,142,90,0054 952,570,0056 3,9550,122,10,0046 952,570,0048 4,16sРT(P,f)∆xε2,64Как следует из данных, представленных в таблице, наиболее высокое содержание нафтохинонов в пересчёте на шиконин наблюдается в корняхE. russicum. Другие виды рода Echium в этом случае можно рассматривать какпримеси, что нашло отражение в инструкции по сбору и сушке корней синякарусского (приложение 6).5.5 Выделение фракций из травы видов рода Onosma и их анализПеред фитохимическим исследованием травы оносмы армянской, оносмыкавказской и оносмы шелковистой ставилось две задачи: проанализироватьнафтохиноны и сравнить химический состав видов, чтобы определить дальнейшее использование изучаемых видов как самостоятельных источников ЛРС,либо допустить заготовку травы оносмы от нескольких видов.Так как трава видов рода Onosma является малоизученным объектом сточки зрения химического состава, то для проведения скрининга последовательно выделяли фракции по схеме, описанной в главе 2 (рисунок 14) с использованием хлороформа (Х), этанола 95 % (Э-95), этанола 70 % (Э-70), этанола40 % (Э 40) и воды (В).