Автореферат (1139636), страница 4
Текст из файла (страница 4)
В таблице 2представлены их средние значения ( ), медиана (Me), а также дисперсия (σ) истандартное отклонение (s) величин.15Таблица 2Распределение умерших в зависимости от стадии заболевания и других морфофункциональных показателей ( σ, Me, s)Категория/стадияI стадияII стадияIII стадияI стадияИнтенсивн.II стадияинваз.
(шт.)III стадияI стадияВн. диаметрII стадияБСДК (мм)III стадияДлительн.нос-ва (г)ПоказателиσMeКол-во(n)9751497514975144,010,926,41074,44297,710957,13,172,461,851,23,47,4939,92349,63464,40,320,320,184,010,025,0720,04100,010875,03,302,501,90s1,511,755,3883377,85520728,612002375,80,100,110,03На фоне прогрессирования папиллита длительность и интенсивность инвазиисинхронно возрастали (p = 0,010 и p = 0,000 соответственно), а просвет сосочкапрогрессивно уменьшался (p = 0,000) (рис. 3).
Корреляция интенсивности (стадий)папиллита, выраженную в толщине эпителиальной выстилки канала сосочка сдлительностью носительства характеризовалась как обратная и весьма высокая (rs = –1,0, p =0,000), с интенсивностью паразитоносительства, также как обратная и весьма высокая (rs = –1,0, p = 0,001), с величиной просвета БСДК – прямая и столь же высокая (rs = 1,0, p = 0,000).Рисунок 3. Изменения показателей в зависимости от стадии папиллита.У 90 % обследованных формирование аденоматозной стадии папиллитапроисходило в первые 5 лет носительства паразитов, в следующие 10 лет у 93 %обследованных развивалась аденофиброзная стадия папиллита и в 100 % случаевсклеротическая стадия формировалась при длительности заболевания свыше 15 лет. Приэтом, независимо от интенсивности инвазии, средние значения длительности носительства,необходимые для формирования той или иной стадии папиллита (4,0 ± 1,2 года, 10,9 ± 3,4 и26,4 ± 7,4 лет соответственно), имели статистически значимую разницу (p = 0,01).Подобной четкой зависимости развития папиллита от интенсивности инвазииотмечено не было.
Несмотря на существование характерного для каждой стадиипапиллита определенного количества паразитов в ЖВП (1074,4 ± 939,9, 4297,7 ±2349,6 и 10957,1 ± 3464,4 особей соответственно стадиям, p = 0,000), при I стадии16превалирование низкого уровня инвазии было выявлено всего у 67 %, при II – средняяинтенсивность – в 57 %, при III – высокий уровень инвазии – у 93 % умерших.Вопреки ожиданию, при увеличении числа паразитов в печени, прямолинейнаязависимость с прогрессированием папиллита прослеживалась не всегда и быластатистически незначимой: для I ст.
– p = 0,645, II – p = 0,665, III – p = 0,183.В результате многофакторного корреляционно-регрессионного анализа установлено,что сила влияния фактора длительности инвазии (b1 = 0,79, p = 0,000) в 3,8 раза большевлияния интенсивности инвазии (b2 = 0,21, p = 0,000) на процессы, происходящие в БСДК, атолщина эпителия стенки БСДК в большей мере (почти в 2 раза) определяетсядлительностью (r'1 = –0,87) нежели интенсивностью (r'2 = –0,42) инвазии. Коэффициентылинейной множественной корреляции (R = 0,93, p = 0,000) и множественной детерминации(D = 0,87, p = 0,000), определяющий тесноту связи результативного признака с факторными,показывают, что 87 % всех возможных вариаций значений толщины эпителиального слоясосочка обусловлены влиянием факторов времени и интенсивности инвазии; аналогичныйпоказатель для всей стенки БСДК составляет 78 %.Закономерным исходом описторхозного папиллита является прогрессирующаяпролиферация соединительнотканных структур в стенке БСДК, приводящая к развитиюстеноза.
Следовательно, чем более выражены процессы фиброза и склероза, тем меньшепросвет сосочка. Поэтому степень сужения канала БСДК можно считать своего родаинтегральным критерием происходящих патологических изменений при развитиипапиллита. Биологически обусловленная связь в математическом выражении определяетсякак максимально высокая (rs = 1,0), а достоверность ее подтверждается уникальнымизначениями 95 % доверительных интервалов соответственно каждой стадии папиллита (вмм): 2,92 < XIст > 3,42 (p = 0,000), 2,39 < XIIст > 2,53 (p = 0,000), 1,75 < XIIIст > 1,95 (p = 0,000).Это дает право утверждать, что понятия «стадия» и «диаметр просвета БСДК» приописторхозном папиллите, при необходимости, могут быть взаимозаменяемы.В итоге проведенного сравнительного анализа факторов длительности иинтенсивности инвазии, можно заключить, что временной фактор является болеевлиятельным и точным в качестве определяющего и прогнозирующего критерия приописторхозном папиллите.
Однако, в качестве маркера, происходящих при этомизменений в сосочке, целесообразнее использовать показатель диаметра просветаБСДК, так как именно он, являясь результирующим, а не влияющим фактором, спозиции биологии является более обоснованным.17Экспериментальная частьМатериал и методы исследования. In vivo. Для формирования биологическоймоделистенозаБСДКиспользовалиживотных,зараженныхописторхозом.Исследования проводилась на половозрелых кроликах обоего пола среднешерстнойпороды, средний возраст животных составил 11,3 ± 1,76 месяцев, средний вес – 3,5 ±0,38 кг. Заражение животных производилось путём введения 100–150 метацеркариевO. felineus в желудок кролика через желудочный зонд. Изменения в дуоденальномсосочке изучались на группах животных по 5 особей в остром опыте в различныесроки наблюдения – через 1, 2, 3, 6, 9 и 12 месяцев после инвазии (всего 30 кроликов,разделенных на 6 групп); контрольную группу составили 5 интактных животных.
Впроцессе работы с животными руководствовались требованиями правил гуманногообращения с ними, закрепленными в соответствующих актах.Оценивалиськлинико-лабораторныепроявленияпрогрессирующегоописторхоза; интраоперационно, после выполнения холецистэктомии, выполнялихолангиомано- и дебитометрию. Определяли давление исходное, открытия сфинктерадуоденального сосочка и остаточное (Шалимов С.А., 1985), дебитометрию (сиспользованием изотонического раствора и взвеси описторхов в нем (50 паразитов на10 мл) проводили в течение 1 мин.
под давлением в 2,45 кПа. Затем, после измерениядиаметра просвета дуоденального сосочка (зондовым методом), последний иссекалсядля гистологического исследования по вышеописанной методике. По окончании опытапроизводилась медикаментозная эвтаназия животного. Пузырную желчь подвергалимакро-, микроскопической оценке (отсутствие паразитов в желчи являлось критериемисключения из эксперимента) и бактериологическому исследованию.Invitro.ИспользованиеискусственноймоделиБСДКобусловленонеобходимостью создания критически малых размеров внутреннего диаметра канала(d), которые в условиях in vivo получить не удалось, для чего на конце трубки излабораторного стекла формировали конусовидные сужения d в 3,0, 2,5, 2,0, 1,5, 1,0 и0,5 мм; условия дебитоманометрии были прежними.
Для изучения механизмазакупорки пропускного канала БСДК при описторхозе мелкими механическимивключениями (описторхами, размер которых намного меньше d самого канала),необходимо, чтобы размер выходного отверстия трубки был соизмерим с площадьюпоперечного сечения одного паразита (≈ 0,2 мм2), что соответствует d в 0,5 мм.18В зависимости от того, каким образом желчь поступает в ДПК через сосочек,путём протекания череззияющее отверстие (один вариант) или методомпросачивания через щелевидные пространства слизистой (второй вариант), формулы,описывающие эти процессы, будут различными, в первом случае это формулыБернулли или Пуазейля, во втором – Дарси (Л.Д. Ландау и др., 2001).
Математическаямодель позволяет на основании сравнения данных, полученных опытным путём срасчётными, сделать вывод о механизме протекания желчи через БСДК. В случаеподчинения тока желчи закону Дарси можно будет принять, что на уровне БСДКимеется участок, где складки слизистой оболочки формируют поро-щелевойкомплекс, обеспечивающий фильтрационное поступление желчи в ДПК.
В данномкомплексе, характеризующимся определенными пористостью, просветностью и пр.свойствами, суммарная площадь щелей (S) канала будет определятся формулой:S = rlN, где r – ширина, l – длина, N – количество щелей (Б.В. Алексеев и др., 1985).Результатыисследования.Дляподтвержденияиоценкипрогрессированияописторхозного поражения ЖВП у лабораторных животных на протяжении экспериментапроизводиласьоценкарядапризнаков.Характернатемпературнаяреакция:помимостатистически значимого повышения кривой к концу эксперимента (41,36 ± 0,52оС, p = 0,000),гипертермия до 40,0 ± 0,51оС на первом месяце инвазии была обусловлена процессамисенсибилизации и аллергической реакцией немедленного типа, характерного для описторхоза,подтверждаемого, в том числе, имеющейся в это же время эозинофилией.
О развитиинеспецифического воспалительного процесса свидетельствует рост лейкоцитоза с 7,8 ± 2,0 × 109/лдо 15,8 ± 1,92 × 109/л (p = 0,000) и СОЭ с 2,0 ± 0,61 до 10,4 ± 1,43 мм/ч (p = 0,833). Появление инарастание желтизны склер, а также изменения цвета мочи стали отмечаться у кроликов с 6месяца инвазии, что косвенно свидетельствовало о развитии желчной гипертензии, начиная ссередины эксперимента. Ухудшение функции печени подтверждалось ростом показателейуровня щелочной фосфатазы до 305 ± 43,2 млмоль/л (p = 0,000), билирубина общего до 27,02 ±4,68 (p=0,000) и прямого до 17,0 ± 1,48 мкмоль/л (p=0,004).Данные макро- и микроскопии жёлчи подтверждали наличие воспалительныхизменений со стороны жёлчных протоков: хлопья и описторхозный детрит выявлялись со 2–3 месяца заболевания, помутнение желчи – с 6, по сравнению с контролем возрослоколичество лейкоцитов (p = 0,000), плоского эпителия (p = 0,000) и эритроцитов (p = 0,184); увсех животных основной группы обнаруживались мариты, а с 6-го месяца и яйцаописторхов.
Инфицирование желчи на 1-ом и 2-ом месяце эксперимента развилось у 20 %кроликов, на 3-ем – 40 %, на 6-ом – 60 %, на 9-ом и 12-ом – 100 %; с длительностью19описторхозной инвазии увеличивалось количество, и расширялся спектр условно-патогеннойи патогенной микрофлоры желчи (наиболее часто высевалась E.coli).Появлениевышеперечисленныхизмененийвомногомобусловленосостояниемдуоденального сосочка. На фоне отека и гиперемии, наблюдаемых со 2–3 месяцев инвазии, наружныеразмеры сосочка увеличились с 2,5 ± 0,5 × 3,2 ± 0,5 мм до 4,6 ± 0,4 × 4,6 ± 0,4 мм, а внутреннийдиаметр уменьшился с 2,86 ± 0,11 × 10–3 м до 2,14 ± 0,15×10–3 м (p=0,000) (рис.
4). Гистологическимиисследованиями было подтверждено наличие в сосочке признаков продуктивного воспаления,характерного для описторхозной патологии ЖВП: аденоматозный папиллит был выявлен у 14 (46,7%)животных, аденофибропластический – 13 (43,3%), склеротический – у 3 (10%).Рисунок 4. Динамика изменений внутреннего диаметра сосочка ДПК на фонеописторхозного папиллита у кроликовСледствием сужения просвета сосочка явилось развитие желчной гипертензии.Исходное давление в протоках на фоне описторхоза в течение года возросло в 6,4 раза (с0,07±0,03 до 0,45±0,03 кПа, p=0,000), давление открытия в 4 раза (с 0,64±0,15 до2,59±0,16 кПа, p=0,000), остаточное – в 6 раз (с 0,40±0,07 до 2,38±0,15 кПа, p=0,000). Приэтом между диаметром просвета дуоденального сосочка и манометрическими даннымибыла выявлена сильная обратная линейная связь: коэффициент корреляции Пирсона дляисходного давления составил rp = -0,9325 (p=0,002), для давления открытия rp = -0,898(p= 0,006), для остаточного – rp = -0,9321 (p=0,002).Принципиально важными явились изменения дебитометрических показателей (табл.3)Таблица 3Данные дебитометрии желчных путей кроликов (Месяц(группа)± σ, χ2(кр*), p)Дебит физиологического р-ра Дебит взвеси описторхов(м3/с; мл/мин; χ2(α=0,05), p)(м3/с; мл/мин; χ2(α=0,05), p)Исх.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
