Диссертация (1139578), страница 20
Текст из файла (страница 20)
et al., 2010):VS = π L (d12 + 4d2 2 + d3 2) / 24(11)где π – константа 3,1415; L – длина венечного синуса в см; d1 – диаметрсинуса в месте образования в см; d2 –диаметр синуса в средней части в см; d3– диаметр венечного синуса в его устье в см (рисунок 7).2.3.2. Метод коррозионных слепковЭтот метод использовался для получения цветных силиконовыхслепков камер сердца и сердечных сосудов с целью измерения размеров иобъемов предсердий, желудочков и полулунных клапанов аорты и легочногоствола.
Метод полимерных отливок позволяет наиболее точно определитьобъемы отдельных камер сердца и их форму (Елкин Н.И., 1972). Он даетнаилучшие результаты при изучении поверхности эндокарда и исследованиятопографии коронарных артерий и сердечных вен. В качестве инъекционноймассы нами применялся олигодиметилсилоксан, так как этот полимер посравнению с акриловыми пластмассами имеет усадку при полимеризации107менее 4% (Борзяк Э.И. и др., 2009), а готовые слепки обладают хорошейэластичностью и упругостью.Рисунок 7.
Размеры венечного синуса. Коррозионный слепок: d1 – диаметр вместе образования; d2 – диаметр в средней части; d3 – диаметр в местевпадения в правое предсердие; L – длина синусаДляэтойметодикииспользовалинеповрежденныесердцассохранением целостности и достаточной длины аорты, верхней и нижнейполых вен и легочных сосудов. После завершения фиксации под постояннымгидростатическим давлением (методика описана выше) в верхнюю полуювену, в восходящую часть дуги аорты и в одну из легочных венустанавливали пластиковые канюли соответствующего диаметра, к которымприсоединялись резиновые трубки.
На нижнюю полую вену, легочныеартерии и оставшиеся легочные вены накладывали кровеостанавливающиезажимы или лигатуры.Для приготовления полимерной композиции использовали силикон смолекулярной массой 70000 и содержанием гидроксильных групп 0,12 – 0,15%, к которому добавляли оловоорганический катализатор в расчёте 2% отмассы полимера. Для инъекции правых камер сердца и сердечных вен всиликоновую композицию добавляли синий краситель, а для левых камер и108коронарных артерий -красный.
Полученные цветные массы тщательноперемешивались и помещались в вакуумную камеру на 10 – 15 минут дляудаления пузырьков воздуха, которые могли образовывать полости в готовойотливке и ухудшать ее качество.Заполняли сердце полимерными композициями через установленныеканюли под давлением 50 – 80 мм рт. ст. с помощью специальногонагнетательного устройства с манометром. Сначала заполняли правыекамеры сердца синим силиконом через верхнюю полую вену, а затеминъецировали красную массу в левое предсердие и левый желудочек черезлегочную вену. Заполнение аорты и коронарных артерий производили напоследнем этапе, нагнетая силикон через трубку, установленную ввосходящей части аорты.
После полного заполнения камер сердца исердечных сосудов силиконовой массой, препарат помещали в емкость степлой водой для придания сердцу естественной формы и для ускоренияпроцессаполимеризациисиликона.Послеотверждениясиликоновойкомпозиции канюли с трубками удаляли и скрепляли силиконовые слепкилевых и правых камеры друг с другом с помощью длинных игл изнержавеющейстали.Дополнительнопроизводилификсациюинъецированных коронарных сосудов и сердечных вен, прикалывая ихдугообразными иглами к силиконовым отливкам предсердий и желудочков.Эта процедура позволяла избежать смещения слепков сердечных камер икоронарных сосудов после удаления мягких тканей и сохранить естественноерасположение полостных структур сердца.Вытравливаниемягкихтканейпроизводили,выдерживаяинъецированное сердце в горячем 20% растворе гидроксида натрия в течениеодного – двух часов.
Готовый слепок извлекали, промывали в проточнойводопроводной воде от щелочи и остатков биологических тканей в течениенескольких часов, а затем просушивали на воздухе.1092.3.3. Методы пластинацииС целью изучения конституционально-анатомических особенностейстроения и параметров сердца у женщин IV группы мы использовали методыпластинации, ставшие традиционными (von Hagens G., 1978, 1985, 1989; deJong K., Henry R.W., 2007; Sora M.C., Cook P., 2007), в том числеразработанный с нашим участием и запатентованный метод полимерногобальзамирования силиконом (патенты на изобретения № 2182766 от27.05.2002 в соавторстве с Григоряном С.П., Гайворонским И.В.; № 2282354от 30.05.2005).Метод силиконовой пластинации использовался для изготовленияобъемныханатомическихпрепаратовсердцаисостоялиз5последовательных этапов, представленных в таблице 9.Таблица 9Продолжительность этапов изготовления силиконовых пластинатов сердца№1.Этап пластинацииФиксациясердца,ручноеПродолжительностьизготовление10 – 12 днейпрепарата2.Обезвоживание21 – 25 дней3.Обезжиривание7 – 14 дней4.Пропитывание (импрегнация) препаратов2 – 3 днясиликоном5.Обработка катализатором и полимеризация8 – 10 днейсиликона в препаратеВсего48 – 65 днейДля метода силиконовой пластинации использовали фиксированныегидростатическимспособомсердца,которыепослепрепарированияобезвоживали путем погружения в холодный ацетон температурой от -20° до-25°С с четырехкратной заменой растворителя через каждые 7 суток.110Контроль за дегидратацией осуществляли с помощью ареометра, измеряяотносительное содержанию воды в обезвоживающем растворе.
Завершалиобезвоживание, когда содержание воды в тканях сердца (обезвоживающемрастворе) понижалось до 1%.После завершения дегидратации производили обезжиривание сердец вчистом ацетоне или метиленхлориде при комнатной температуре в течение10 – 12 дней с двухкратной сменой растворителя через 5 – 6 дней. Дляобезвоживания и обезжиривания препаратов нами предложен специальныйраствор, содержащий 70% ацетона и 30 % гексана и позволяющий проводитьэти тапы в 1,5 раза быстрее, чем при традиционном методе пластинации(патент на изобретение № 2257058 от 27.05.2004).Для импрегнации использовали силиконовую композицию, состоящуюиз 92 массовых частей низкомолекулярного силоксана с молекулярноймассой 400 – 700 и содержанием гидроксильных групп 2 - 4% и 8 массовыхчастей тетраэтоксисилана.
Применение силикона с небольшой молекулярноймассойобеспечиваломинимальноеуменьшениеобъемапрепаратов(сморщивание) в ходе пластинации. Импрегнацию проводили при комнатнойтемпературе в вакуумной камере (рисунок 8) путем плавного понижениядавления от 300 до 30 мм рт. ст. в течение 2 – 3 дней, до завершениявыделения пузырьков ацетона из препаратов. После этого сердца извлекалииз вакуумной камеры и давали избытку силикона стечь.Для полимеризации силикона наружные и внутренние поверхностиимпрегнированного(дибутилтиндилаурат)препаратаиоставлялиполиэтиленовом пакете на 3-4обрабатывалидляотверждениякатализаторомвгерметичномсуток, после чего катализатор наносилиповторно и оставляли в изолированном пространстве еще на такой же срок.После вулканизации силикона препарат переставал течь, и на нем можнобыло проводить измерения вышеописанными способами.111Рисунок 8.
Схема установки для импрегнации сердца силикономМетод пластинации с помощью эпоксидной смолы использовалидля изготовления твердых и прозрачных пластинчатых срезов сердца ираспилов грудной клетки (гистотопограмм) и проводили по методу G. vonHagens (1989) в нашей модификации, с использованием открытых плоскихкамеризорганическогостекла.Даннымметодомизготавливалисьпрозрачные пластинчатые препараты, на которых на макроскопическомуровне и под увеличением до 20 раз исследовали фиброзные кольца, створкии заслонки клапанов, слои сердечной стенки и сердечные сосуды.
Методэпоксидной пластинации позволяет проводить морфометрию анатомическихструктур с высокой точностью (Sora M.C., 2007) и состоит из пятипоследовательных этапов представленных в таблице 10.На первом этапе препараты сердца фиксировали по вышеописаннойметодике и изготавливали продольные и поперечные срезы (по отношению коси сердца) на слайсере Beckers ES 275 (рисунок 9,А) толщиной от 2 до 4 мм.112Таблица 10Продолжительность этапов пластинации с помощью эпоксидной смолы№Этап пластинации1.2.Изготовлениесрезовсердцагоризонтальных распилов грудной клеткиОбезвоживание3.ОбезжириваниеПродолжительностьи1 – 5 дней10 – 15 дней3 – 8 дней4.Пропитывание (импрегнация) препаратов1 – 2 дняэпоксидной смолой5.Заключение в плоские горизонтальные10 – 15 днейкамеры и отверждение смолыВсего25 – 45 днейДля получения распилов грудной клетки замораживали тело в жидкомазоте или низкотемпературной камере при температуре -70°С в течение 5дней.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
