Диссертация (1139576), страница 42
Текст из файла (страница 42)
Так, содержание ключевого медиаторавоспалительных процессов IL-1β в материале из биопленок у больных ХПстатистически достоверно увеличивалось от 5 до 13 раз в зависимости от степенитяжести пародонтита по сравнению со здоровыми людьми; у больных КАП — в6,4 раза, а у больных ХГ было статистически недостоверно ниже в 1,5 раза. Вдесневой жидкости, отобранной у этих же пациентов после удаления над- иподдесневого налета, наблюдалась такая же тенденция, однако разница взависимости от степени тяжести пародонтита была меньше, но в 3–6 раз выше,чем у людей со здоровым пародонтом.
У больных КАП содержание IL-1β вдесневой жидкости было в 4,3 раза выше, чем у людей со здоровым пародонтом,а при ХГ — в 1,7 раз меньше (р < 0,05). При этом содержание данного цитокинав десневой жидкости было в 7 раз выше, чем в биопленке у людей со здоровымпародонтом, у больных ХГ — в 3,5 раза, у больных ХП — от 3,7 до 9 раз.Некоторыеавторывсистемемультивидовыхбиопленокнагидроксиапатитных дисках, культивируемых с эпителиальными клетками,клетками периодонтальных связок или пульпы зубов, наблюдали значительноеувеличениеапоптозаидеградацииIL-1β,IL-6иIL-8.Биопленки,представленные некоторыми видами, значительно увеличивали содержание рядамедиаторов, тогда как биопленки P.
gingivalis оказывали противоположное260действие даже на базальную продукцию цитокинов/хемокинов [238]. Кроме того,были выявлены гингипаины P. gingivalis инактивирующие TNF-α [343, 458]Биопленки A. actinomycetemcomitans связывают IL-1β. При снижениижизнеспособности биопленок блокируется их способность связывать IL-1β, чтоприводит к утечке IL-1β в культуральную среду. В некоторых клетках A.actinomycetemcomitans IL-1β локализуется во внешней кромке нуклеоида.Близкий контакт с живыми биопленками A.
actinomycetemcomitans уменьшалпролиферациюиапоптоздесневыхкератиноцитовчеловека.Авторыпредполагают, что биопленки A. actinomycetemcomitans могут нарушатьрешающий первый этап локального воспаления при пародонтите, связывая иинтернализируя IL-1β [371].Еще более выраженной в наших исследованиях была разница всодержании в составе биопленки IL-6 в зависимости от степени тяжестипародонтита от 6,5 раз до 16,5 раз, в 9 раз у больных КАП и 5,7 раза — у больныхХГ по сравнению со здоровыми людьми (р < 0,05).
В десневой жидкости онатакже была выше в 6,5–10,3 раза у пациентов с ХП, в 6,8 раза — у больных КАПи только в 3,5 раза — у больных ХГ. Количество TNF-α увеличивалось приразличных стадиях ХП от 2,8 до 7,1 раза в составе биопленки и от 2,2 до 4,5 разв десневой жидкости, по сравнению с контролем, при этом их уровни былиприблизительно одинаковы у больных ХПЛ и ХПС. У больных КАП разницабыла в 3,6 и 2,9 раза, а у больных ХГ — в 6,5 и 4,3 раза соответственно.Таким образом, у здоровых людей соотношение содержания TNF-α вдесневой жидкости и биопленке было равно 7,1 и 4,6–5,6 при других формахзаболеваний пародонта.Содержание IL-17A в биопленке у больных ХП было в 2,3–4,0 раза выше,чем у здоровых людей, у больных КАП — в 3,6 раза, у пациентов с ХГ — в 3,3раза.
У больных ХПЛ и ХПС разница была незначительной. В десневойжидкости при всех формах заболеваний содержание IL-17A было в 1,8–2,0 разавыше, чем у здоровых людей, но в 10–16 раз выше, чем в биопленке.261Полученныенамирезультатысогласуютсясданнымидругихисследователей, установивших, что у людей с ХП увеличена экспрессия mRNAIL-17A в десневой жидкости и тканях, по сравнению со здоровыми людьми [137,463, 445]. У пациентов с агрессивным пародонтитом отмечают систематическиповышенные уровни IL-17A в сыворотке крови [413].
Эффективная терапияпародонтита приводит к снижению экспрессии IL-17 [179]. Однако в другихработах показано, что пародонтит может быть связан со снижениемконцентрации IL-17A в слюне [481] и в десневой жидкости у пациентов сгенерализованным агрессивным пародонтитом [199].Поэтому можно предположить, что у некоторых пациентов наопределенных стадиях IL-17 может играть конфликтную роль, как усиливаярекрутирование протективных нейтрофилов, так и поддерживая деструктивноевоспаление. Вместе с тем бесспорным можно считать факт, что экспрессия IL17A значительно увеличивается в хронически воспаленных тканях пародонта, посравнению со здоровыми тканями [80], причем на экспрессию IL-17 оказываютлокальное и системное влияние лечебные пародонтологические мероприятия[179, 379].IL-17 оказывает ряд эффектов на эпителиальные клетки полости рта, в томчисле усиливает TLR-опосредованное выделение IL1β и TNFα эпителиальнымиклетками десен [137].
В какой-то степени удивляет недостаточная секрецияэпителиальными клетками IL1α и TNFα по сравнению с соответствующейрегуляцией генов, однако это может отражать необходимость процессинга передсекрецией [379].C. R. Cardoso с соавт. (2009) продемонстрировали наличие Th17лимфоцитов в участках повреждения пародонтита [161], по другим данным этилимфоциты и тучные клетки являются источниками IL-17 в этих тканях [345].Поэтому можно предположить, что повышенная экспрессия IL-17 связана либос прямым влиянием патогенной биопленки, либо вторично с медиаторами,индуцируемыми биопленкой [244].262Установлено, что биопленки, состоящие из Streptococcus gordonii, S. oralis,S.
sanguinis, Fusobacterium nucleatum и Porphyromonas gingivalis, индуцируютболее высокие уровни IL-1α и проявляют синергичную стимулирующуюактивность по сравнению с аддитивным ответом 3 индивидуальных видовбактерий. Только биопленки S. gordoni /A. naeslundii и A. naeslundii / F. nucleatumмультибиопленки индуцировали более высокие уровни секреции IL-6 посравнению с контролем. При культивировании с S. gordoni /A. naeslundii/ F.nucleatum первым секретировался IL-8, хотя его уровень не был вышепредполагаемого композиционного, индуцируемого монобиопленками [354].В наших исследованиях концентрация IL-8 в биопленке увеличивалась от3 до 5,6 раза у больных ХП в зависимости от степени тяжести пародонтита, убольных КАП она была выше в 4,3 раза, а у больных ХГ — в 5,3 раза посравнению со здоровыми людьми.
В десневой жидкости она была выше тольков 1,3–1,6 раза, но относительно содержания в биопленке она была выше в 5,1 разау лиц со здоровым пародонтом и в 3,0–4,8 раза — у больных с хроническимивоспалительными заболеваниями тканей пародонта.Увеличение количества медиаторов острого воспаления (например, IL-8)будет усиливать рекрутирование нейтрофилов и потенцировать удаление любыхвнедрившихся микробов.
Поэтому важно оценить вклад этих цитокинов доприменения системных терапевтических агентов, подавляющих их действие.Более того, биопленки P. gingivalis индуцируют экспрессию генов IL-8, тогда каксекреция IL-8 не коррелировала с экспрессией генов. Это можно объяснить тем,чтобактериивыделяютгингипаины,ключевыеиммуномодулирующиекомпоненты P. gingivalis [344].
Поэтому авторы считают, что данная модельпозволяет отличать патогены и комменсалы, биопленки от планктонныхбактерий.Другие исследователи также выявили различный ответ эпителиальныхклеток (секрецию цитокинов и хемокинов) на биопленки патогенов и резидентов[385]. Они также определили меньший уровень продукции IL-8 и IL1α на P.gingivalis и Streptococcus spp. Таким образом, все эти исследования показали, что263эпителиальные клетки по-разному реагируют на патогены и комменсалы.Точный механизм этих процессов не полностью понятен.
S. mitis могутмодулировать экспрессию провоспалительного хемокина IL-8 [200]. Исходя изэтого можно считать, что S. mitis в качестве полезного комменсала можетдополнять иммунитет хозяина, поддерживая тканевой гомеостаз.С другой стороны, биопленки смешанных патогенов и биопленки P.gingivalis обладают огромным числом факторов вирулентности, которые могутиндуцировать врожденный иммунный ответ. P. gingivalis контактируют сэпителиальными клетками с помощью фимбрий и гингипаинов и проникают вклетки [239, 467]. ЛПС и его компонент липид А P. gingivalis индуцируютсильный ответ иммунной системы человека, поскольку связываются скомплексом TLR, способствуя секреции провоспалительных цитокиновэпителиальными клетками и клетками других типов [326].
Гингипаины P.gingivalis разрушают цитокины и сеть цитокиновых рецепторов хозяина,включая IL-1β [420], INF-γ [478] и TNF-α [159].Этим можно объяснить то, почему секреция данных цитокинов ихемокинов не коррелирует с экспрессией генов. Все эти факторы обусловливаютпатогенный потенциал P. gingivalis. Эпителиальные клетки не полностьюзащищают организм хозяина против действия биопленки, содержащейпародонтопатогенные виды бактерий.Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia и Treponema denticola —пародонтопатогены, так называемого «красного комплекса», ассоциированы споддесневой биопленкой в участках повреждения при пародонтите. G.
N.Belibasakis с соавт. (2013) [138] показали, что при культивированиимногослойной органотипической культуры эпителиальных клеток человека с 10видовой (Campylobacter rectus (OMZ 697), Fusobacterium nucleatum (OMZ 596),Porphyromonas gingivalis ATCC 33277T (OMZ 925), Prevotella intermedia ATCC25611T (OMZ 278), Tannerella forsythia OMZ1047, Treponema denticola ATCC35405T (OMZ 661), Veillonella dispar ATCC 17748T (OMZ 493), Actinomyces oris(OMZ 745), Streptococcus anginosus (OMZ 871) и Streptococcus oralis SK 248264(OMZ607))или7-видовойбиопленкой,вкоторойотсутствовалипародонтопатогены «красного комплекса», через 3 часа повышалась экспрессиягенов IL-8 одинаково, независимо от видового состава биопленки. Придобавлении пародонтопатогенов «красного комплекса» экспрессия генов IL-8увеличивалась в 3 раза.
Через 24 часа секреция IL-8 снижалась до 50%-ногоуровнявконтрольныхобработанномслюной.клетках,Ноэтокультивируемыхненапроисходилогидроксиапатите,приотсутствиипародонтопатогенов «красного комплекса». Авторы пришли к выводу, чтопародонтопатогены «красного комплекса» в составе биопленки по-разномурегулируют хемотаксический ответ. Эксрессия IL-8 индуцируется T. denticola, P.gingivalis, T. forsythia, а также их ассоциациями [147].Этим результатам соответствуют данные о том, что биопленки одного видаF. nucleatum, Actinomyces naeslundii, S. gordonii и S.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
