Диссертация (1139532), страница 34
Текст из файла (страница 34)
лекарственное средство разрушает227ДНК, а при значении прироста индекса ДНК-комет<0 делали вывод огенопротекторном эффекте препарата, т.е. данное лекарственное средствовосстанавливает структуру ДНК.Рисунок 6.1. ДНК-кометы пациента Ч., 42 лет в исходном состоянии(индекс ДНК-комет = 1,102).Примечание. Стрелочками обозначены «хвосты» комет.На рисунке 6.1. приведены фотоснимки ДНК-комет пациента Ч., 42 лет, висходном состоянии. Показаны существенные разрушения ДНК лейкоцитов ввиде протяжённых «хвостов» комет (отмечены стрелочками).
Приведенный вскобках индекс ДНК-комет (1,102) точно показывает степень разрушенностигенома.На следующем рисунке 6.2. показана реакция белых клеток крови навведение фосфокреатина в пробе in vitro у того же пациента. Степеньразрушения генома увеличилась практически в два раза, о чём свидетельствуетувеличение «хвостов» комет и индекс ДНК-комет, равный 2,085.228Рисунок 6.2. ДНК-кометы пациента Ч., 42 лет после добавления фосфокреатина(индекс ДНК-комет = 2,085).Примечание. Стрелочками обозначены «хвосты» комет.Расчёт показателя прироста индекса ДНК-комет следующий: (2,0851,102)/1,102= 0,89.
Получилась величина, большая 0, что свидетельствует огенотоксичностипредставляетсяфосфокреатинасравнениедлякартиныданногоразрушенияпациента.ДНКИнтереснымподвлияниемфосфокреатина у пациента Ч. с рисунком 6.3., на котором изображены кометытого же больного при добавлении в пробу известного сильнейшего мутагена –раствора метилметасульфоната. Сравнительный анализ рисунков 6.2. и 6.3.приводит к неутешительному выводу – для пациента Ч., 42 лет, фосфокреатинявляется мутагенным и, соответственно, назначать его категорически нельзя.Рисунок 6.3.
ДНК-кометы пациента Ч., 42 лет после добавления метилметасульфоната.Примечание. Стрелочками обозначены «хвосты» комет.229В тоже время, для другого пациента – С., женщины 49 лет, фосфокреатиноказывается полезным, о чём свидетельствует сравнение рисунков 6.4. и 6.5.:при добавлении фосфокреатина степень разрушения ДНК уменьшается.Рисунок 6.4. ДНК-кометы пациентки С., 49 лет в исходном состоянии(индекс ДНК-комет = 1,037)Рисунок 6.5.
ДНК-кометы пациентки С., 49 лет после добавления фосфокреатина(индекс ДНК-комет = 0,736)Расчёт показателя прироста индекса ДНК-комет следующий: (0,7361,037)/1,037= -0,29. Получилась величина, меньшая 0, что свидетельствует о230генопротекторномэффектефосфокреатинадляданногопациента,т.е.назначение указанного метаболического препарата пациентке С.
будетэффективным и безопасным.При изучении триметазидина в пробах in vitro были получены похожиеданные. Так, у пациента К., 55 лет, индекс повреждения ДНК в исходномсостоянии составил 0,153, а под влиянием триметазидина – 0,876, показательприроста равен 4,73. У пациентки М., 44 лет, индекс повреждения ДНК висходном состоянии составил 0,49, а под влиянием триметазидина – 0,03,показатель прироста равен -0,94. Т.е. для первого пациента зарегистрированныйразрешённый к использованию лекарственный препарат триметазидин в случаеего назначения окажет повреждающее действие на геном, а для второйпациентки тот же триметазидин будет эффективным и безопасным.Описанным выше способом определяли эффективность и безопасностьназначения иных лекарственных препаратов из группы метаболическихкорректоров – мельдония и цитофлавина.
Получили аналогичные результаты:пациенты по-разномуреагировали на введение разных лекарственныхпрепаратов метаболического ряда.Намибылпредложенспособпрогнозированияиндивидуальнойэффективности и безопасности препаратов метаболического ряда, которыйпозволяет на основании изучения реакции генома человека на введениеметаболически активных лекарственных средств в пробах in vitro определять ихпотенциальную генотоксичность либо генопротекторный эффект.Проводили сравнительный анализ между группами пациентов, у которыхвведениеметаболическогокорректоравызывалоповреждениеиливосстановление ДНК.
Полученные результаты представлены в таблицах:влияние на геном человека триметазидина (Таблицы 6.9 и 6.10), мельдония231(Таблицы 6.11 и 6.12), фосфокреатина (Таблицы 6.13 и 6.14) и цитофлавина(Таблицы 6.15 и 6.16).Таблица 6.9Влияние триметазидина на геном человекаРазрушает ДНК, n=24 Восстанавливает ДНК,n=15Фактор курения: количество сигарет4,21±1,61*0,41±0,41*в сутки, шт.ЭхоКГ: КДР ЛЖ, мм56,79±2,66*50,22±1,66*ЭхоКГ: КДР ЛП, мм48,31±2,38***37,57±1,35***ЭхоКГ: КДР ПП, мм42,61±2,26**36,18±0,95**ЭхоКГ: КДО ЛЖ, мл142,42±10,90117,11±7,97ЭхоКГ: КСО ЛЖ, мл72,03±10,78*46,43±5,92*ЭхоКГ: АД в лёгочной артерии,42,67±2,80*36,63±0,63*мм.рт.ст.Кортизол в сыворотке крови, мкг/дл16,91±4,60*5,23±0,91*Примечание. Достоверность различий оценивали по t-критерию Стьюдента *p<0,05;**p<0,01; ***p<0,001.ПоказательТаблица 6.10Влияние триметазидина на геном человекаПоказательРазрушает ДНК, n=24 Восстанавливает ДНК,n=15ЭхоКГ: нарушения локальной1,05/0,43/сократимости, баллы0,00 (0,00; 3,00)0,00 (0,00; 1,00)Флюоресценция митохондрий,405,81/304,87/окраска пиреном, усл.ед.387,80 (197,03; 528,55) 314,10 (239,60; 349,00)Примечание.
Числитель - среднее арифметическое, знаменатель - медиана, 25% и 75% квартиль.Достоверность различий оценивали по U-критерию Манна-Уитни *p<0,05.Триметазидин способен восстанавливать ДНК у пациентов с ИБС приотсутствиифакторакурения,наличиинезначительныхпатологическихизменений морфофункционального состояния сердца (практически нормальныеразмеры полостей, небольшое повышение АД в лёгочной артерии, нарушениялокальной сократимости только на уровне гипокинезии), невысокий уровенькортизола в сыворотке крови, исходно невысокая активность митохондрий.Триметазидин может проявлять генотоксические свойства при условии егоиспользования у курящих больных с ИБС с существенными патологическими232изменениями морфофункционального состояния сердца в виде расширенияполостей, высокой лёгочной гипертензии и выраженных нарушениях локальнойсократимости (гипо, дис- и акинезия) и с исходно высокой активностьюмитохондрий.Таблица 6.11Влияние мельдония на геном человекаРазрушает ДНК, n=23 Восстанавливает ДНК,n=12Фактор курения: количество сигарет3,94±1,55*0,30±0,30*в сутки, шт.ЛПОНП, ммоль/л0,78±0,06**0,55±0,05**ТГ, ммоль/л1,67±0,14*1,20±0,12*АТФ сыворотки крови, мкмоль/л239,67±5,32**216,48±6,25**АТФ/АДФ сыворотки крови2,07±0,07*1,77±0,11*ДНК: отрицательный контроль:4,75±0,528,94±2,24%ДНК в хвосте кометыПримечание.
Достоверность различий оценивали по t-критерию Стьюдента *p<0,05; **p<0,01.ПоказательТаблица 6.12Влияние мельдония на геном человекаРазрушает ДНК, n=23Восстанавливает ДНК,n=12Фактор гиподинамии, баллы0,58/0,30/0,50 (0,50; 1,00)*0,25 (0,00; 0,50)*Флюоресценция митохондрий,384,08/283,22/окраска пиреном, усл.ед.371,05 (303,52; 447,00)* 268,00 (195,15; 357,20)*ДНК: отрицательный контроль:1,96/2,50/максимальная степень2,00 (1,00; 3,00)2,00 (2,00; 3,00)повреждения, усл.
ед.ДНК: отрицательный контроль:0,14/0,34/индекс ДНК-комет0,07 (0,02; 0,16)*0,17 (0,07; 0,71)*Примечание. Числитель - среднее арифметическое, знаменатель - медиана, 25% и 75% квартиль.Достоверность различий оценивали по U-критерию Манна-Уитни *p<0,05.ПоказательМельдоний способен восстанавливать структуру ДНК у некурящихпациентов с ИБС, ведущих физически активный образ жизни, с нормальнойлипидограммой, исходно низкой активностью митохондрий, гипоэргозом ибольшой степенью повреждённости ДНК в исходном статусе. Мельдоний можетоказыватьгенотоксичныйэффектукурящихпациентов,ведущих233малоподвижный образ жизни, с нарушениями холестеринового профиля, сисходновысокойактивностьюмитохондрий,высокимуровнемэнергообеспечения и небольшой степенью повреждённости ДНК.Таблица 6.13Влияние фосфокреатина на геном человекаПоказательРазрушает ДНК, n=24 Восстанавливает ДНК,n=9Лимфоциты крови, %33,29±2,36*24,50±2,06*Сегментоядерные нейтрофилы55,25±2,7563,26±2,81крови, %ЭКГ: смещение сегмента ST на …0,98±0,16*1,56±0,15ммПримечание.
Достоверность различий оценивали по t-критерию Стьюдента *p<0,05.Таблица 6.14Влияние фосфокреатина на геном человекаПоказательРазрушает ДНК, n=24 Восстанавливает ДНК,n=9Стадия ХСН1,46/1,89/2,00 (1,00; 2,00)2,00 (2,00; 2,00)ФК ХСН по NYHA1,96/2,56/2,00 (2,00; 2,00)*3,00 (2,00; 3,00)*Индекс адаптации, усл. ед.0,58/0,57/0,59 (0,44; 0,72)0,51 (0,40; 0,74)ЭхоКГ: нарушения локальной0,43/1,33/сократимости, баллы0,00 (0,00; 1,00)1,00 (0,00; 3,00)СОККН, усл.
ед.2,12/3,47/1,70 (1,45; 3,08)*3,73 (2,31; 4,53)*Примечание. Числитель - среднее арифметическое, знаменатель - медиана, 25% и 75% квартиль.Достоверность различий оценивали по U-критерию Манна-Уитни *p<0,05.ВведениефосфокреатинапациентамсИБСсопровождалосьвосстановлением ДНК у пациентов с прогрессирующей ХСН, выраженнойишемией миокарда по данным ЭхоКГ и ЭКГ, низкой стойкостью организма ккислородной недостаточности, с адаптационной реакцией ориентировки.Фосфокреатин может проявлять генотоксические свойства у пациентов с ИБС иначальными стадиями ХСН, небольшой степенью ишемии миокарда, высокойстойкостью организма к кислородной недостаточности, с адаптационнойреакцией стойкой активации. Другими словами, фосфокреатин оказывается234более эффективным и безопасным у пациентов с более тяжелой кардиальнойпатологией и менее эффективным и опасным у пациентов с более лёгкимтечением заболевания сердца.Таблица 6.15Влияние цитофлавина на геном человекаРазрушает ДНК, n=18 Восстанавливает ДНК,n=12Фактор курения: количество сигарет6,47±2,17**0,00±0,00**в сутки, шт.Диастолическое АД, мм.рт.ст.88,39±2,02**80,00±1,85**Лимфоциты крови, %39,54±4,77*25,94±3,32*Сегментоядерные нейтрофилы49,50±5,0860,83±3,11крови, %ХС общий, моль/л7,83±0,43**5,62±0,27**ЛПНП, моль/л4,36±0,42*2,67±0,39*ЛПОНП, моль/л1,00±0,00**0,62±0,07**ТГ, ммоль/л2,30±0,00*1,34±0,16*цАМФ/цГМФ сыворотки крови20,64±4,57**4,78±0,88**АТФ эритроцитов, мкмоль/л702,11±2,93679,32±14,23АТФ/АДФ эритроцитов2,33±0,05*2,18±0,04*ДНК: отрицательный контроль:10,44±2,89**29,67±5,38**количество повреждённых клеток, %Примечание.
Достоверность различий оценивали по t-критерию Стьюдента *p<0,05; **p<0,01.Таблица 6.16Влияние цитофлавина на геном человекаПоказательРазрушает ДНК, n=18 Восстанавливает ДНК,n=12Индекс адаптации, усл. ед.0,70/0,57/0,66 (0,58; 0,78)0,59 (0,46; 0,66)ЭхоКГ: нарушения локальной1,38/0,18/сократимости, баллы1,00 (0,00; 3,00)*0,00 (0,00; 0,00)*ДНК: отрицательный контроль:0,17/0,40/индекс ДНК-комет0,09 (0,03; 0,15)**0,44 (0,15; 0,56)**Примечание. Числитель - среднее арифметическое, знаменатель - медиана, 25% и 75% квартиль.Достоверность различий оценивали по U-критерию Манна-Уитни *p<0,05; ** p<0,01.ПоказательЦитофлавин при введении пациентам с ИБС способен восстанавливатьДНК у некурящих лиц с нормальным уровнем диастолического АД,адаптационнойреакциейориентировки,незначительныминарушениямихолестеринового профиля, с невысокой степенью ишемии миокарда, низким235соотношением внутриклеточных мессенджеров цАМФ/цГМФ, гипоэргозом,большой степенью повреждённости ДНК в исходном статусе.
Цитофлавинможетпроявлять генотоксические свойстваукурящихпациентов состенокардией напряжения, с тенденцией к повышению диастолического АД,адаптационнойпрофилем,реакциейвыраженнойпереактивации,ишемиейвысокоатерогенныммиокарда,высокимлипиднымсоотношениемвнутриклеточных мессенджеров цАМФ/цГМФ, с исходно высоким уровнемэнергообеспечения и невысокой степенью повреждённости ДНК в исходномстатусе.Анализ различных вариантов реагирования митохондрий и генома навведениелекарственныхпрепаратовметаболическогорядапоказалвозможность активации митохондрий и восстановления ДНК, активациимитохондрий и разрушения ДНК, угнетения митохондрий и восстановленияДНК, угнетения митохондрий и разрушения ДНК.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
