Диссертация (1139532), страница 32
Текст из файла (страница 32)
вместе с нормальным аллелем несутпатологический (Рисунок 5.11). Гомозиготных людей по патологическомуаллелю (генотип СС) в выборке не обнаружено. Таким образом, частотавстречаемости патологического аллеля равна 0,092, а нормального 0,908.Отмечается невысокий избыток гетерозигот (коэффициент инбридинга F=0,102), а также низкое значение показателя генетической изменчивости индексаШеннона (I=0,308). Однако, при этом генотипическая структура исследуемойвыборки в целом соответствует закону Харди-Вайнберга (χ2=0,953, Р=0,329,Df=1), что позволяет говорить об относительной стабильности популяции поданному гену.Рисунок 5.11. Электрофореграмма полиморфизма гена CYP2C9*2 Arg144Cys упациентов с ИБС.Примечание. Стрелочками обозначены гетерозиготы по патологическому аллелю АС.Необозначенные позиции соответствуют гомозиготам по нормальному аллелю АА.По первому и второму генам митохондриальной супероксиддисмутазы врезультате анализа выборки мутантных аллелей выявлено не было, т.е.
всеисследуемые пациенты были гомозиготны по нормальному аллелю и не имелимитохондриальных болезней (Рисунки 5.12.,5.13.).211Рисунок 5.12. Электрофореграмма полиморфизма гена митохондриальнойсупероксиддисмутазы2 MnSOD T58C у пациентов с ИБС.Примечание. Все позиции – гомозиготы по нормальному аллелюРисунок 5.13.
Электрофореграмма полиморфизма гена митохондриальнойсупероксиддисмутазы2 MnSOD C60T у пациентов с ИБС.Примечание. Все позиции – гомозиготы по нормальному аллелю.Исследование полиморфизма гена eNOS C876T выявило высокую степеньизменчивости анализируемой выборки пациентов по данному генетическомумаркеру (Рисунок 5.14.).212Рисунок 5.14.
Электрофореграмма полиморфизма гена eNOS C876T упациентов с ИБС.Примечание. Толстая стрелка – гомозиготы по нормальному аллелю (ТТ),тонкая стрелка – гомозигота по патологическому аллелю (СС), тонкая заштрихованнаястрелка – гетерозигота (СТ).Так, 7 человек (8%) являлись гомозиготами по патологическому аллелю(генотип СС), 48 человек (53%) являлись гомозиготами по нормальному аллелю(генотип ТТ), а 35 человек (39%) – гетерозиготы (генотип СТ). Частота аллеля Сравна 0,272; частота аллеля Т равна 0,728.
Уровень генетической изменчивостиотносительно высок (I=0,585), а коэффициент инбридинга колеблется околонуля (F=0,011). Генотипическая структура исследуемой выборки по гену eNOSв целом соответствует закону Харди-Вайнберга (χ2=0,012, Р=0,913, Df=1) опанмиктической популяции в отсутствии естественного отбора.Такимобразом,дляреализациифармакодинамическихэффектовисследуемых нами лекарственных препаратов из группы метаболическихкорректоров у пациентов с ишемической болезнью сердца может иметьзначение генетический фактор, а именно полиморфизм гена системы213биотрансформации лекарств - CYP2C9*2 Arg144Cys и гена эндотелиальнойсинтазы окиси азота eNOS C876T.Проводили сравнительный анализ между группами пациентов, имеющихнормальный и патологический ген CYP2C9*2 Arg144Cys.
Обнаружили ряддостоверных отличий (Таблица 5.15 и Таблица 5.16).Таблица 5.15Сравнительный анализ групп пациентов с ИБС, имеющих нормальный ипатологический ген CYP2C9*2 Arg144CysПациенты сПациенты сПоказательпатологическимнормальнымргеном (АС)геном (АА)Вес тела, кг85,03±2,0799,24±4,460,002Индекс Кетле, кг/м229,90±0,6533,14±1,370,020ПТИ, %96,29±1,22100,00±00,003МНО1,07±0,031,00±00,036ДНК: количество повреждённых клеток, %3,43±1,1311,00±3,210,020ДНК: мельдоний, прирост индекса ДНКкомет2,72±1,200,17±0,290,053Примечание. Достоверность различий оценивали по t-критерию СтьюдентаУ носителей патологического гена цитохрома CYP2C9*2 Arg144Cys(генотипаАС)наблюдалиследующиеособенности:болеевысокийфункциональный класс стенокардии, избыточный вес тела, склонность кгиперкоагуляции крови (несмотря на то, что все больные принималиантиагреганты),существеннаясвязьспсихологическимпрофилем–повышенный уровень личностной тревожности, сильнее повреждена ДНК висходном статусе.214Таблица 5.16.Сравнительный анализ групп пациентов с ИБС, имеющих нормальный ипатологический ген CYP2C9*2 Arg144CysПациенты сПациенты сПоказательпатологическимнормальнымргеном (АС)геном (АА)ФК стенокардииОжирение, степеньЛТ, баллыДНК: максимальнаястепень повреждения2,33/2,79/3,00 (2,00; 3,00)3,00 (2,00; 3,00)0,64/1,24/0,00 (0,00; 1,00)1,00 (0,00; 2,00)48,28/53,14/47,00 (41,50; 54,50)52,50 (47,75; 58,25)1,60/2,45/2,00 (0,50; 2,00)2,00 (2,00; 3,00)0,0700,0390,0610,023Примечание.
Числитель - среднее арифметическое, знаменатель - медиана, 25% и 75% квартиль.Достоверность различий оценивали по U-критерию Манна-Уитни.У носителей патологического гена цитохрома CYP2C9*2 Arg144Cys(генотипаАС)обнаружилиспособностьмельдонияоказыватьгенопротекторный эффект, а у цитофлавина – отсутствие генотоксичности, в товремя как у пациентов с генотипом АА и мельдоний и цитофлавин проявлялигенотоксические свойства (Рисунок 5.15 и 5.16).215Р=0,072Рисунок 5.15. Прирост % ДНК в хвосте кометы лейкоцитов крови пациентов ИБС сгенотипами АА и АС цитохрома CYP2C9*2 Arg144Cys при внесении в пробу мельдония(тестирование in vitro)Примечание. Достоверность различий оценивали по t-критерию Стьюдента.Р=0,083Рисунок 5.16.
Количество апоптотических лейкоцитов крови пациентов ИБС сгенотипами АА и АС цитохрома CYP2C9*2 Arg144Cys при внесении в пробу цитофлавина(тестирование in vitro)Примечание. Достоверность различий оценивали по t-критерию Стьюдента.216Проводили сравнительный анализ между группами пациентов, имеющихнормальный и патологический ген эндотелиальной синтазы окиси азота eNOSC876T. Получили ряд достоверных отличий (Таблица 5.17).У носителей патологического гена эндотелиальной синтазы окиси азотаeNOS C876T (генотипов СС и СТ) наблюдали ряд особенностей: выше ЧССпочти на 10 ударов в минуту (что может негативно отражаться на будущейпродолжительности жизни), гипергликемия, более высокий уровень креатининаи калия в крови (возможна связь с функциональной активностью почек),практически в 2 раза сниженный уровень эндотелиальной и индуцибельнойсинтаз окиси азота в лизате эритроцитов, повышенный уровень кортизола,циклической АМФ и соотношения цАМФ к цГМФ в сыворотке крови (какотражениесниженияактивностистресс-лимитирующихиповышенияактивности стресс-реализующих систем на уровне гуморальной регуляции ивнутриклеточных мессенджеров).Таблица 5.16 (начало)Сравнительный анализ групп пациентов с ИБС, имеющих нормальный ипатологический ген синтазы окиси азота eNOS C876TПациенты сПациенты сПоказательпатологическимнормальнымргеном (СС, СТ)геном (ТТ)ЧСС, уд/мин67,80±2,2776,00±2,290,026Глюкоза крови, ммоль/л5,62±0,208,12±0,840,008Креатинин крови, ммоль/л89,34±2,5499,41±3,460,020Калий крови, ммоль/л4,55±0,084,89±0,110,014Кортизол сыворотки крови, мкг/дл6,32±0,4211,63±2,570,056цАМФ сыворотки крови, пмоль/мл0,99±0,242,32±0,760,066цАМФ/цГМФ сыворотки крови9,38±3,6922,83±2,790,020217Таблица 5.16 (окончание)Сравнительный анализ групп пациентов с ИБС, имеющих нормальный ипатологический ген синтазы окиси азота eNOS C876TПациенты сПациенты сПоказательпатологическимнормальнымргеном (СС, СТ)геном (ТТ)eNOS в лизате эритроцитов, нг/мл1039,23±444,31574,10±117,220,341iNOS в лизате эритроцитов, нг/мл28,40±3,0415,81±4,930,046ДНК: мельдоний: прирост индексаДНК-комет-0,16±0,191,45±0,530,030ДНК: цитофлавин: % ДНК в хвостекометы4,59±1,8410,73±2,090,077Примечание.
Достоверность различий оценивали по t-критерию СтьюдентаВведение некоторых препаратов метаболического ряда (цитофлавина и,особенно,мельдония)пациентамспатологическимгеномeNOSсопровождалось негативными эффектами в виде разрушения ДНК, а пациентамс нормальным генотипом eNOS – положительными эффектами в видевосстановления разрушенной ДНК (Рисунок 5.17).Полученные нами данные, во-первых, подтверждают многогранностьфункций оксида азота как эндотелиального фактора вазодилятации и медиатораNO-стресс-лимитирующей системы [111,115]; во-вторых, показывают прямуюсвязь патологии гена eNOS C876T и снижения продукции синтаз окиси азота(причём не только эндотелиальной, но и индуцибельной); в-третьих,демонстрируют процессы активации стресс-реализующих систем (кортизол,цАМФ) в условиях недостаточного синтеза окиси азота и, в-четвёртых, впервыепоказывают нецелесообразность назначения метаболических корректоровпациентам с патологическим геном eNOS, механизм реализации которых связанс влиянием на эндотелий (цитофлавина и, особенно, мельдония).218Прирост % ДНК в хвосте кометы, усл.ед.Р=0,013Р=0,093Рисунок 5.17.
Прирост %ДНК в хвосте кометы лейкоцитов крови пациентов ИБС сгенотипами ТТ и СС,СТ эндотелиальной синтазы окиси азота eNOS C876T при внесении впробу милдроната и цитофлавина (тестирование in vitro)Примечание. Достоверность различий оценивали по t-критерию Стьюдента.Таким образом, генетический фактор имеет существенное значение дляпатогенеза развития ИБС, определяет способность некоторых метаболическихкорректоров оказывать генопротекторный либо генотоксический эффект.***Подводя итог данной главе, следует сказать, что стандартные критерииперсонализации фармакотерапии (пол, возраст, фактор курения, факт наличияосновного заболевания и сопутствующей патологии, генетический фактор,психологический профиль личности и т.д.), безусловно, формируют своипатогенетические особенности течения ишемической болезни сердца иоказывают некоторое влияние на чувствительность больных к тем или инымметаболическим корректорам. Однако, для проведения персонального выборанаиболее эффективного препарата метаболического ряда, анализа только этих219факторовоказывается недостаточно.Последнее обстоятельствотребуетразработки иных новаторских подходов к персонализации метаболическойфармакотерапии у пациентов с ИБС, чему посвящены следующие главыдиссертации.220Глава 6.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
