Диссертация (1139532), страница 24
Текст из файла (страница 24)
(начало)Показатели метаболизма миокарда у крыс 24 месяцев в норме, при экспериментальнойишемии миокарда и на фоне введения триметазидина (M±m)ПоказателиЭритроцитыСыворотка кровиМитохондрииИнтактныекрысы, n=10Крысы с ишемиеймиокарда , n=10Крысы с ишемиеймиокарда +триметазидин, n=10АТФ, мкмоль/л529,03±7,36ΔΔ°°474,09±8,94**463,97±2,53**АДФ, мкмоль/л219,40±8,56°°241,95±12,44260,68±6,68**2,3ДФГ, мкмоль/л3,30±0,17ΔΔ°°5,92±0,16**6,03±0,07**АТФ, мкмоль/л177,09±4,03°°166,99±4,46°°148,10±2,48ΔΔ **АДФ, мкмоль/л87,31±1,43°87,51±2,6982,40±1,37*Пируват,мкмоль/л62,75±1,70ΔΔ52,06±1,43**°°66,84±1,15 ΔΔЛактат, мкмоль/л0,73±0,04°ΔΔ0,99±0,03**°°0,85±0,02* ΔΔКФК-МВ,мккатол/л0,09±0,01ΔΔ°°0,33±0,02**°°0,20±0,02**ΔΔЛДГ1, мккатол/л0,04±0,00ΔΔ°°0,11±0,00**°°0,08±0,00**ΔΔСДГ,нмоль/мин·мг10,46±0,44ΔΔ°°7,74±0,21**°°6,66±0,22**ΔΔЦС, нмоль/мин·мг2,72±0,28 Δ1,92±0,05*2,20±0,14ПДГ,мкмольНАД/мин·мг22,92±1,09 Δ19,51±0,66*°22,31±0,86 Δ152Таблица 4.2.
(окончание)Показатели метаболизма миокарда у крыс 24 месяцев в норме, при экспериментальнойишемии миокарда и на фоне введения триметазидина (M±m)ПоказателиГомогенатмиокардаИнтактныекрысы, n=10Крысы с ишемиеймиокарда , n=10Крысы с ишемиеймиокарда +триметазидин, n=10Гексокиназа,мкмоль/мгбелка·час27,91±0,76ΔΔ33,33±1,59**36,94±0,90КФК, мккатол/гбелка·час120,25±3,71°°129,21±7,62°°93,37±0,94ΔΔ°°ФФК, ммоль/мгбелка·час12,01±0,67ΔΔ°°19,47±0,40**°°26,10±0,89**ΔΔПируват, мкмоль/гткани0,14±0,010,14±0,000,15±0,00Лактат, мкмоль/гткани2,60±0,22 Δ1,66±0,20*°2,62±0,25 Δ2,03±0,09ΔΔ°°1,06±0,03**°1,42±0,12**ΔАТФ, мкмоль/лПримечание. Достоверность различий оценивали по модифицированному t-критериюСтьюдента с поправкой Бонферрони: *p<0,05; ** p<0,01 в сравнении с интактными крысами;Δp<0,05; ΔΔ p<0,01 в сравнении с группой «крысы с ишемией миокарда»; ° p<0,05; °°p<0,01 всравнении с группой «крысы с ишемией миокарда+триметазидин».Введение триметазидина 24-месячным животным с экспериментальнойишемией миокарда приводило к достоверному снижению концентрации АТФ всыворотке крови и повышению содержания аденозинтрифосфата в гомогенатемиокарда.
В сыворотке крови повышался уровень пирувата и снижался уровеньлактата, в то время, как в миокарде количество пирувата не изменялось, аколичество лактата повышалось до уровня интактных крыс соответствующеговозраста. Концентрация КФК-МВ и ЛДГ1 в сыворотке крови под действиемтриметазидинадостоверноснижалась,однакобездостиженияуровняинтактных крыс. Активность митохондриальных ферментов изменялась153неоднозначно: достоверно снижалась активность СДГ и повышалась активностьПДГ и ЦС. В гомогенате миокарда под действием триметазидина уменьшаласьактивность КФК и достоверно увеличивалась активность ФФК. По всейвидимости, у 24-месячных крыс с экспериментальной ишемией миокардатриметазидиноказываетпреимущественностимулирующеевлияниенапроцессы гликолиза без стимуляции аэробных процессов энергообеспечения,что оказывается достаточным для стабилизации цитоплазматических мембранкардиомиоцитов и сохранения АТФ в сердечной мышце, но не восстанавливаетвполноймереадаптационныхнарушениявозможностейметаболизма.сердцавПо-видимому,связисограничениепроцессомстаренияобусловливает более низкую эффективность триметазидина у старых крыс всравнении с более молодыми.Интересен тот факт, что при нормальном старении обнаруживаютсяизменения метаболизма в сердечной мышце аналогичной направленности.
Этонаблюдение согласуется с теорией старения организма В.В. Фролькиса,утверждавшего о развитии стресс-возраст-синдрома [230]. Наложение двуходнонаправленных процессов – патологии и возраста – приводит к усугублениюметаболическихнарушений,чтонапримеренашегоисследованияобнаружилось у старых крыс с ишемией миокарда.Внашемособенностиисследованиидействияполученытриметазидинарезультаты,наподтверждающиеметаболизммиокарда,преимущественно в среднем возрасте животных. Представляют интересполученные нами данные о снижении эффективности триметазидина у старыхкрыс с ишемией миокарда. Как было сказано выше, процесс старениясопровождается усугублением метаболических нарушений внутри клетоксердца, что может быть связано со снижением количества митохондрий встарости. С возрастом увеличивается роль гликолитических процессов и154креатинкиназнойсистемывэнергообеспечениимиокарда,именногликолитические ферменты и КФК играют ключевую роль в процессахадаптации у старых животных. По-видимому, активация аэробных путейсинтеза АТФ с возрастом становится проблематичной, поскольку сниженноеколичество митохондрий ограничивает возможности регуляторного влияния намитохондриальные ферменты.
Этим можно объяснить ограничение эффектатриметазидина у старых животных с экспериметальной ишемией миокарда.***Таким образом, у крыс - самцов линии Вистар при моделированнойишемиимиокардавведениетриметазидинаприводилокповышениюутилизации углеводов с энергетическими целями в сердечной мышце, чтосопровождалосьпризнакамистабилизациимембранклетоксердцаиуменьшением степени тканевой гипоксии. С возрастом эффективностьтриметазидина снижалась в связи с ограничением адаптационных механизмов квосстановлению энергообмена в старости.1554.2.
Результаты экспериментального исследования мельдонияпри ишемии миокардаДля выяснения механизма действия мельдония на энергообмен вкардиомиоцитах проводили экспериментальное исследование на крысах.Моделирование ишемии миокарда сопровождалось появлением признаковгипоэргоза, которые усиливались у старых крыс, что подробно описано выше.Введение мельдония 10-месячным крысам приводило к достоверномуповышению концентрации АТФ в сыворотке крови, эритроцитах и в гомогенатемиокарда практически до уровня интактных крыс, что свидетельствует обустранении энергодефицита, вызванного ишемией (Таблица 4.3.).Таблица 4.3. (начало)Показатели метаболизма миокарда у крыс 10 месяцев в норме, при экспериментальнойишемии миокарда и на фоне введения мельдония (M±m)ПоказателиЭритроцитыСыворотка кровиИнтактныекрысы, n=10Крысы сишемиеймиокарда, n=10Крысы с ишемиеймиокарда+мельдоний, n=10АТФ, мкмоль/л664,54±14,49 ΔΔ594,44±5,75**$638,88±14,96ΔАДФ, мкмоль/л315,11±8,78330,53±16,05319,27±7,512,3ДФГ, мкмоль/л4,82±0,29 ΔΔ$7,21±0,32**$$5,70±0,18* ΔΔАТФ, мкмоль/л200,08±3,47 ΔΔ162,81±4,57**$$192,32±5,36 ΔΔАДФ, мкмоль/л75,92±1,5879,31±1,1377,33±2,29Пируват,мкмоль/л58,59±2,2659,95±1,02$53,44±1,99 ΔЛактат, мкмоль/л0,50±0,030,62±0,14$$0,59±0,03КФК-МВ,мккатол/л0±0 ΔΔ0,25±0,04**$$0±0 ΔΔЛДГ1, мккатол/л0,02±0,00 ΔΔ$$0,09±0,01**$$0,05±0,00**ΔΔ156Таблица 4.3.
(окончание)Показатели метаболизма миокарда у крыс 10 месяцев в норме, при экспериментальнойишемии миокарда и на фоне введения мельдония (M±m)ПоказателиМитохондрииГомогенатмиокардаИнтактныекрысы, n=10Крысы сишемиеймиокарда, n=10Крысы с ишемиеймиокарда+мельдоний, n=10СДГ,нмоль/мин·мг17,82±1,10 ΔΔ$11,83±0,47**13,68±0,65*ЦС, нмоль/мин·мг3,94±0,23 ΔΔ$2,38±0,21**$3,12±0,10*ΔПДГ,мкмольНАД/мин·мг31,04±0,89 ΔΔ$$21,68±0,90**$$27,30±0,45** ΔΔГексокиназа,мкмоль/мгбелка·час27,38±1,20 ΔΔ$36,22±0,54**32,30±1,72*КФК, мккатол/гбелка·час106,13±18,71138,95±1,24$$122,12±1,82 ΔΔФФК, ммоль/мгбелка·час12,97±0,54 ΔΔ$$16,38±0,71**$18,87±0,71** ΔПируват, мкмоль/гткани0,16±0,010,19±0,010,18±0,01Лактат, мкмоль/гткани3,10±0,34 Δ$$2,09±0,24*$$4,48±0,19** ΔΔАТФ, мкмоль/л3,08±0,24 ΔΔ1,18±0,08**$$3,16±0,09 ΔΔПримечание.
Достоверность различий оценивали по модифицированному t-критериюСтьюдента с поправкой Бонферрони: *p<0,05; ** p<0,01 в сравнении с интактными крысами;Δp<0,05; ΔΔ p<0,01 в сравнении с группой «крысы с ишемией миокарда»; $p<0,05; $$p<0,01 всравнении с группой «крысы с ишемией миокарда+мельдоний».На фоне введения мельдония наблюдали достоверное снижение уровня2,3ДФГ в эритроцитах, как признак существенного уменьшения степенитканевой гипоксии. В сыворотке крови обнаружили значительное снижениеконцентрации органоспецифических миокардиальных ферментов – КФК-МВ и157ЛДГ1, что говорит об уменьшении «утечки» ферментов из цитоплазмы клетоквследствие стабилизации мембран кардиомиоцитов.
В сыворотке кровиобнаружили достоверное снижение концентрации пирувата, а в митохондриях –активацию ПДГ, что свидетельствует о стимуляции процесса окислительногодекарбоксилирования пирувата. В митохондриях также выявили достовернуюактивацию ЦС и незначительную активацию СДГ. Полученные данныесвидетельствуютомягкойстимуляциипроцессовокислительногофосфорилирования, что, с одной стороны, обеспечивает клетку энергией, но сдругой стороны, использует только тот кислород, который имеется в наличии,не повышая потребности к нём в условиях тканевой гипоксии.
Можно сказать,что мельдоний действует весьма гармонично, активируя аэробные процессыэнергообеспечения кардиомиоцитов соответственно степени снижения тканевойгипоксии. Кроме того, выявлены признаки активации анаэробных механизмовизвлечения энергии из углеводов в виде стимуляции процесса гликолиза, о чёмсвидетельствует повышение активности ФФК, а также повышение захваталактата миокардом. Таким образом, мельдоний у крыс молодого возраста сишемией миокарда активирует гликолиз, окислительное фосфорилирование иокислительноедекарбоксилирование,стабилизируетмембраныкардиомиоцитов, существенно уменьшает степень гипоксии, вследствие чеговосстанавливается исходный уровень АТФ и осуществляется адекватноеэнергообеспечение миокарда.У старых крыс с экспериментальной ишемией миокарда введениемельдония приводило к определённой метаболической коррекции с той женаправленностью процесса, что и у молодых животных, но в несколькоменьшей степени выраженности (Таблица 4.4.).158Таблица 4.4.
(начало)Показатели метаболизма миокарда у крыс 24 месяцев в норме, при экспериментальнойишемии миокарда и на фоне введения мельдония (M±m)ПоказателиЭритроцитыСывороткакровиМитохондрииГомогенатмиокардаИнтактныекрысы, n=10Крысы сишемиеймиокарда, n=10Крысы с ишемиеймиокарда +мельдоний, n=10АТФ, мкмоль/л529,03±7,36 ΔΔ$$474,09±8,94**480,12±5,33**АДФ, мкмоль/л219,40±8,56$241,95±12,44250,84±5,65*2,3ДФГ, мкмоль/л3,30±0,17 ΔΔ$$5,92±0,16**$$4,68±0,22** ΔΔАТФ, мкмоль/л177,09±4,03166,99±4,46167,29±2,03АДФ, мкмоль/л87,31±1,4387,51±2,6983,25±1,46Пируват, мкмоль/л62,75±1,70 ΔΔ$52,06±1,43**$$68,44±0,67* ΔΔЛактат, мкмоль/л0,73±0,04ΔΔ$$0,99±0,03**$$0,10±0,00** ΔΔКФК-МВ, мккатол/л0,09±0,01 ΔΔ$$0,33±0,02**$$0,20±0,01** ΔΔЛДГ1, мккатол/л0,04±0,00 ΔΔ0,11±0,00**0,21±0,13СДГ, нмоль/мин·мг10,46±0,44 ΔΔ$$7,74±0,21**7,52±0,33**ЦС, нмоль/мин·мг2,72±0,28 Δ1,92±0,05*2,25±0,24ПДГ,мкмольНАД/мин·мг22,92±1,09 Δ$19,51±0,66*$$26,76±0,94* ΔΔГексокиназа,мкмоль/мг белка·час27,91±0,76ΔΔ33,33±1,59**29,30±1,46КФК, мккатол/гбелка·час120,25±3,71$$129,21±7,62138,98±4,22**ФФК, ммоль/мгбелка·час12,01±0,67 ΔΔ$$19,47±0,40**16,71±1,15Пируват, мкмоль/гткани0,14±0,01$$0,14±0,00$$0,17±0,00** ΔΔ159Таблица 4.4.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
