А.И. Нетрусов, М.А. Егоров - Практикум по микробиологии (1125598), страница 170
Текст из файла (страница 170)
Картофельная среда. Используют в основном для культивирования спорообразующих бактерий, представителей рода Сад!оЬасгеги некоторых других хемоорганотрофных бактерий. В сухом веществе картофеля содержится 5 — 13 % азотистых веществ и около 75 % углеводов, он богат соединениями калия и фосфора, рядом витаминов. На картофельных средах хорошо развиваются микроорганизмы, образующие амилолитические ферменты, но чаще других на них выращивают представителей рода С!оюйиЫит. Клубни картофеля, отобранные лля приготовления этой среды, тщательно моют, очищают от кожуры, глазков и испорченных мест и снова моют.
200 г мелко нарезанного картофеля заливают 1 л водопровоцной волы и кипятят 30 мин. Отвар фильтруют через вату, доводят объем фильтрата ло 1 л и разливюот в сосуды для культивирования. Среду стерилизуют 1 ч при 1 ати или 30 мин при 1,5 ати. Необхолимость длительной стерилизации обусловлена тем, что на картофеле всегда много спорообразующих почвенных форм микроорганизмов. 12. Почвенная вытяжка (почвенный экстракт). Используется цля выделения и культивирования многих почвенных бактерий. 500 г плодородной почвы заливают 1,5 л водопроводной воды и автоклавируют 30 мин при 1 ати. Полученный экстракт фильтруют через бумажный фильтр, добавляют к горячему фильтрату 0,5 г СаСОз, тщательно перемешивают и через 5 — 7 мин фильтруют вновь. К экстракту, как правило, цобавляют 0,2 г КзНРО4 и доводят объем цо 1 л, рН 6,8 — 7„0.
Среду стерилизуют при 1,5 ати 30 мин. 13. Пептон-црожжевая среда с глюкозой. Среда состава (г): пелтон — 10,0; дрожжевой экстракт — 1,0; глюкоза — 1,0 — 4,0; вода дистиллированная — 1000 мл; рН 6,8 — 7,0. Среду стерилизуют прн 0,5 ати 20— 30 мин. 14. Бобавый отвар. 50 г бобов (белой фасоли или гороха) заливают 1 л водопроводной воды и варят до набухания и растрескивания кожуры, но не до полного разваривания (необходимо 571 следить, чтобы крахмал не превратился в клейстер).
Горячий отвар фильтруют через вату или несколько слоев марли и доводят объем до 1 л. 15. Крахмало-аммиачная среда (КАА). Среда состава (г): растворимый крахмал — !0,0; (МН4)зБО, — 2,0; К,НРО~ — 1,0: М880з 7НтΠ— 1,0; !ЧаС! — 1,0; СаСОз — 3,0; агар — 15,0! вола водопроводная— 1000 мл. Крахмал предварительно заваривают отдельно в небольшом количестве горячей воды и затем приливают к остальной среде.
Среду стернлизуют при 1 ати 20— 30 мин. 16. Среда Чапека. Среда состава (г): сахароза — 30,0 или глюкоза — 20,0; )Чаг40, — 2,0; КзНРОх — 1,0: М88О4 7Н,Π— 0,5; КС! — 0,5; Ге804. 7Н,Π— 0,1; вода дистиллированная — 1000 мл. Среду стерилизуют при 0,5 ати 20 — 30 мин.
СРЕДЫ ДЛЯ САХАРОЛИТИЧЕСКИХ КЛОСТРИДИЙ 17. Картофельная среда с мелом. После стерилизации к среде М !1 добавляют стерильный мел в количестве 1 — 2 г/ л. Мел стерилизуют в муфельных печах при 450 — 500 С 20 — 30 мин или в сушильном шкафу при 160 С в течение 5 — 6 ч. 18. Среда с глюкозой и пептоном. Среда состава (г): глюкоза — 10,0; пелтон — 10,0; К,НРО4 — 1,0; СаСОз — 3,0 — 5,0: вода водопроводная — 1000 мл. Мел стерилизуют отдельно (см. среду № 17) и добавляют к стерильной среде.
СРЕДЫ ДЛЯ (ИОЛОЧНОКИСЛЫХ БАКТЕРИЙ 19. Сусло с дробиной. 8 — 10'Б сусло (среда М 2) с дробиной. К стерильной среде добавляется в избытке (1О г/л) стерильный мел (см. среду № !7). 20. Обрат. Обезжиренное молоко (обрат) — среда М 5. Часто сто разбавляют водой в соотношении 2: 1. 21. Среда МКБ. Среда состава (г): гидролнзат казеина — 10,0; мясной экстракт — 10,0; дрожжевой экстракт — 5,0; глюкоза — 20,0; ацетат натрия — 5,0; цитрат аммония (двузамешенный) — 2,0; твин 80 — 1,0; КзНРО4 — 2,0; М88Оз 7НзΠ— 0,2; Мп8О4 4 НтΠ— 0,0зч вода дистиллированная — 1000 мл; рН 6,2 — 6,5. Среду стерилизуют при 0,5 ати 20— 30 мин. СРЕДЫ ДЛЯ САПРОТРОФНЫХ БАКТЕРИЙ 22.
Среда для сапротрофпых коринебактерий. Среда состава (г): гидролизат казвина — 10,0; дрожжевой экстракт — 5,0; глюкоза— 5,0; 14аС! — 5,0; вода дистиллированная — 1000 ьш; рН 7,2 — 7,4. Среду стерилизуют при 0,5 ати 20 — 30 мин. 23. Среда для сапротрофпых микобактерий и нокардий.
Среда состава (г): мясо-пептонный бульон (среда № 1) — 100 мл; 3 — 4 Б сусло (среда № 2) — 100 мл; агар — 3,0 г. Среду стерилнзуют при 0,5 ати 20 — 30 мин, СРЕДЫ ДЛЯ ПРОПИОНОВОКИСЛЫХ БАКТЕРИЙ Жирные кислоты, образуемые пропионовокислыми бактериями прн использовании глюкозы, необходимо ежедневно нейтрализовать стерильным 10%-м раствором 1заНСОз. 24. Среда 1. Среда состава (г): глюкоза — 20,0; дрожжевой экстракт — 4,0; гидролизат казеина— 10,0; ()з(Н»)з80» — 3,0; СоС!з 6НзΠ— 0,005; Мп80» 4НзΠ— 0,005; вода дистззллированная — 1000 мл; рН 6,8 — 7,0. Глюкозу стерилизуют отдельно и вносят в стерильную среду перед пссевом.
25. Среда П. Среда состава (г): лактат !ча или Са — 10,0; дрожжевой экстракт — 10,0; гидролизат казвина — 10,0; КНзРО» — 2,5; вода дистиллированная — 1000 мл; рН 6,8 — 7,0. 26. Среда 1П. Среда состава (г): глюкоза —. 20,0; кукурузный экстракт — 20,0; (1ЧН»)з80» — 3,0; СоС1з. 6НзΠ— 0,005; вода дистиллированная — 1000 мл; рН 6,8 — 7,0. Глюкозу стерилизуют отдельно и вносят в стерильную среду перед посевом. 27. Среда 1У. Среда состава (г): глюкоза — 20,0; (!4Н»)з80» — З,О; КН,РО» — 1,0; М880» 7НзО— 0,2; СоС!з.
6НзΠ— 0,005; биотин — 1,0 мкг; пантотенат Са — 1000 мкг; тиамин— 200 мкг; вода дистиллированная — 1000 мл; рН 6,8 — 7,0. Глюкозу и витамины стерилизуют отдельно и вносят в стерильную среду перед посевом. СРЕДЫ ДЛЯ АКТИНО)ИИЦЕТОВ 28. Овсяный агар (1БР— 3).
Среду применяют для хранения и определения культуральных, а также морфологических признаков. Овсяная мука (или хлопья) — 20,0 г; агар — 20,0 — 25,0 г; вода дистиллированная — 1000 мл; следы солей — Ре80» — 0,1 г; МпС1з — 0,1 г; ХпЗО» — 0,1 г. Вместо дистиллированной воды и солей можно использовать водопроводную воду.
Для приготовления среды овсяную муку (или хлопья) варят в 1 л воды 20 мин, фильтруют и доводят объем до 1 л. Среду стерилизуют при 0,5 ати 20 — 30 мин. 29. Среда Красильникова )з! 1. Среда состава (г); глюкоза — 20,0; К!!Оз — 1,0; К,НРО» — 0,5; М880» 7НзΠ— 0,5; КаС! — 0,5; СаСОз — 1,0; Ре80, 7Н,Π— следы; вода водопроводная — 1000 мл; рН 7,0 — 7,2. Среду стерилизуют при 0,5 ати 20 — 30 мин. ЗО. Среда Красильникова № 6. Среда состава (г): крахмал растворимый — 10,0; кукурузный экстракт — 10,0; (!»Н»)з80» — 3,0; !з(аС! — 3,0; СаСОз — 3,0; вода водопроволная 1000 мл; рН 7,0 — 7,2.
Среду стерилизуют при 0,5 ати 20 — 30 мин. 31. Среда Красильникова № 71. Среда состава (г): крахмал растворимый — !5,0; кукурузный экстракт — 10,0; (!з!Н»)з80» — 4,0; К,НРО» — 2,0; СаСОз — 3,0; вола водопроводная 1000 мл; рН 6,6 — 7,2. Среду стерилизуют при 0,5 ати 20 — ЗО мин. 32. Среда Гаузе № 1. Среда состава (г): крахмал растворил»ый — 20,0; КНОз — 1,0; К,НРО, — 0,5; М880» 7Н,Π— 0,5; ИаС1 — 0,5; Ре80» 7Нз0 — ~~еды; вода в~дояров~дна~ !000 мл; рН 7,2 — 7,4.
Среду стерилизуют при 0,5 ати 20 — 30 мин. ЗЗ. Среда Ваксмана, Среда состава (г): глицерин — 3,0; К,НРО» — 1,0; 1'»а)чОз — 2,0; М850». 7Н,Π— 0,5; КС! — 0,5; Ге$0» 7Н,Π— 0,01; вода водопроводная 1000 мл; рН 7,0. Среду стерилизуют при 0,5 ати 20 — 30 мин.
573 СРЕДЫ ДПЯ МИКРООРГАНИЗМОВ, ИСПОЛЬЗУЮЩИХ ЦЕЛЛЮПЮЗУ 34. Среда Хетчинсона и Клейтона для аэробиых бактерий. Целлюлюза — кусочки фильтровальной бумаги (1О г/л); !4аМО, — 2„5 г; К,НРλ— 1,0 г; М880». 7НзΠ— 0,3 г; 1МаС! — 0,1 г; СаС!Г 4НзΠ— 0,1 г; ГеС!з 6Н~Π— 0,01 г; вода дистиллированная — 1000 мл; рН 7,2 — 7,3.
Среду стерилизуя»т прн 1,0 ати 20 — 30 мин. 35. Среда Имшененкого для анаэробных бактерий. Среда состава (г): фильтровальная бумага — 15,0; 1'(а1»Н»НРО» — 1,5; КН,Рλ— 0,5; КзН!'О» — 0,5; М880». 7НзΠ— 0,4; !ЧаС! — 0,1; пелтон — 5,0; Мп80».4НзО— следы; Ге8О» 7НзΠ— следы; СаСОз — 2,0; вода дистиллированная — 1000 мл; рН 7,0 — 7,4. Среду стерилизуют прн 0,5 ати 20 — 30 мин.
СРЕДЫ ДЛЯ УКСУСНОКИСПЫХ БАКТЕРИЙ 36. Сусло с этанолом. 4 — 6 'Б сусло (среда )ЧЗ 2) — 100 мл; этанол (ректификат) — 4 — 5 мл; рН 6,5 — 6,8. Среду стернлнзуют при 0,5 ати 20 — 30 мин. 37. Среда с глюкозой. Среда состава (г): глюкоза — !00,0; дрожжевой экстракт — 10,0; СаСО, — 20,0; ашр— 15,0; вода дистиллированная — 1000 мл; рН 6,8. Среду стерилизуют при 0,5 ати 20— 30 мин. 38.
Среда длн бактерий рода С!исоппЬисгег. Среда состава (г): дрожжевой экстракт — 5,0; пелтон — 3,0; маннит — 25,0; агар— 15,0; вола дистиллированная — 1000 мл; рН 6,7 — 6,8. Среду стерилизуют при 0,5 атп 20 — 30 миц. СРЕДЫ ДЛЯ БАКТЕРИЙ РОДА САШОВАСТЕЯ 39. Картофельный агар. Готовят картофельную среду (среда 1»э 11) с добавлением 20 г/л 'агара. 40.
Среда Красильникова и Беляева. Среда состава (г); пелтон — 1,0; дрожжевой автолизат (среда М 10) — 1.0 мл: М880» 7НзΠ— 0,2! агар — 15,0; вода дистиллированная — !000 мл. Среду стерилизуют при 0,5 ати 20 — 30 мин. СРЕДЫ ДЛЯ МЕТИПОТРОФОВ 41. Среда Хирш и Конти. Среда состава (г): (74Н»)з80» — 0,5 г; КНзРО» — 1,36 г; 1!азНРО» 7НзΠ— 2,13 г: М880» 7Н,Π— 0,2 г; СаС!з.2Н,Π— 10,0 мг; Мп80».4Н,Π— 2,5 мг; Ге80» 7Н,О— 5,0 мг; ИазМо0» 2НзΠ— 2,5 мг; гидрохлорид метиламина — 6,75 мг; агар — 18,0 г: вода дистиллированная — 1000 мл; рН 7,2. Непосредственно в питателы»ую среду добавляют 4 г/л метанола. Б качестве источника азота вместо (Н Н»)з80» можно использовать КХОз или мочевнну в концентрации 100 мМ.
42. Среда Мевиуса. Среда состава (г): !чаМОз — 1,0; К,НРО, — 1,0; ИаС! — 0,5; М880». 7НзΠ— 0,5: вода водопроводная — 1000 мл. К 20 мл стерильной среды добаюиют несколько капель метанола или после посева колбы помешают в эксикатор, в который ставят открытую пробирку с метанолом. 574 43. Среда Каиеда. Среда состава (г): КНзРО4 — 2,0; (!'(Н~)з8О~ — 2,0„' НаС! — 0,5; М88О4. 7НзО— 0,025; Ге8Оз 7НзΠ— 0,01; вода дистиллированная — 1000 мл.
Исходное значение рН среды 7,5. Среду стерилизуют при 1,0 ати 20 — 30 мнн. После стерилизации в среду вносят 0,3 % (по объему) стерильного метанола (стернлизуют фильтрованием). 44. Среда ММБ. Среда содержит (г/л): К,НРО, — 1,2; КНзРОч — 0,62; СаС1, 6НзΠ— 0;05; М88О4 7НзΠ— 0,20; МаС! — 0,10. Микроэлементы (мкг/л, конечная концентрация в среде): ГеС!з 6НзΠ— 1000,0; (ННд)з804 0,5; Сп80з 5НзΠ— 5,0' Мп80х'5НзО— 10,0; НазМоО~. 2Н20 — 10,0; НзВОз — 10,0; ХпбО4 7НзΠ— 70,0; СоС!з 6НзΠ— 5,0.
Стерилизация — при 1 ати. В стерильную среду добавляют стерильныи (фильтрация) метанол до О, ! — 0,2 %, рН срелы — 7,0. В агаризованную среду добавляют 0,5 — 2,0 % очишенного агара (выщелоченного). Метилобактерии не требуют витаминов. СРЕДЫ ДЛЯ АЗОТФИКСА ТОРОВ 45. Среда Эшби лдя азотобактера и олнгоинтрофилов. Среда состава (г): сахароза или маннит — 20„0; К,НРОх — 0,2; М88О,.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
