А.И. Нетрусов, М.А. Егоров - Практикум по микробиологии (1125598), страница 165
Текст из файла (страница 165)
Девять стеклянных светофильтров вмонтированы в диск, укрепленный на задней стенке корпуса прибора (табл. П.1). Светофильтр в световой пучок включается рукояткой. Цифры на шкале показывают, какие светофильтры включены. Рабочее положение каждого светофильтра фиксируется. При необходимости замены светофильтра открывают крышку со сторонка осветителя и с помощью прилагаемого к прибору ключа вынимают светофильтр, заменяя его другим, В правом кюветодержателе устанавливают две кюветы.
Их переключение производят поворотом рукоятки до упора. Руко- Та бл и ца П.5 ятка скреплена с червяком, по которому Светофильтры прибора ФЭК-5бМ перемепшется винт, несущий на себе кюветодержатель. В левом пучке устанавливают при необхолимости одну кювету. К прибору прилагаются четыре комплекта кювет.
Каждый комплект состоит из семи кювет с нижеуказанными расстояниями между рабочил~и гранями (мм): 50, 30, 20, !0,5,3, 1. 11а правый барабан нанесены две шкалы: черная — шкала светопропускания (процентные отношения Ф/Ф,) и красная, соответствующая оптической плотности (1)) образца, под которой понимается десятичный логарифм величины, обратной коэффициенту пропускания (см. табл. П.5). Таким образом, если при данной установке барабана отсчет по шкале светопропускания равен т, то по шкале оптической плотности 1) = -1й т.
555 На наклонной плоскости корпуса прибора укреплен микроамперл~етр. В момент равенства фототоков стрелка микроамперметра устанавливается на «Ом Узел шторки расположен на верхней части прибора. Открытие и закрытие светового окна осуществляют переключением рукоятки. Блок питания с прибором соелиняется через штепсельный разъем. Все основные узлы блока питания смонтированы на массивном основании и закрыты кожухокй на боковых стенках которого имеются вентиляционные окна для охлаждения рабочих частей блока питания. Тумблер служит для переключения ламп СЦ-98 и СВД-120А. На вилке, посредспюм которой блок питания включается в сеть 220 В, выведен кон пакт с гайкой. Перед началом работы к этому контакту подсоединяется заземляющий проводник, в результате чего заземляются прибор и блок питания.
Блок пигания снабжен предохранителем на 5А и выключателем сетевого напряжения. Методика определения концентрации вещества в окрашенных и мутных растворах одинакова, поэтому все дальнейшие указания по работе прибора являются общими для колоримстрических и нефелометрическнх измерений. Измерения на приборе можно начинать спустя 30 мин после валю ~ения блока питания и лампы СЦ-98 фотометрической.
В течение этого времени электросхема прибора будет прогрета, и наступает достаточно стабильный режим ее работы. При работе с ртутной лампой ее включают за 10 — 15 мин до начала измерения, но так же после 30-минутного предварительного прогрева электросхемы с лампой СЦ-98. Нельзя оставлять без надобности включенной ртутную лампу прибора, так как это сокращает срок службы лампы. Кроме того, дал~па разогревает светофильтры прибора, что также нежелательно. В случае перерыва в работе более 20 мин ртутную лампу следует выключать. При работе с ртутной лампой и лампой накаливания с некоторыми светофильтрами поступающий на фотоэлементы световой поток оказывается чрезмерно высоким, что приводит к нестабильной работе прибора и выражается в колебании стрелки микроамперметра.
В таких случаях необходимо уменьшить чувствительность прибора электрически, повернув рукоятку чувствительности по часовой стрелке, либо, если нестабильность остается высокой, ввести в пучок лучей нейтральные светофильтры, приложенные к прибору. Нейтральные светофильтры устанавливакггся в световые окна в кюветном отделении. Рабочие поверхности кювет перед каждым измерением следует тщательно протирать.
При установке кювет в кюветодержателе нельзя касаться пальцами рабочих участков поверхностей (ниже уровня жидкости в кювете). Наличие загрязнений или капель раствора на рабочих поверхностях кюветы искажает результаты измерений. Если в процессе работы светофильтр, с которым производилось измерение, меняется на другой, то измерения рекомендуется производить не ранее чем через 5 мин после смены светофильтра. Измерение светопропускания или оптической плотности раствора Устанавливают «электрический нуль» прибора, перекрывая световые пучки шторкой. Рукояткой нулевого тока стрелку микроамперметра подводят к нулю. В левом световом пучке на все время измерения помещают кювету с растворителем.
Если растворитель не окрашен, можно ставить кювету с дистиллированной водой. Это делают, чтобы исючючить возможность разогревания левого фотоэлемента теплом светового пучка. Известно, что вола и водные растворы очень хорошо поглощают тепловые лучи. В ряде случаев кювету в левый пучок не ставят. В правый пучок света помещают ккшету с исследуемым раствором.
Индекс правого барабана выводят на отсчет 100 по шкале светопропускания. Вращением левого измерительного барабана добивакпся установки стрелки л~икроамперлгегра на «О». Если левым измерительным барабаном установить «О» не удается, то в правый световой пучок прибора вводят нейтральный светофильтр, который обеспечит установку 556 «0«левым барабаном. Затеи поворотом рукоятки кювета с раствором в правом пучке заменяется кюветой с растворителем, при этом стрелка л1икроампермегра смешается от нулевого положения.
Вращением правого измерительного барабана стрелку возвращают в положение «О» и отсчитывают по шкале этого барабана величину светопропускания или огггической плотности замеренного раствора. Чтобы избежать ошибок, которые могут возникать в процессе измерения, рекомендуется не ограничиваться одним измерением. При измерениях барабан измерителыюй диафрагмы необходимо подводить к индексу с одной стороны — для исключения люфта в механизме и достижения вариаций не более 0,3 %.
Выбор светофильтра. Наличие в приборе комплекта светофильтров и набора кювет позволяет подобрать такое их сочетание, при котором ошибка в определении концентрации будет наименьшей. При работе со светофильтрами № 1 и 2 рекомендуется применять лампу СВД-120А. Максимум пропускания светофильтров № 3, 4, 6, 7 примерно совпадает со спектральными линиями ртути (405, 436, 546, 578 нм), что позволяет использовать эти светофильтры при работе с ртутной лампой. Выбор светофильтра производят следующим образом. Раствор наливают в кювету (о выборе размера кювет см. ниже) и производится определение оптической плотности для всех светофильтров (№ ! — 9) на двух лампах.
По полученным данным строят кривую, откладывая по горизонтали длины волн, соответствующие максимуму светопропускания светофильтров, указанные в описании прибора, а по вертикальной оси— соответствующие значения оптической плотности раствора. Отмечакп тот участок кривой, для которого выполняя~тел следующие условия: 1) оптическая плотность имеет значительную величину; 2) ход кривой примерно параллелен горизонтальной оси, т.е.
оптическая плотность мало зависит от ллины волн. Светофильтр для работы выбирается так, чтобы длина волны, соответствующая его максимуму светопропускания, приходилась на отмеченный выше участок спектральной кривой испытуемого раствора. Если эти условия выполняюшя для нескольких светофильтров, то выбирают тот из них, для которого чувствительность прибора выше. Выбор кюветы. Как выше указывалось, абсолютная ошибка измерения коэффициента светопропускания не превышает 1 У6. Относительная ошибка определения концентрации распюра будет различной при работе на разных участках шкалы прибора и достигает минимума при значении оптической плотности 0,4. Поэтому при работе на приборе рекомендуется путем соответствующего выбора кювет работать вблизи указанного значения оптической плотности. Предварительный выбор кювет производится визуально, соответственно интенсивности окраски раствора.
Если раствор интенсивно окрашен (темный) „следует пользоваться кюветами с мшюй рабочей длиной (1 — 3 мм). В случае слабоокрашенных растворов рекомендуется использовать кюветы с большой рабочей длиной (30 — 50 мм). В предварительно подобранную кювету наливают раствор и измеряют сто оптическую плотносп, включив в ход лучей соответствующий для данного раствора светофильтр. При измерении ряда растворов кювету заполняют раствором средней концентрации. Если полученное значение оптической плотности составляет примерно 0,3 — 0,5, данную кювету выбирактг для работы с этим раствором. Если «1 > 0,5, берут кювету с меньшей рабочей длиной: при 2) < 0,3 следует выбрать кювету с большей рабочей длиной.
Определение концентрации вещества в растворе. При определении концентрации вещества в растворе следует соблюдать определенную последовательность в работе: выбор светофильтра; выбор кюветы; построение калибровочной кривой для данного вещества; измерение оптической плотности исследуемого раствора и определение концентрации вещества в растворе. Построение калибровочной кривой производится следующим образолк Готовят ряд растворов данного вещества с известными концентрациями, охватыипощими область 557 возможных изменений концентраций этого вешества в исследуемом растворе. Измеряют оптические плотности всех растворов и строят калибровочную кривую, откладывая на горизонтальной оси известные концентрации, а на вертикальной — соотвстствуюшие им значения оптической плотности.
По калибровочной кривой в дальнейшем определяют неизвестную концентрацию вещества в исследуемых растворах. Для этого раствор наливают в ту же кювету, для которой построена калибровочная кривая, и, включив тот же светофильтр, определяют оптическую плотность раствора. Затем по калибровочной кривой находят концентрацию, соответствующую измеренному значению оптической плотности. В целях получения точных результатов измерений, а также во избежание повреждений прибора необходимо все оптические детали прибора и лампочки оберегать от запыления. РН-МЕТР— МИЛЛИВОЛЬТМЕТР РН-121 И ПРАВИЛА РАБОТЫ НА НЕМ Прибор (рис.
П.! 3) предназначен для измерения активности ионов водорода (рН) и окислительно-восстановительного потенциала (Е») водных растворов, а также для использования в качестве высокоомного нуль-индикатора и милливольгметра. Применяя электроды„селективные к одновалентным катионам, с помошью этого прибора »южно измерять активности этих катионов (рХ'), а работа с блоком автоматического титрования лает возможность использовать прибор для массового однотипного титрования. Прибором рН-121 можно производить измерения как методом отбора проб, так и непрерывно в лабораторных установках.
Диапазоны измерения величины рН преобразователем следующие: -1 —: 14; -1 —:4; 4 —:9; 9+14. Пределы измерения величины рН (рХ') определяются типом применяемых электродов. Пределы измерения ЭДС от+100 до +1400 мВ с диапазонами: -100-: !400 или 100 —:-1400 мВ; -100 —:400 или 100+ — 400 мВ; 400 —:900 или -400 —:-900 мВ; 900 —:1400 или -900 —: — 1400 мВ. Минимальный объем дозы измерешля 0,5 мл. Потребляемая мощность не более 50 Вт. Габаритные размеры преобразователя рН- 121 не более 365 х 230 х 260 мм; размеры подставки не более 160 х 190 х 500 мм.