А.И. Нетрусов, М.А. Егоров - Практикум по микробиологии (1125598), страница 162
Текст из файла (страница 162)
1. Включить выключатель центрифуги в положение ОХ. 2. Выбрать положение АНТО на кнопке МОВЕ. 3. Выбрать зональное положение ключа-переключателя. 4. Собрать ротор и загрузить его согласно инструкции. 5. Выбрать температуру, ес пределы и скорость. 6. Поставить таймер. 7. Включить кнопку вакуума в положение АНТО. 8. Нажать кнопку СТАЕТ вЂ” включится компрессор и ротор разгонится до 2000 об/мин для загрузки. 9. Загрузить и закрыть ротор.
10. Закрыть дверцу камеры. Вакуумный насос включится, ротор будет вращаться со скоростью 2000 об/мин, пока вакуум не достигнет 750 мкм, затем разгонится до выбранной скорости. Разгрузка. 1. После окончания центрифугирования ротор замедлится до 2000 об/мин и будет вращаться с этой скоростью. Вакуум сбросится автоматически. П р и м е ча н не.
Не нажимайте кнопку 5ТОР в этом режиме, иначе ротор полностью остановится. 2. Когда вакуум будет сброшен, открыть камеру и разгрузить ротор. 3. Нажать кнопку 5ТОР для полной остановки ротора. Особые замечания о работе иа центрифуге 1. Никогда не включайте центрифугу без ротора. 2. Для быстрой установки температуры охладите ротор до постановки в камеру в пределах +1 С от желаемой.
3. Не оставляйте камеру под вакуумом с выключенной сетью. 4. Не оставляйте дверь камеры открытой между открутками: вода будет конденсироваться на холодных стенках камеры, препятствуя достижению нужного вакуума. 5. Держите в чистоте полиэтиленовую плен- 546 ку радиометра. 6. Держите линзы источника света для стробоскопа чистыми. 7.
Держите камеру центрифуги чистой и сухой. 8. Всякий раз перед центрифугированием убеждайтесь в наличии достаточного количества масла. Что важно помнить о роторах 1. Нико~да не запускайте ротор без правильно установленного стробоскопа. 2. Чаще проверяйте ротор на наличие царапин, сколов, трещин или коррозии. Центрифуга должна содержап ся в чистоте. Периодически (раз в 3 — 4 мес) необходимо протирать уплотнительное резиновое кольцо крышки камеры 70%-м этанолом, затем смазывать тонким слоем силиконовой смазки.
Необходимо (раз в 3 мес) очищать воздушный фильтр (сзади на центрифуге) с помошью пылесоса, влажной тряпки или вентилятора. Общие рекомендации по использованию роторов и стаканов для центрифугирования Для центрифугирования критическим момептол~ является правильнал балансировка роторов, По этой причине роторы долзкны быть загружены стаканами симметрично, причем следует использовать лишь один тип стаканов и крышки соответствующего типа при каждом центрифуг ировании.
Тонкостенные нитратцеллюлозные или полиалломерные стаканы необходимо заполнять максимально. Перед заполнением пробирки проверяют на наличие повреждений. Целлюлозные и полиалломерные пробирки сначала заполняют на '/з объема. Внешние поверхности пробирок должны оставаться сухими при заполнении. Пробирку закрывают крышкой, фиксируют ее неплотно закрученной гайкой и убеждаются в том, что верхняя часть крышки плотно соприкасается с верхом пробирки.
Затянув гайку специальным торцовым ключом, пробирки заполняют доверху с помощью шприца. Пробирки следует уравновесить с точностью до 1 мг на аналитических весах и затянуть крепежные винты. Убедиться в том, что пробирки и пробки не протекают, нажав на каждую пробирку двумя пальцами. Если пробирки подтекают, то надо обнаружить место утечки и ликвидировать его, добавив смазки и крепче затянув винты крепления крышки.
Перед сборкой крышки необходимо смазать резьбу тонким слоем силиконовой смазки. Резиновые прокладки и поверяюсти, с которыми они соприкасаются, должны быть сухими перед сборкой крышки. Перед каждым центрифугированием необходимо убедиться в том, что крышки пробирок не повреждены. Под действием центрифужных сил гнезда ротора становятся эллиптическими, что удерживает пробирки в основном в двух местах. Это ведет к преждевременному износу нижней части коронки крышки, изменению формы крышки и может повлечь за собой поломку ротора, В дополнение к визуальному контролю, проведите кончиком пальца по поверхности коронки и убедитесь в том, что они плоские; не вогнутые и не выпуклые.
Осмотрев нижнюю часть крышки, убедитесь в том, что на ней нет тонких трещин. Любая крышка, даже с самыми мелкими трещинами, к работе не пригодна. Красные анодированные крыпзки с резиновыми прокладками используют для больших пробирок (до 38 мл) и ротора Т(бО. Они должны закрываться (закручиваться) с помощью торцевого ключа с торсионом до определенного значения приложенной силы. В пих смазка резьбы особенно важна для препятствия трению при использовании торсионного ключа. Первые четыре закрутки должны быть сделаны с усилием 21 кг/см, в дальнейшем усилие снижают до 18 кг/см. Закручивание следует производить короткими и непрерывными движениями.
При заполнении пробирок доверху с помошью шприца необходимо учитывать, что: 1) тонкостенные пробирки заполняют доверху, толстостенные пробирки могут содержать до 13 мм воздуха; 2) если пробирки (толстостенные полиалломерпые) заполнены частично (но не менее '/з объема), убеждаются, что все они заполнены до одного уровня. Пробирки герметизируют с помощью Фиксирующего винта, используя тот же ключ, которым пробирки достают из ротора (см. ниже).
Винт закручивают пол- 547 постыл, т.е. до тех пор, пока он не войдет в плотный контакт с нейлоновой проклад- кой. Чтобы убедиться в герметичности тонкостенных нитроцеллюлозных и полиалло- мерных пробирок, их надо сжать с двух сторон, Заполнение ротора Гнезда ротора должны быть чистыми и сухими. Любая влага между стенками пробирки и гнездом ротора вызывает появление вакуумного присасывания при центрифугировании и приводит к растрескиванию нитратцеллюлозных и полиалломерных пробирок. Пробирки в ротор закладывают симметрично, друг против друга.
При разбалансировке ротора центрифуга выйдет из строя. Если нужна еще одна пробирка для баланса ротора, ее заполняют материалом той же специфической плотности, что и материал, используемый в работе. Резьбу ротора смазывают силиконовой смазкой и небольшое количество вакуумной смазки наносят на резиновые кольца крышки ротора и его ручки. Крышку ротора и ручку следует плотно завернуть, но не до вхождения в контакт с метаплическими частями. Бакетные роторы.
Пробирки заполняют раствором градиента, помещая более плотные слои градиента вниз 1нитроцеллюлозные пробирки). Полиалломерные пробирки начинают заполнять с «легкого» конца градиента, так как их стенки несмачиваемые. После заполнения пробирки легкие слои замещаются тяжелыми. Заполнение ведут с помощью тонкой полиэтиленовой трубки, надетой на иглу шприца и опушенной на лно пробирки. Пробирки помещают в баксты до нанесения образца. Пробирки должны быль заполнены правильно (3 мм от края для нитроцеллюлозных и полиалломерных пробирок) и равномерно (для уравновешивания). На резьбу крышки бакста наносят тонкий слой силиконовой смазки и плотно закручивают крышку двумя пальцами.
Поверхности бакстов для нитроцеллюлозных и полиалломерных пробирок должны быть сухими, как и поверхности самих пробирок, поскольку даже самые малые количества воды быстро повреждают пробирки. При подвеске на ротор всегда помещайте каждый бакет на предназначенное ему место 1бакеты и их места на роторе размечены). Убедитесь, что противоположные бакеты 11 и 4, 2 и 5, 3 и б) уравновешены с точностью +10 мг. При установке ротора в центрифугу убедитесь, что ножки на шпинделе и выступы на роторе не совпадают, иначе при раскрутке центрифуги ротор может соскочить и повредить центрифугу. После установки бакетного ротора в центрифугу проверьтс правильность (вертикальность) положения бакстов в роторе с помощью зеркала.
Все баксты должны свободно и вертикачьно висеть на роторе. Убедитесь также, что каждый бакст легко поворачивается в гнезде на 90 в одну и в другую сторону. Максимальная скорость ротора. Чрезвычайно важно вести аккуратную регистрацию каждого использования ротора, записывая показатели счетчика оборотов в конце каждой открутки, температуру, скорость, время и уровень масла в центрифуге, Эта информация необходима для контроля сроков использования ротора и его гарантий: после определенного срока все бакетные и алюминевые роторы должны эксплуатироваться с 10%-м уменьшением числа оборотов относительно максимального.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
