Г. Юинг - Инструментальные методы химического анализа (1115206), страница 78
Текст из файла (страница 78)
20-3, На газожидкостной хроматограмме, записанной на ленте самописца, найдены пики компонентов А и В, находящиеся соответственно на расстоянии 5,0 и 7,0 см от точки ввода. Пик воздуха удален от точки ввода на 1,0 см. Приведем другие нужные данные: скорость диаграммной лепты 6 см/мин; объемная скорость потока (Р) !О см'/с; давление вверху колонки (РО) 2 атм, давление внизу колонки (Рс) 1 атм; температура колонки (Т,) 100 'С; масса неподвижной фазы (шО) 60 г; плотность неподвижной фазы (р,) 2 г/см. Рассчитайте Уз для каждого компонента (см. гл.
19). 20-4. При помощи ГХ можно определить субмикрограммовые количества цианида после превращения его в СЫС! [34). Реагентом служит водный раствор хлорамнна Т (Ы-хлор-л-толуолсульфамид-натрий). Образовавшийся СЫС! экстрагируют точно известным количеством гексана и вводят в ГХ.колонку. В качестве газа-носителя используют аргон, содержащий 5 Яз метана. При помощи детектора электронного захвата установлено, что в описанных условиях время удерживания С!)С! составляет 2,4 мнн, а нремя удерживании гексана 4,8 мин.
Пик гексана служит внутренним стандартом. Для графика зависимости отношения площадей пиков СЫС!/гексан от концентрации ионов СЫ- средний наклон равен 2,53 мл/мкг, Пробу 1 мл крови (из следственного управления) обработали описанным выше способом; зарегистрирован пик СЬ)С1 площадью 31,61 ед. и пик гексана плошадью 0,2333 ед. Каково содержание (г/мл) циаиида в крови? 20-6.
Относительную разделяющую способность насадочной (р) и капиллярной (с) колонок можно выразить отношением Р = Ммакс (о)/Ммвкс (р) (20-5) ГдЕ Миссс — МаКСИМаЛЬИая ОбЪЕМная СКОрОСтЬ ПОтОКа. Дпя дЕтЕКтараз Втарай группы отношение Миссс к т, общей введенной массе (одинаковой для обеих колонок), описывается выражением ОО т= 2~ Мдз, (20.6) где з — координата времени, взятая относительно максимума пика.
Решая зто уравнение совместно с уравнением для гауссовой кривой, получаем 1 М = МмаксехР ( — — зз). 2аз (20-7) Конечное выражение Р = ар/ас (20.8) эквивалентно выражению (20-9) в котором /п — время удерживания, Н вЂ” число теоретических тарелок (3). а) Выведите уравнение (20-8) и подтвердите его адекватность уравнению (20-9), б) Выведите аналогичное уравнение для детекторов первой группы, 20-6. С помощью ГХ проведен анализ очищенного продукта иа содержание метилэтилкетона (МЭК) и толуола. В качестве внутреннего стандарта было решено использовать трет-бутилбензол (трет-ББ). Для колонки с 1,2,3- трис-(2-цианокси)пропаном в качестве неподвижной жидкой фазы получены следующие данные: Исследуемое вещество Стаядартиая смесь Высота анна масс.
и Высота пана масс. м 0,050 3,20 — — 3,20 0,050 4,70 — — 5,21 0,050 4,20 0,045 4,11 МЭК Тол уол гирст-ББ Литература 1. МсНа!т Н. М., 1п СЬгота1ойгарЬу, А НапбЬоой о1 СЬгота(о8гарЫс апд Е!ес(горЬоге11с Ме1Ьобв, (Зб ед.), Е. Не!1тапп (ед.), Уап г!озггапб 1(е!пЬо!б, Ыетч Уогй, 1975, сЬ. 9. 2. Ра! Нойате $О Хиие! /7. $., Хт., Паз-Е)г(п(б СЬгота1обгарЬу, ТУ11еу-!п1егвс1епсе, Ыеы Уогй, 1962. 3. Уапд Р. Х., Стат $. Р., Х. Н16Ь Вез. СЬгота(ойг. СЬгогпа!ояг.
Соппппп. 1979, ч. 2, р. 487. 4. Нооо/иу М., Апа!. СЬетО 1978, ч. 50, р. 17А. 5. Стизййа ЕО К!Ма Е. Х„ХтО Апа(. СЬегп. 1977, ч. 49, р. 1004А. 6 $!еоеиз М. /7., С///!п С. Е., $/гоетайе С. )7., 53ттошЬ Р. С., Веш Зсй 1пщгшпО 1972, ч. 43, р. 1530. 7. ЕНте Е. $., РитсеЕ Х. ЕО !п Ргойгевв 1п Апа1уВса1 СЬеппв1гу, ч. 8, 55 топя Х. Е.„Етч)п8 О.
%. (едв.), Р!епшп Ргет, Нетч Уогй, 1975, р. 119. 8. Ятапу Р. $., $йал/!еЫ Н., Х!аг/)гз А., Апа!. СЬет., 1982, ч, 54, р. 1886 9. Ре/етз .Т. Е., Нев!т/гу Т. Х., Еатратзу/ Е. Е., Апа!. СЬет., 1982, ч. 54, р. !893. 1О. Ячо!/ С. ХО Стаувоп М. А., Рапзет Р. ЕО Апа!. СЬегп., 1980, ч. 52, р. 348А. 1!. Ратт/зй Х. /7., Апа!.
СЬетО 1973, ш 45, р. !659. 12, Ходпзоп Р. ЕО $соН $. Х., МеЫет А., Апа1. СЬегас 1961, ч. 33, р. 669. 13. $вее!еу С, С,, ВепНеу /Е, Маййа М., Яге!!и ЯГ. Ят., Л. Ат. СЬмп. Зос., 1963, ч. 85, р. 2497. 14. К. Х. Епеитаи!, Ститщ Р, Х., $!ечет )7. Е., Апа(. СЬегпО 1971, ч. 43, р. 2003. 15. Хедив Т., $/арр А. С., Х. СЬгогпа1обг. Зс1О !973, ч. 11, р. 234.
16, ВитуеН С, А., Кев,/Реч„1974, 25(11), р. 26. 17. Наг!тапи С. НО Апа!. СЬет., 1971, ч. 43(2), р. 113А. 18 Озтаа М. А., Й/!1 Н. Н., Ной/теп М. Ят., руевгбетд Н. Н., Апа!. СЬет, 1979, ч. 51, р. !286. 19. Втог/у $. $., Сйаиеу Х. Е., Х. Пав Спгота1ойгО 1966, ч. 4, р. 42. 20 Нат1таип С. Н. ег а1., Аегойгар1г Вез. Ыо1ев (Уаг1ап АегобгарЬ, !Уа!пн1 Сгеей, СА), 1963 (!а!!), 1966 (врпп6). 21, Аие ЯГ. А., Н!~ Н. Н., Хт., Апа!. СЬегп., 1973, ч.
45, р. 729. 22 Натт!з ЯГ. Е., НаЬуоог/ Н., Рго8гаттеб Тетрегв!иге Паз СЬгота1обгарЬу, ТУ!!ау, 5)етч Уотерс, !966. Каково содержание (масс. О/О) МЭК и толуола в пробе? 20-7. Согласно сообщению, удельные удерживаемые объемы Уз (уравнение !9-!2)) двух сорбатов составляют 240 н 200 мл на грамм неподвижной азы. Рассчитайте ожидаемое время элюнровання для колонки с той же неподвижной фазой, используя следующие данные; температура колонки 27'С; давление вверху колонки 2,20 атм, давление внизу колонки 1,00 атм; масса неподвижной фазы 3,50 г; объемная скорость 3,20 мл/с. 426 Глава 20 23 Ва( Хрокаге Б., Веллеп С Е., Апа). СЬегп., 1958, ч.
30, р. 1157. 24, Ре1егеоп О. У., Рос)е Х. Б., Ав. 1.аЬ., 1974, ч. 6(5), р. 70. 25. ХиЫол А. бг"., Болг)!ег Б, Апа!. СЬев., 1973, ч. 45, р. 921. 26. Еггге Е. Б,, Апа!. СЬегп., 1964, ч. 36(8), р. 3!А. 27. Бсьотбигб О., 0)е(талл О., Апа1. СЬев., 1973, ч. 45, р. 1647. 28. Огеел Е. Е,, Бсьтаись 1., Х., Чгогтал Х. С., Апа!. СЬев., 1964, ч. 36, о. 1512.
29. ЧХ(г!!Игле С. 1,, Омс О. ИГ., Вмсвеу О, М., Б1етег Б., Апа!. СЬев., 1981, ч. 53, р. 1!3. 30. Вгиг)у Я, Р, Апа!, СЬев., 1975, ч. 47, р. 1425, 31, Релегас 6. Х,, Апа!. СЬев., 1973, ч. 45, р. 890. 32 Еерьигг)1 Х. О., Ви1мл В. Х., Апа!. СЬев., 1973, ч. 45, р, 706. ЗЗ, В'ап В. А, Мал!в А 97., Арр!. Ярее1гове., !977, ч. 31, р 552. 34 Уа(елгоиг Х С.. Ауаиггса) У,, Бипвьгле Х., Апа!, СЬев,, 1974, ч. 46, р. 924.
Литература общего плаиа Мер(и)г Н. М., Волерп Е. Х„Вав)с Оав СЬгова1оагарьу (5ГЬ ед.), Уаг!ап 1пыгигпеп1 1))ч)в)оп, Ра1о Ацо, Са, 1969. ГЛАВА 21 Жидкостная хроматография Этот вид хроматографии был первым серьезно изученным хроматографическим аналитическим методом, предназначенным для выделения природных соединений, таких, как растительные пигменты, из растворов. Позднее интерес к жидкостной хроматографии надолго угас из-за стремительного развития газовой хроматографии.
Однако в последнее время благодаря применению принципиально новых конструкторских разработок началось ее возрождение [1 — 3). В старом варианте ЖХ стеклянную колонку размером, как правило, 1ХЗО см заполняли гранулированным твердым материалом и пропускали через нее элюент — жидкость-носитель, содержащий пробу. Основное неудобство такого метода разделения — его малая скорость.
Если для достижения хорошего разделения колонку заполняли насадкой с зернами малого размера, то под действием только силы тяжести скорость элюирования (прохождения элюата через колонку) могла снизиться до нескольких капель в минуту. Очевидный способ увеличения пропускной способности колонки состоит в использовании нагнетательного насоса или давления газа.
Жидкостные хроматографы старой конструкции не способны выдерживать необходимое высокое давление, поэтому для принципиального совершенствования метода необходима была полная реконструкция системы. Основное преимугцество жидкостной хроматографии перед газовой — возможность осуществлять разделение при более низких температурах, интервал которых ограничивается лищь точками кипения и замерзания растворителя. Это означает, что жидкостная хроматография позволяет разделять термически неустойчивые соединения, например белки, которые нельзя испарить без разрушения. В качестве одного из примеров применения современной )(4Х рассмотрим разделение нуклеозидов ~1).
До 1967 г. четкое разделение уридина, гуанозина, аденозина и цитидина на колонке диаметром 6 мм при давлении от 10 до (10 — 20) 108 кПа 428 Глава 21 Реаербуары 1иак р Манонеагр алиигиее акая колонка Терноотаигируемая камера иб или ле кагор иий Слиб Рис, 21-1, Технологическая схема типичного жидкостного хроматографа с приспособлением для градиентного влгоирования. длилось 1 ч. Два года спустя для аналогичного разделения на колонке диаметром 1 мм при давлении 400 108 кПа требовалось всего 24 мин, а в 1970 г, для такого же разделения на такой же колонке при давлении 5000 108 кПа достаточно 1,25 мин. Ясно, что аппаратура, работающая при таких высоких давлениях, должна отвечать особым требованиям. В данной главе мы рассмотрим только современные системы, работающие по принципу высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), Краткое превосходное описание состояния ЖХ на 1982 г.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
