Диссертация (1091824), страница 24
Текст из файла (страница 24)
таб. 5).Исследуемые соединения извлекают из волос методом щелочногогидролиза с последующей жидко-жидкостной экстракции и измерениемхроматографических и масс-спектрометрических характеристик аналитов.Масс-спектрометрический анализ осуществляется в режимах полногоионного сканирования (Scan) и сканирования по выделенным ионам (SIM).Содержание аналитов определяют по площадям хроматографическихпиков методом внешнего стандарта.Продолжительность проведения одного анализа составляет не более 5часов без учета времени на пробоотбор.148При составлении настоящей методики были использованы следующиедокументы:- ГОСТ Р 8.563-2009 Методики (методы) измерений;- ГОСТ Р 1.5-2012 Общие требования к построению, изложению,оформлению, содержанию и обозначению.2 Нормативные ссылкиВ настоящем методике использованы ссылки на следующиедокументы:ГОСТ 28311-89 Дозаторы медицинские лабораторные.
Общиетехнические требования.ГОСТ Р 53228-2008 Весы неавтоматического действия. Часть I.Метрологические и технические требования. Испытания.ТУ 25-2021.003-88 Термометры лабораторные. Технические условия.ТУ 25-11.1513-79 Приборы гидрометеорологические. Техническиеусловия.ТУ 6-21-12-94 Аргон газообразный (сжатый). Технические условия.3 Средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы иматериалыГазовыйхроматограф«5890»,оборудованныйсистемойавтоматического ввода пробы, соединенный с одноквадрупольным массспектрометром «5975С» фирмы «Agilent Technologies» (США). Газовыйхроматограф оснащен колонкой DB-5MSразмером 30 м0.25 мм,диаметром частиц сорбента 0.25 мкм.Весы лабораторные ABT – 5M, с пределом допускаемой абсолютнойпогрешности не более ± 0,01 мг, фирмы Kern (Чехия).Дозаторы пипеточные переменного объема (0,01 - 5 см3), фирмы«Biohit» (Финляндия), ГОСТ 28311-89.Микрошприц переменного объема (0,1 - 100 см3), фирмы «AgilentTechnologies» (США).149Термометр ртутный лабораторный,с погрешностью измерениятемпературы 0,5°С, ТУ 25-2021.003-88.Барометр-анероид метеорологический БАММ-1, с погрешностьюизмерения давления 0,1 кРа, ТУ 25-11.1513-79.IBM совместимая ЭВМ с программным обеспечением для управления«ChemStation» фирмы «Agilent Technologies» (США).Минишейкер Reax control со сменными приспособлениями дляустановки емкостей различного диаметра, фирмы «Heidolph» (Германия).Центрифуга Centrifuge 5810R, фирмы «Eppendorf» (Германия).Испаритель под током азота D-33649 Bielefild, фирмы «LiebischLabortechnik» (Германия).Мешалка Reax 2, фирмы «Heidolph» (Германия).Сушильный шкаф FD 115, фирмы «BINDER» (США).Станцияводоподготовки,Milli-QIntegral3,обеспечивающаяполучение деионизированной воды с остаточным сопротивлением 18МОм/см (25 С) и содержанием общего углерода < 30 ppb (мкг/дм3), фирмы«Millipore» (Франция).Холодильник лабораторный с морозильным отделением.Пробирки центрифужные вместимостью 15 см3, фирмы «ISOLAB»(Германия), кат.
№ 078.02.001.Пробирки центрифужные вместимостью 50 см3, фирмы «ISOLAB»(Германия), кат. № 078.02.005.Виалыстеклянныевместимостью2 см3сзавинчивающейсяполимерной крышкой, фирмы «Agilent Technologies» (США), кат. № 51902240.Вставки в виалы вместимостью 0,25 см3 с пружиной, фирмы «Restek»(США), кат. № 21776.Мерная колба вместимостью 1000 см3, фирмы «ISOLAB» (Германия),кат. № 013.01.901.150Мерная колба вместимостью 100 см3, фирмы «ISOLAB» (Германия),кат. № 013.01.101.Цилиндр мерный вместимостью 25 см3, фирмы «ISOLAB» (Германия),кат. № 015.01.025.Цилиндрмерныйвместимостью500см3,фирмы«ISOLAB»(Германия), кат. № 015.01.500.Бутыль с винтовой крышкой вместимостью 1000 см3, фирмы«ISOLAB» (Германия), кат. № 061.01.1000.Бутыль с винтовой крышкой вместимостью 100 см3, фирмы «ISOLAB»(Германия), кат.
№ 061.01.100.Пипетки Пастеровские вместимостью 5 см3, фирмы «ISOLAB»(Германия), кат. № ЕА61.1-250 ЕА.N-methyl-bis(trifluoroacetamide), например, фирмы«Sigma-Aldrich»(США), кат. № M0789-5ML.Гексан, например, фирмы «Sigma-Aldrich» (США), кат. № 34859-1L.Калия гидроксид, фирмы «Sigma-Aldrich» (США), кат.
№ 656054-6x1L.ЭлюентдляВЭЖХ,например,фирмы«Merck»(Германия),кат. № 1.06035.2500.Этилацетат, например, фирмы «Sigma-Aldrich» (США), кат. № 270989.Соляная кислота, например, фирмы «Sigma-Aldrich» (США), кат.№ 84415-100ML.Примечания1 Средства измерений должны быть внесены в Госреестр СИ РФ и поверены вустановленные сроки, иметь клеймо и/или свидетельство о поверке.2 Реактивыиматериалыдолжныиметьпаспортаилисертификаты,подтверждающие их пригодность.3 Допускается применение других средств измерений, вспомогательных устройств,посуды, реактивов и материалов с метрологическими и техническими характеристикамине хуже, чем у приведенных в разделе 3.1514 Отбор и хранение проб4.1 Пробы волос массой не менее 100 мг отбирают в центрифужныепробирки вместимостью 15 см3.4.2 Пробы должны храниться при комнатной температуре в сухомместе.4.3 Центрифужные пробирки с отобранными пробами должны бытьснабжены этикетками, содержащими информацию о пробе.5 Подготовка к выполнению измерений5.1 Подготовка лабораторной посуды5.1.1 Полимерные пробирки, предназначенные для отбора проб,полимерные наконечники для автоматических пипеток, стеклянные виалывместимостью 2,0 см3, используемые в хроматографическом анализе, должныбыть одноразовыми.5.1.2 Стеклянную лабораторную посуду моют с использованиеммоющего средства (п.
5.3.5), ополаскивают дистиллированной водой и сушатв сушильном шкафу при температуре (100 ± 10) ○С.5.2Приготовлениеисходных,рабочихиградуированныхрастворовВсе растворы готовят в стеклянных виалах вместимостью 2 см3.Рабочие и исходные растворы хранят при температуре не выше 4 ○С.Срок хранения – не более 1 мес.5.2.1 Приготовление исходных растворов аналитов и внутреннегостандарта с концентрацией 1 мг/см3Для каждого аналита и внутреннего стандарта, представляющих изсебя порошок с чистотой 99.0 %, взвешивают на лабораторных весах встеклянной виале вместимостью 2 см3 точную навеску от 0,9 до 1,1 мг идобавляют пипеточным дозатором метанол в количестве, достаточном дляполучения его концентрации 1 мг/см3 (рабочая смесь аналитов «А»).Требуемый объем метанола рассчитывают по формуле:152(1)где С – концентрация исходного раствора каждого аналита, 1 мг/см3,mi – масса навески, мг.5.2.2 Приготовление рабочих растворов аналитов5.2.2.1 Приготовление рабочего раствора смеси аналитов и внутреннегостандарта «Б» с концентрацией 100 мкг/ см3 каждого аналита.Для приготовления 1000 мм3 раствора микрошприцом в стекляннуювиалу вместимостью 2 см3 вносят по 100 мм3 исходных растворов аналитов ивнутреннего стандарта, приготовленных по 5.2.1.5.2.2.2 Приготовление рабочего раствора смеси аналитов внутреннегостандарта «В» с концентрацией 10 мкг/см3 каждого вещества.Для приготовления 1000 мм3 раствора микрошприцом в стекляннуювиалу вместимостью 2 см3 вносят:- микрошприцом 100 мм3 раствора «Б»;- пипеточным дозатором 900 мм3 метанола.5.2.3 Приготовление градуировочных образцовДляприготовленияградировочныхобразцоввцентрифужныепробирки вместимостью 15 см3 взвешивают на лабораторных весах 100±2 мгволос и добавляют микрошприцом раствор «А», «Б» или «В» в количестве,указанном в таблице 1 для соответствующего уровня концентраций.Таблица 1.
Количество вносимого в градуировочные образцы рабочегораствораУровень123456Содержаниенг/мг1005010510,5Вид раствораАББВВВ153Количество рабочегораствора, мм310501050105Послевнесенияаналитовкаждыйобразецперемешиваютнавибромиксере для гомогенизации компонентов в течение 1 минуты.ПримечаниеГрадуировочные растворы готовятся непосредственно перед проведением анализа.Хранению не подлежат.5.3 Подготовка реактивов и материалов5.3.1 Приготовление 1,5 N раствора КОНВ стеклянную бутыльвместимостью 1000 см3взвешиваютналабораторных весах 84,0 ± 0,1 мг сухого КОН и добавляют до меткидеионизированную воду, полученный раствор перемешивают.5.3.2 Приготовление смеси растворителей для экстракцииВ мерную колбу на 1000 см3 мерным цилиндром вносят 300 см3этилацетата и 600 см3 гексана и перемешивают.5.3.3 Приготовление 0,1 % раствора соляной кислоты в метанолеВ мерную колбу на 100 см3 мерным цилиндром вносят 50 см3 метанола,затем пипеточным дозатором вносят 1 см3 концентрированной солянойкислоты (37%) и доводят метанолом объем раствора до метки колбы.5.4 Подготовка проб волос для анализаВ центрифужную пробирку вместимостью 15 см3 взвешивают налабораторных весах 100 ± 2 мг волос.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
