Диссертация (Клиническое значение определения сывороточного маркера активации нейтрофилов – алармина S100A12 при аутовоспалительных заболеваниях), страница 8

Свое название это семействополучило из-за того, что первый его представитель был выделен из мозга быкапутем фракционирования насыщенным (100%) раствором сульфата аммония[204]. В геноме человека практически все представители семейства S100располагаются в длинном плече 1 хромосомы (локус 1q21) [205]. C- концевой"EF-hand" домен содержит классический кальций-связывающий мотив, в то времякак на N-конце располагается псевдо-"EF-hand" петля, специфичная для S100белков, обладающая меньшим сродством к кальцию.

Таким образом, мономерS100A12 способен связывать 2 иона Са2+ с различной аффинностью. Внутриклетки этот белок может выполнять функцию вторичного мессенджера, а псевдо"EF-hand" мотив может играть роль депо кальция при высокой концентрацииэтого иона [206]. Кроме того установлено, что S100A12 может являться ивнутриклеточным буфером цинка [207]. У S100A12 отсутствуют структурныеэлементы, необходимые для классического секреторного пути, осуществляемого39эндоплазматическим ретикулумом, поэтому его выделение из клеток происходитлибонеклассическимпутемактивнойсекрецией,либопассивноизнекротизированных клеток [208,209].

Для его ближайших родственников – белковS100A8/9 – показано высвобождение из нейтрофилов при формированиинейтрофильных внеклеточных ловушек (NETs) в ответ на инфекцию [210].Наряду с другими представителями семейства S100 – белками А8 и А9,S100A12 обладает всеми характеристиками прототипа аларминов [211,212]. Послевысвобождения из клеток белок S100A12 выполняет ряд внеклеточных функций,главной из которых является хемотаксис.

S100A12 является хемоаттрактантомдля моноцитов и тучных клеток [213,214]. Взаимодействуя с рецептором S100A12запускает провоспалительный каскад в клетках эндотелия, макрофагах илимфоцитах, приводящий в итоге к активации NFκB, активации секрециицитокинов моноцитами и увеличению молекулярной адгезии [215]. Кроме того,S100A12 способенсвязываться с Toll-подобным рецептором 4 типа (TLR4)моноцитов [216], увеличивать экспрессию и аффинность рецептора CD11b/CD18(Mac-1) нейтрофилов и способствовать их адгезии к фибриногену и фибронектинуиадгезиимоноцитов кклеткам эндотелияin vitro[217].

Наряду спровоспалительными свойствами белок S100A12 также обладает способностьюподавлятьразрушениетканейпутемконкурированиясматрикснымиметаллопротеиназами за связывание с ионами цинка [218].Показано, что сывороточный уровень S100A12 может отражать активностьвоспаления при ряде заболеваний, ведущую роль в патогенезе которых играютнейтрофилы. Так, в одном из исследований [219] проводилось сравнение уровняS100A12 и традиционных показателей воспаления (число лейкоцитов, абсолютноечисло нейтрофилов, СОЭ, «С»-РБ) у 45 здоровых людей ибольных ПБ (17больных), ювенильным хроническим артритом (60 больных), синдромом МаклаУэллса (17 больных), NOMID/CINCA(18 больных), острой миелобластнойлейкемией (5 больных), острой лимфобластной лейкемией (40 больных) исистемными инфекциями (83 больных).40Существенное повышение S100A12 при ПБ по сравнению с другимисемейными периодическими лихорадками позволяет предположить, что этотбелок может быть вовлечен в патогенез заболевания и его высвобождение независит от активации инфламмасомы.

Заслуживает внимания тот факт, что приПБ секреция S100A12 тубулин-зависимая [209], а колхицин, блокируя функциюмикротрубочек, такжеявляетсявозможным ингибитором альтернативнойсекреции S100A12 [73].Установлено, что при ПБ уровень S100A12 коррелирует с активностьюзаболевания. Так, в исследовании KallinichT. и соавт. [220] изучался уровеньбелка S100A12 у 52 детей и подростков с клинически установленным илигенетически подтвержденным диагнозом ПБ. Авторы показали, что наибольшийуровень S100A12 выявлялся у больных с недавно диагностированной ПБ, никогдане принимавших колхицин (33500±22200 нг/мл). Уровеньбелка S100A12 убольных, леченных колхицином, несмотря на периодически возникающиеприступы ПБ был значительно ниже (6260±2.120 нг/мл), минимальный уровеньнаблюдался при стабильном течении ПБ (440±80 нг/мл), однако она все равнобыла выше нормы (120 нг/мл).Сывороточный S100A12 может отражать активность и других семейныхпериодических лихорадок.

Уровень этого белка повышен у больных c активнымтечениемNOMID/CINCAисиндромаМакла-Уэллса[219].Убольныхкриопиринопатиями лечение блокаторами IL-1 приводит к быстрой нормализацииS100A12. Выявлено, что данный показатель может отражать и сохраняющеесясубклиническое воспалении при нормальном уровне СОЭ и «С»-РБ. Так, висследовании Kuemmerle-DeschnerJB и соавт. [221] изучалась эффективностьлечения анакинрой 12 больных синдромом Макла-Уэллса разной степенитяжести. Показано, что лечение анакинрой значительно уменьшает активностьболезни, при этом также отмечено снижение уровня S100A12.У больных ювенильным хроническим артритом также выявлена корреляциямежду активностью заболевания и сывороточным уровнем S100A12.

Кроме того,уровень этого белка в синовиальной жидкости у больных с олигоартритами в 1041раз превышает сывороточную [222]. На моделях мышей было показано, чтоS100A12 способен активировать воспаление в синовиоцитах [223]. Выявлено, чтоS100A12 секретируется нейтрофилами, инфильтрирующими синовию [224,225].После секреции он связывается с рецепторами RAGE миеломоноцитов иэндотелиоцитов и оказывает провоспалительное действие путем активации NF-κBи MAP-киназы.Таким образом, применяемые в настоящее время лабораторные параметры,такие как «С»-РБ и СОЭ, хорошо отражают высокую активность воспаления, номенее чувствительны при его субклиническом течении. Идеальный маркервоспаления должен быть легко выполнимым и воспроизводимым, недорогимтестом,способнымотражатьактивностьзаболеваниясвысокойчувствительностью и специфичностью. На эту роль может претендовать белокS100A12, который с высокой чувствительностью отражает как системное, так илокальное воспаление.42ГЛАВА 2.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ2.1. Группы исследованных больныхОбследован 91 больной (42 мужчины и 49 женщин в возрасте от 3 до 77лет), наблюдавшийся в Клинике нефрологии, внутренних и профессиональныхболезней им. Е.М. Тареева Университетской клинической больницы № 3 ПервогоМГМУим.И.М.СеченоваивНаучно-исследовательскоминститутеревматологии им. В.А.

Насоновой с 2010 по 2015 годы.В соответствии с целями и задачами исследования больные были разделенына3группы:восновнуюгруппувошли46больныхмоногеннымиаутовоспалительными заболеваниями, в группу сравнения – 38 больныхаутоиммунными заболеваниями, кроме того, изучали небольшую группу из 7больных с заболеваниями со смешанным – аутовоспалительным и аутоиммунным,патогенезом (полигенные аутовоспалительные заболевания).Среди 46 больных 1 группы у 34 была диагностирована ПБ, у 12 больных –другие семейные периодические лихорадки (СПЛ): криопиринопатии (синдромомМакла-Уэллса (6 больных), NOMID/CINCA (2)) иTRAPS (4). 8 больных этойгруппы после эффективного лечения были обследованы повторно.

Учитываяобсужденные в обзоре литературы особенности патогенеза ПБ, отличающие ее отдругих семейных периодических лихорадок, больных ПБ анализировали какотдельную подгруппу аутовоспаления.Диагностика ПБ проводилась по клиническим критериям Тель Хашомер(табл. 2) [226], согласно которым для постановки диагноза необходимо наличие> 1 большого критерия, > 2 малых или 1 малого икритериев.ДиагнозсиндромаМакла-Уэллса,> 5 вспомогательныхNOMID/CINCAиTRAPS,предполагаемый по клинической картине заболеваний, подтверждали примолекулярно-генетическом исследовании.43Таблица 2Критерии диагностики ПББольшие критерии стереотипныеприступы:– перитонита– плеврита– моноартритакрупных суставовногМалые критерии приступы неясныхболей в:– животе– грудной клетке– суставах,а также: боли в ногах эффективностьколхицинаВспомогательные критерии случаи ПБ в семье национальность дебют болезни до 20 лет тяжелые приступы спонтанная ремиссия отсутствие симптомов вмежприступный период признаки транзиторноговоспаления в крови эпизодическая протеинурия/гематурия удаление неизмененногоаппендикса в анамнезеВ группу сравнения было включено 38 больных аутоиммуннымизаболеваниями, подтвержденными на основании обнаружения характерного длякаждой формы иммунопатологического феномена в диагностическом титре.

В этугруппу вошли больные АНЦА-ассоциированными васкулитами (22 человека), вт.ч. гранулематозом с полиангиитом (Вегенера, ГПА) (18), эозинофильнымгранулематозом с полиангиитом (Черга-Страусс, ЭГПА) (3) и микроскопическимполиангиитом (МПА) (1); а также больные ревматоидным артритом (16).АНЦА-ассоциированныеваскулитыдиагностировалипокритериямАмериканской коллегии ревматологов 1990 г. [228], ревматоидный артрит – поклассификационным критериям ACR/EULAR 2010 г.

[227].В исследовании также изучалась группа больных так называемымиполигенными аутовоспалительными заболеваниями, в патогенезе которых рольспецифических механизмов не доказана. Однако в настоящее время имеютсясущественные аргументы в пользу преимущественного влияния при них именноаутовоспалительныхмеханизмов.Даннуюгруппусоставилибольныесанкилозирующим спондилоартритом – болезнью Бехтерева (4), интерстициальнойболезнью легких - саркоидозом (1), подагрой (1), болезнью Бехчета (1).44ДиагнозболезниБехтереваустанавливалипомодифицированнымНью-Йоркским классификационным критериям [229], болезни Бехчета – поМеждународным критериям (критериям ISBD) [230], подагры – по критериямЕвропейской антиревматической лиги EULAR 2006 г.