Диссертация (Диагностическое значение анализа матриксных металлопротеиназ у детей с расщелиной губы и неба), страница 6

1.Совершенствование ортодонтической помощи в пред- и послеоперационныепериоды. 2. Благоприятная оценка исходного состояния детей педиатрами изаинтересованностьлогопедоввраннихоперациях.3.Отсутствиепослеоперационных зубочелюстных деформаций при ранних операциях у детей счастичной расщелиной неба.Учитывая, что рост верхней челюсти может влиять и отсутствие равновесияв тяге мышц и что речь лучше развивается у детей, оперированных в возрасте до2х лет, авторы считают, что при всех формах расщелины неба операциюцелесообразно выполнять именно в этом возрасте. Такого же мненияпридерживаются J.

Bardach (1984)Несмотря на еще имеющиеся расхождения во взглядах на сроки выполненияоперации, в последнее время определяется четкая тенденция – хирургическоелечение расщелин неба целесообразно проводить в более ранние сроки.Возросшее качество хирургического лечения расщелины неба на фонеуменьшениятравматичностивмешательства,атакжесовершенствованиеанестезиологического пособия, позволили выполнять, ураностафилопластику ввозрасте 2-4 лет, в зависимости от вида формы расщелины.Однако при этом становится задача дальнейшего снижения возрастногоценза с целью наиболее эффективного восстановления функций и социальнойреабилитации.30ГЛАВА 2.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ2.1. Общая характеристика пациентов с расщелиной губы и небаКлиническое обследование и сбор материала для иммуноферментногоанализа на содержание ММП2, ММП3, ТИМП2, TGFβ2 осуществлялся в НаучномЦентре Здоровья Детей, г. Москвы, у пациентов, поступивших с 2013 до 2016года.Для оценки вида, типа и формы расщелины губы и неба, у пациентов припроведении первичной хейлопластики и уранопластики, нами использована вклинике классификация Ад. Мамедова (1998) (Рисунок 1).Рисунок 1 – Клинико-анатомическая классификация расщелины губы и небаАд.

Мамедова (1998)I.Односторонняя расщелина верхней губы- частичная,полнаяII. Двусторонняя расщелина верхней губы- частичная, асимметричная,- полная симметричная, полная асимметричная31III. Односторонняя расщелина верхней губы и альвеолярного отростка- частичная, полнаяIV. Двусторонняя расщелина верхней губы и альвеолярного отростка- частичная ассиметричная- частичная симметричная- полная ассиметричная- полная симметричнаяV.

Односторонняя полная расщелина верхней губы и нёбаVI. Двусторонняя полная расщелина верхней губы и нёбаVII. Расщелина неба- скрытая,- частичная,- полная.VIII. Атипичная форма1. Косая расщелина лица (колобома)- односторонняя- двусторонняя2. Поперечная расщелина лица- односторонняя- двусторонняя3. Срединная расщелина верхней губы альвеолярного отростка и носа.4. Срединная расщелина нижней губы и альвеолярного отростка нижнейчелюсти.В исследовании приняли участие с согласия родителей или представителейпациенты с расщелиной губы, расщелина губы и неба односторонняя, расщелинагубы и неба двусторонняя, расщелина неба частичная.Распределение пациентов по клиническому диагнозу указано в таблице 1.32Таблица 1 - Распределение пациентов по клиническому диагнозуВид расщелиныОдносторонняяДвусторонняяРасщелина губыРасщелина губы и небаРасщелина небачастичнаяКоличество95%-ные доверительныепациентовграницыАбсолютноечисло%отдо23 27,4%19,2%36,9%35 41,7%32,1%51,7%64 76,2%67,0%83,8%57 67,9%58,0%76,6%78,3%4,2%14,9%Возраст пациентов составил от 3 дней до 9 лет на момент операции.Распределение пациентов по возрасту представлено в таблице 2.Таблица 2 – Распределение пациентов по возрастуВозрастот 29 дней до 1годаот 1 до 3 летот 3 до 7 летот 7 до 11 летКоличествопациентовАбсолютноечисло%38 45,2%30 35,7%12 14,3%1 1,2%95%-ные доверительныеграницыотдо35,5%26,6%8,5%0,3%55,3%45,7%22,2%4,3%Пациенты для исследования подбирались без ограничений по полу ивозрасту, по весу, по типу родов и вскармливанию, и сопутствующей патологии.Всего приняли участие в исследовании 84 пациента из них девочек 35 (41,7% ДИ:32,1% - 51,7%), мальчиков 49(58,3% ДИ: 48,3% - 67,9%), то есть преобладаниеколичества мальчиков статистически недостоверно.

Из 84 пациентов расщелинагубы была у 64 пациентов, расщелина неба была у 75 пациентов в том числеодносторонняя у 34, двусторонняя у 35, и частичная расщелина губы у 7.Расщелина губы и неба наблюдалась у 57 (68%) пациентов из 84. Расщелина губы,у 8 пациентов (7%). Распределение пациентов представлено в таблице 3.33Таблица 3 – Распределение пациентовПараметрыМужЖенРасщелина губыРасщелина небаРасщелина небаодносторонняяРасщелина небадвусторонняяРасщелина неба частичнаяРасщелина губы и небаКоличествопациентовАбсолютноечисло%от49 58,3%35 41,7%8 9,5%75 89,3%95%-ныедоверительныеграницыдо48,3%32,1%5,0%82,1%67,9%51,7%16,4%94,1%23 27,4%19,2%36,9%35 41,7%7 8,3%57 67,9%32,1%4,2%58,0%51,7%14,9%76,6%31 36,9%53 63,1%8 9,5%8427,7%53,1%5,0%46,9%72,3%16,4%РодыПреждевременныеВ срокКесаревоВсего пациентовВ исследовании приняли участие дети, родившиеся в срок - 53 (63%) ипреждевременно - 31 (27%) в том числе кесарево сечение 8(10%).

Распределениепо вариантам родов, представлено в таблице 3.Всемпациентамбылопроведенооперативноевмешательство–хейлопластика, уранопластика в зависимости от установленного диагноза.Уранопластика была проведена в 47 случаях, а хейлопластика в 37 случаях. Также повторное взятие образца материала для исследования, было проведено упациентов, госпитализированных для проведения уранопластики после первичнойхейлопластики.Оперативное вмешательство проводилось в отделении общейхирургии Научного центра здоровья детей, г.

Москва.Уранопластика по Мамедову была сделана 47 детям (56,0% ДИ: 45,9% 65,7%), Хейлопластика, модифицированный метод: Миллард – Мамедов –Макленнан – 37 (44,0% ДИ: 34,3% - 54,1%), то есть доли обоих вариантов34операции от ½ достоверно не отличаются. Различия по полу, весу при рождении,возрасту, течению беременности и родам не имело статистически значимыхотличий (р>0,05)2.2. Иммуноферментный анализ ММП2, ММП3, ТИМП2, TGFβ2.Для проведения иммуноферментного анализа необходимо было получитьинформированное согласие родителей, так как нам необходимо было проводитьбиопсиюмягкихтканей.Дляпроведенияиммуноферментногоанализанеобходимо было провести биопсию мягких тканей у всех 84 пациентов.

Укаждого пациента с расщелиной губы и неба биопсия была проведена дважды.Первая биопсия была проведена в области патологии (Рисунки 2,3,4,5 отмеченознаком плюс), вторая биопсия была проведена вне зоны патологии (Рисунки2,3,4,5 отмечено знаком минус).Рисунок 2 – Зоны биопсии при расщелине губы. Знак плюс – очаг патологии, знакминус – вне очага патологии.Вторая биопсия была проведена вне зоны патологии в связи с тем, что тканьв этой области не изменена патологическим состоянием, и структура ее ненарушена, одновременно с этим вторая биопсия являлась контролем впроводимом иммуноферментном анализе.

Размер мягких тканей, полученных в35ходе биопсии составлял приблизительно 2 на 2 миллиметра или размером вспичечную головку.Рисунок 3 – Зоны биопсии при расщелине губы, во время оперативноговмешательства - хейлопластика. Знак плюс – очаг патологии, знак минус – внеочага патологии.Рисунок 4 – Зоны биопсии во время оперативного вмешательства приуранопластике. Знак плюс – очаг патологии, знак минус – вне очага патологии.36Рисунок 5 – Зоны биопсии после окончания оперативного вмешательства. Знакплюс – очаг патологии, знак минус – вне очага патологии.Образцы мягких тканей, полученные в ходе биопсии, помещались вполипропиленовые пробирки (Рисунок 6) с 1мл физиологического раствора вовремя операции и сразу же помещались в холодильник и хранились притемпературе 2-8°.

Каждую пробирку маркировали знаком плюс или минус, гдеплюс означал образец из зоны патологии, а минус образец, взятый вне зоныпатологии. Так же на пробирке подписывались фамилией и клиническимдиагнозом пациента.Рисунок 6 – Хранение материала биопсии мягких тканей.37Холодильник располагался в лаборатории патологический физиологиинаучного центра здоровья детей. Из материала полученного в ходе биопсииполучали супернатант (Рисунок 7) в кратчайшие сроки.

Супернатант хранилсяпри температуре -80°. Срок хранения материала составлял от трех лет до трехмесяцев. Из истории болезни, у пациентов, которые принимали участие висследовании, была выписана информация приемного отделения, информация ооперативном вмешательстве, информация первичного обследования, анамнезжизни, анамнез заболевания, данные при рождении. Полученная информациясистематизировалась в таблице.Рисунок 7 – Определение супернатанта.Для исследования необходимо было приготовление супернатанта изполученных,входебиопсииприготовитьвкратчайшиемягкихсрокитканей.послеСупернатантоперативногонеобходимовмешательства.Приготовление супернатанта проводилось в течении 1-3 дней с моментаоперативного вмешательства. Такой подход способствовал получению болеедостоверных результатов.

После получения супернатанта в нем определеноколичество белка на 1 мл объема (приложение 1)38Рисунок 8 – Частотные распределения по величине белка из зоны патологии.Для дальнейшего исследования штатив с образами отправлен в Центр кровиПервого Московского государственного медицинского университета им. И.М.Сеченова.