Диссертация (Диагностическое значение анализа матриксных металлопротеиназ у детей с расщелиной губы и неба), страница 9

Отношениесодержания ММП3 в мягких тканях из зоны патологии к мягким тканям вне зоныпатологии,различиядостоверноепокритериюМаннУитниp=0,001.Абсолютным значением ММП3 в мягких тканях при двусторонней расщелинегубы и неба составляло 16,479 нг/мл, которому соответствовало значение 13,376нг/мл из зоны вне очага патологии.Рисунок 24 – Распределение пациентов по отношению ММП3 в зоне патологии ивне зоны патологии.57Из рисунков 24 следует, что у пациентов с двусторонней расщелинойвеличина отношений в среднем больше чем при односторонней.

Максимальноезначение медианы для ММП3 было в зоне патологии при двустороннейрасщелине губы и неба у 35 пациентов 3,373нг/мл. Отношение содержанияММП3 в мягких тканях из зоны патологии к мягким тканям вне зоны патологииразличия достоверное по критерию Манн Уитни p=0,001. Абсолютным значениемММП3 в мягких тканях при двусторонней расщелине губы и неба составляло16,479 нг/мл, которому соответствовало значение 13,376 нг/мл из зоны вне очагапатологии.

Кроме максимальных значений TGFβ2 при двусторонней расщелинегубы и неба, оценили так же содержание данных параметров для других типоврассматриваемой патологии.У 34 пациентов с односторонней расщелиной губы и неба медианаколичества ММП3 в зоне патологии составляла 3 нг/мл. Когда для 7 пациентов счастичной расщелиной губы и неба данный параметр был равен 1,49 нг/мл.Для 8детей с расщелиной губы 2 нг/мл. Медиана значения ММП3 при одностороннейрасщелине губы и неба вне очага патологии составляла 2,6 нг/мл. Для частичнойрасщелины неба же составляла 0,87 нг/мл.

При расщелине губы данный параметрсоставлял 1,88 нг/мл. Минимальные же значения, ММП3, наблюдались у 7 детей счастичной расщелиной губы без вовлечения в патологический процесс неба, темне менее полученные результаты также были выше чем в зоне без патологии.ММП3 равнялось 2,002 нг/мл, а у 34 детей с односторонней расщелинойравнялось 2,995нг/мл, когда в области вне патологического процесса показательравнялся при расщелине губы 1,879 нг/мл, а при односторонней расщелине губы инеба 1,538 нг/мл.Таким образом по результатам проведенного иммуноферментного анализаММ3 в мягких тканях при различных типах РГН мы сделали следующие выводы:-Экспрессия ММП3 достоверно повышалась при всех типах РГН в мягкихтканях, взятых из зоны патологии по сравнению с мягкими тканями, взятыми иззоны вне очага патологии.58- Наибольшей экспрессия ММП3 была при двусторонней расщелине губы и неба,наименьшей при частичной расщелине губы, при которой показатели ММП2 вмягких тканях в зоне патологии лишь незначительно увеличивались.3.4.

Имуноферментный анализ тканевого ингибитора матриксныхметаллопротеиназ 2 типа в мягких тканях при различных типах расщелиныгубы и неба.Тканевые ингибиторы матриксных металлопротеиназ играют важную рольво многих нормальных физиологических процессах, таких как эмбриональноеразвитие, морфогенез, репродукция и ремоделирование тканей. Они такжеучаствуютвомногихпатологическихпроцессах,такихкакартрит,злокачественный рост, заживление ран, сердечно-сосудистые заболевания.

Тогдакак количество вновь синтезируемых ММП регулируется в основном на уровнетранскрипции,протеолитическаяактивностьсуществующихММПконтролируется путем активации проферментов или зимогенов и ингибированиемактивных ферментов эндогенными ингибиторами, такими как α2-макроглобулини тканевые ингибиторы металлопротеиназ (ТИМП). Среди четырех известныхчленов семейства ТИМП, ТИМП-2 обладает свойствами, присущими всем ТИМПДля выявления уровня ТИМП2, нами была проведена биописия мягкихтканей из зоны расщелины губы или неба, а также из зоны, прилегающейнепосредственно к расщелине губы или расщелине неба, для сравнительногоанализа содержания биохимических показателей.В биопсии всех прооперированных детей наблюдалось разное по степенивыраженности содержание ТИМП2.

А так же в супернатанте содержалось разноеколичество белка. Расчеты содержания ТИМП2 велись с учетом отношенияколичества биохимических показателей к количеству белка. Соответствующиерасчеты были проведены и для материала полученного в ходе биопсии из зоны спатологией для сравнения с зоной без патологии.Содержание ТИМП2, в биопсии мягких тканях оценено у 84 пациентов срасщелиной губы и неба или расщелиной губы (Таблица 14).59Таблица 14 – Статистические параметры ТИМП2 в мягких тканях из зонырасщелины и в мягких тканях вне зоны расщелины (НП – нет патологии).БелокТИМП2БелокТИМП2Параметр (N=84)(мг/мл)нг/мл(мг/мл)НПнг/млНПM0,146,60,153,6m0,060,920,060,52σ0,568,420,534,74Асимм.8,821,768,711,98Эксцесс79,452,5878,14,8Мин0,030,040,030,02Макс5,1634,254,8223,75Процентиль 25%0,050,450,040,36Ме0,063,290,071,38Процентиль 75%0,088,750,15,91ТИМП2 из зоны расщелины имеет значения от 0,04 до 34,25 нг/мл, гдесреднее значение равно 3,29 нг/мл, 75% значений меньше или равно 8,75 нг/мл,25% равно или ниже 0,45 нг/мл.ТИМП2 из зоны без патологии имеет значения от 0,02 до 23,75 нг/мл, гдесреднее значение равно 1,38 нг/мл, 75% значений меньше или равно 5,91 нг/мл,25% равно или ниже 0,36 нг/мл.Установлено, что при РГН количество ТИМП2 отличаются в зоне патологии отколичества в зоне без патологии.

Наблюдается достоверное увеличение.Корреляции между содержанием в мягких тканях ТИМ в очаге патологиивыявлено не было, так же не было выявлено корреляции и в мягких тканях внеочага патологии.Пациенты, принимающие участие в исследовании различались по полу,возрасту, весу, весу при рождении, типу родов, росту, типу проведенной60операции, росту при рождении, по всем перечисленным показателям с помощьюкритериев Манн-Уитни и Колмогорова-Смирнова достоверной связи с ТИМП2 вмягких тканях нет.Таблица 15 – Таблица ранговых коэффициента корреляции ТИМП 2 междупоказателем в очаге и вне очага патологии.Показатель Коэффициент корреляциирNTIMП2<0,001840,898Из таблицы 15, следует, что для ТИМП2 в образцах биопсии мягких тканей(n=84) установленная сильная, достоверная связь между биохимическимипоказателями (p<0,001), для TIMП2 коэффициент корреляции равен 0,898(p<0,001). Таким образом установлено достоверное различие показателей ТИМП2в мягких тканях из зоны расщелины с очагом вне патологии (Рисунок 25).Рисунок 25 – Совместное распределение концентрации ТИМП2 вне зоныпатологии и десятичного логарифма ТИМП2 в зоне патологии61Таблица 16 – Медианы содержания ТИМП2 при различных типахпатологии.ТИМП2нг/млТИМП2 нг/млНПДвусторонняя расщелина (n35)8,0983,94Односторонняя (n=34)5,4753,02Расщелина губы (n=8)7,0215,61Частичная расщелина неба (n=7)4,0412,38При сравнительном анализе значений медиан биохимических показателей взоне патологии и вне зоны патологии все значения были выше в зоне патологии.Медианы содержания ТИМП2 в мягких тканяхв зоне патологии и вне чага патологии приразличных типах РГН1086420Двусторонняярасщелина (n35)Односторонняя(n=34)TIMP2 нг/млРасщелина губы(n=8)Частичнаярасщелина неба(n=7)TIMP2 нг/млНПРисунок 26 – Медианы содержания ТИМП2 при различных типах РГН (НП – нетпатологии).Из таблицы 16, следует достоверное увеличение концентрации ТИМП2 помедианам в мягких тканях при двухсторонней расщелине губы и неба, чтоявляется наивысшим показателем среди других видов патологии.62Показатель медианы содержания ТИМП2 составлял 4,041нг/мл, что быломеньше чем при расщелине губы, расщелине губы и неба односторонней идвусторонней.

Максимальное содержание ТИМП2 в мягких тканях из зонырасщелины составляло 2,48 нг/мл, которому соответствовало содержание 2,703нг/мл в мягких тканях из зоны без патологии (рисунок 26).Максимальное значение для ТИМП2 было в зоне патологии придвусторонней расщелине губы и неба у 35 пациентов 8,098 нг/мл. Однакоотношение ТИМП2 в мягких тканях из зоны патологии к ТИМП2 из мягкихтканей вне зоны патологии не было достоверным.

Абсолютное значение ТИМП 2при двусторонней расщелине губы и неба составляло 32,912 у двоих пациентов,которым соответствовали значения 8,474 нг/мл и 8,508 нг/мл соответственно.Увеличение при патологии было в 1,5-2,0 раза чем в образцах без патологии. Приэтом следует отметить, что показатели вне зоны патологии при всехрассматриваемых видах расщелины примерно равны. Кроме максимальныхзначениях ТИМП2 при двусторонней расщелине губы и неба, оценили так жесодержание данных параметров для других типов рассматриваемой патологии. У34 пациентов с односторонней расщелиной губы и неба медиана количестваТИМП2 в зоне патологии составляла 5,475 нг/мл.

Когда для 7 пациентов счастичной расщелиной неба данный параметр был равен 4,041 нг/мл. Для 8 детейс расщелиной губы 7,021нг/мл. Медиана значения ТИМП2, при одностороннейрасщелине губы и неба вне очага патологии, составляла 3,02 нг/мл. Причастичной расщелиной неба же составляла 2,38 нг/мл. А при расщелине губыданный параметр составлял 5,61нг/мл. Так у 8 детей с расщелиной губы значениемедианы ТИМП2 равнялось 7,021 нг/мл, а у 34 детей с одностороннейрасщелиной равнялось 5,475 нг/мл, когда в области вне патологического процессапоказатель равнялся при расщелине губы 5,609 нг/мл,а при одностороннейрасщелине губы и неба 3,018 нг/мл.Из выше сказанного следует, что наибольший показатель ТИМП2наблюдается в мягких тканях у пациентов с двусторонней расщелиной губы инеба, а минимальный при частичной расщелине неба.63Таким образом, по результатам проведенного иммуноферментного анализаТИМП2 в мягких тканях при различных типах РГН, мы сделали следующиевыводы:- Экспрессия ТИМП2, достоверно повышалась при всех типах РГН в мягкихтканях, взятых из зоны патологии по сравнению с мягкими тканями, взятыми иззоны вне очага патологии (р<0,001).- Наибольшей экспрессия ТИМП2 была при двусторонней расщелине губы инеба, наименьшей при частичной расщелине губы.3.4.

Иммуноферментный анализ тканевого фактора роста бета 2 вмягких тканях при различных типах расщелины губы и неба.TGF-β2 - мощнейший цитокин, который модулирует эмбриональноеразвитие, формирование кости, развитие молочных желез, заживление ран,гемопоэз, последовательность клеточного цикла и синтез экстрацеллюлярногоматрикса.Для выявления уровня TGFβ2, нами была проведена биопсия мягких тканейиз зоны расщелины губы или неба, а также из зоны, прилегающейнепосредственно к расщелине губы или расщелине неба, для сравнительногоанализа содержания биохимических показателей.В биопсии всех прооперированных детей наблюдалось разное по степенивыраженности содержания TGFβ2. А так же в супернатанте содержалось разноеколичество белка.

Расчеты содержания TGFβ2 велись с учетом отношенияколичества TGFβ2 к количеству белка. Соответствующие расчеты былипроведены и для материала полученного в ходе биопсии из зоны с патологией длясравнения с зоной без патологии.Содержание TGFβ2 в биопсии мягких тканях оценено у 84 пациентов срасщелиной губы и неба или расщелиной губы.64Таблица 17 – Статистические параметры биохимических показателей (НП – нетпатологии).БелокTGF-β2БелокTGF-β2Параметр (N=84)(мг/мл)пг/мл(мг/мл)НПпг/млНПM0,1415,220,158,55m0,062,060,060,89σ0,5618,890,538,17Асимм.8,823,868,712,71Эксцесс79,4519,9778,111,67Мин0,030,10,030,06Макс5,16133,974,8254,78Процентиль 25%0,055,580,044,24Ме0,069,540,076,25Процентиль 75%0,0820,570,111,11В таблице 17, отображены статистические параметры TGFβ2 в мягкихтканях, у пациентов с РГН.